【正文】 上 海 市 臨 床 檢 驗 中 心 Shanghai Centre for Clinical Laboratory 標(biāo)本 標(biāo)本采集時間對擴增檢測結(jié)果的影響 標(biāo)本的類型和采集量 采樣及運輸容器 采樣質(zhì)量的評價 標(biāo)本采集中的防污染 上 海 市 臨 床 檢 驗 中 心 Shanghai Centre for Clinical Laboratory 標(biāo)本采集時間 血清（漿） ： 無特殊要求 如用泌尿生殖道分泌物做 CT、 NG項目：應(yīng)在抗生素應(yīng)用前或停藥兩周后采集標(biāo)本，如不能停用抗生素，應(yīng)于下次抗生素應(yīng)用前采集。 上 海 市 臨 床 檢 驗 中 心 Shanghai Centre for Clinical Laboratory 標(biāo)本驗收、拒收 血液標(biāo)本：溶血、嚴(yán)重脂血等應(yīng)拒收 泌尿生殖道分泌物：鏡下觀察到上皮細(xì)胞存在。若血清分離不充分，可 1500rpm離心 5min 。 3) 陰性對照有擴增，排除其他污染可能性后，提取液存在污染可能。 若使用定值質(zhì)控品，均值必須在實驗室內(nèi)使用自己現(xiàn)行的測定方法進(jìn)行確定，質(zhì)控品說明書上的原有標(biāo)定值只能作參考。 41S 四個連續(xù)的質(zhì)控測定值同時超出 +1s或－ 1s控制限 。 上 海 市 臨 床 檢 驗 中 心 Shanghai Centre for Clinical Laboratory 由 12S ， 13S ， 22S ， R4S ， 41S ， 10 等規(guī)則組成 ， 其中既有對隨機誤差檢出敏感的 ， 也有對系統(tǒng)誤差敏感的 。 這是在檢驗中很少發(fā)生的 （ 概率約為 %） ， 是一個檢出隨機誤差的失控規(guī)則 。 屬系統(tǒng)誤差失控 。 當(dāng) SI上限 和 SI下限 值之一 n3s對應(yīng)的值時 ， 說明該質(zhì)控測定值的變化已超出 3s， 屬 “ 失控 ” 。 上 海 市 臨 床 檢 驗 中 心 Shanghai Centre for Clinical Laboratory 失控原因分析 —陰性質(zhì)控樣本的失控原因 擴增產(chǎn)物的 “ 污染 ” 臨床標(biāo)本的核酸提取過程中發(fā)生的標(biāo)本間的交叉 “ 污染 ” . 上 海 市 臨 床 檢 驗 中 心 Shanghai Centre for Clinical Laboratory 避免基因擴增檢驗假陽性結(jié)果的措施 嚴(yán)格的實驗室分區(qū) 使用帶 “ 濾芯 ” 的吸頭 設(shè)立 “ 陰性 ” 質(zhì)控（與標(biāo)本同時處理） 使用防 “ 污染 ” （含 UNG）的 PCR試劑 臨床 “ 假陽性 ” 問題：病原微生物如結(jié)核桿菌經(jīng)藥物治療后已死亡，但 PCR仍可為陽性，故治療結(jié)束后至少兩周內(nèi)不宜做 PCR檢測。擴增效率越高，試劑靈敏度表現(xiàn)會越好。 以上幾項標(biāo)準(zhǔn)均達(dá)到要求后，當(dāng)日實驗有效，可以發(fā)放報告。如重復(fù)試驗 Ct值 40判為陽性，否則判為陰性 上 海 市 臨 床 檢 驗 中 心 Shanghai Centre for Clinical Laboratory 結(jié)果報告 定性檢測 定性檢測的結(jié)果報 “ 陰性 ” 或 “ 陽性 ” 。藥物是否能徹底清除病毒還要根據(jù)肝臟酶學(xué)、病毒血清學(xué)標(biāo)志物及核酸結(jié)果綜合考慮，僅有核酸陰轉(zhuǎn)而其他指標(biāo)不改變并不能證明臨床痊愈。 3SD、組均值 177。 定量檢測 1）結(jié)果在檢測范圍內(nèi)，則按檢測的結(jié)果直接發(fā)報告。 上 海 市 臨 床 檢 驗 中 心 Shanghai Centre for Clinical Laboratory 實驗灰區(qū)標(biāo)本的處理 定性測定中處于實驗灰區(qū)的標(biāo)本應(yīng)重復(fù)檢測一次，灰區(qū)范圍的確定及結(jié)果報告應(yīng)遵從各試劑制造商推薦的要求。如果有上揚趨勢，有可能造成陰性標(biāo)本誤判。 標(biāo)本處理嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，應(yīng)做到處理時間充分，保證標(biāo)本中的 DNA或 RNA完全釋放； 將提取的核酸加到反應(yīng)體系中后，應(yīng)將純化好的剩余核酸樣本凍存，以免在擴增檢測時出現(xiàn)意外需要重新檢測。 上 海 市 臨 床 檢 驗 中 心 Shanghai Centre for Clinical Laboratory 臨床基因擴增檢驗室內(nèi)質(zhì)量控制操作 前 20個數(shù)據(jù)使用即刻法，可對第 3－ 20個數(shù)據(jù)進(jìn)行質(zhì)控判斷 第 21個數(shù)據(jù)開始使用常規(guī)質(zhì)控方法進(jìn)行質(zhì)控判斷 上 海 市 臨 床 檢 驗 中 心 Shanghai Centre for Clinical Laboratory 失控原因分析 —陽性質(zhì)控樣本常見的失控原因 核酸提取中的隨機誤差。 屬系統(tǒng)誤差失控 。 l或同一控制品連續(xù)兩批控制結(jié)果同方向超出 2S限值 。 在實踐中 13s 、 R4s規(guī)則常檢出隨機誤差 ， 而 22s 、 41s和10x質(zhì)控規(guī)則檢出系統(tǒng)誤差 。 上 海 市 臨 床 檢 驗 中 心 Shanghai Centre for Clinical Laboratory 統(tǒng)計質(zhì)控方法 LeveyJennings質(zhì)控圖方法 LeveyJennings質(zhì)控圖結(jié)合 Westgard多規(guī)則質(zhì)控 方法 “ 即刻法 ” 質(zhì)控方法 上 海 市 臨 床 檢 驗 中 心 Shanghai Centre for Clinical Laboratory LeveyJennings質(zhì)控圖方法 根據(jù)常規(guī)條件下的變異（ RCV）計算中的平均值和 SD確定質(zhì)控線，一般以 X177。 上 海 市 臨 床 檢 驗 中 心 Shanghai Centre for Clinical Laboratory 常用質(zhì)控規(guī)則的符號及定義 符 號 定 義 12S 一個質(zhì)控測定值超出 177。 試劑合格 陰性對照無擴增、低值陽性質(zhì)控品檢出 上 海 市 臨 床 檢 驗 中 心 Shanghai Centre for Clinical Laboratory 室內(nèi)質(zhì)量控制 目的 監(jiān)測和控制實驗室常規(guī)工作的精密度，即實驗室測定的批內(nèi)和批間重復(fù)性 IQC結(jié)果決定了實驗室即時測定結(jié)果的可靠性和有效性 上 海 市 臨 床 檢 驗 中 心 Shanghai Centre for Clinical Laboratory 質(zhì)控品來源及使用 來源 :第三方、試劑盒自帶、自備 使用 : 1)凍干質(zhì)控品復(fù)溶時，要確保所用溶劑的質(zhì)量；當(dāng)溶劑為焦碳酸二乙酯（ DEPC）水時，在操作中應(yīng)盡量在通風(fēng)的條件下進(jìn)行，并避免接觸皮膚。需注意的是液化