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多聚核苷酸與核酸ppt課件(完整版)

2025-06-08 22:04上一頁面

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【正文】 體的基因組 物種 總 DNA( kbp) 染色體數(shù) 基因數(shù) 大腸桿菌 4 639 1 4 405 酵母 12 068 16 6 200 線蟲 97 000 12/11 19 000 擬南芥 125 000 10 25 500 果蠅 180 000 18 13 600 水稻 480 000 24 57 000 小鼠 2 500 000 40 30 000~ 35 000 人 3 200 000 46 30 000~ 35 000 玉米 3 000 000 20 雞 2 100 000 78 注: 1. 酵母染色體數(shù)是單倍體數(shù),野生酵母株通常含 8倍體或更多 2. 除酵母外的真核生物的染色體數(shù)均為雙倍體數(shù) 3. 雌性線蟲染色體是 12條,雄性 11條 目 錄 ? DNA是生物遺傳信息的載體,并為基因復(fù)制和轉(zhuǎn)錄提供了模板。 mRNA的帽結(jié)構(gòu) 可以與一類稱為帽結(jié)合蛋白( cap binding proteins, CBP) 的分子結(jié)合 。 目 錄 一條完整的 mRNA包括 5?非編碼區(qū) 、 編碼區(qū)和 3?非編碼區(qū) 。 目 錄 真核細(xì)胞內(nèi)重要的 snmRNAs 種類 英文名稱 生物學(xué)功能 核內(nèi)小 RNA small nuclear RNA (snRNA) 參與 hnRNA剪接,包括U U U U U6 核仁小 RNA small nucleolar RNA (snoRNA) 參與 rRNA核糖 C2’的甲基化 胞質(zhì)小 RNA small cytoplamsic RNA (scRNA) 催化小 RNA small catalytic RNA RNA剪接,包括核酶等 小干擾 RNA small interference RNA(siRNA) 參與轉(zhuǎn)錄后調(diào)節(jié);對外源入侵 RNA基因的切割 目 錄 (一)核內(nèi)小 RNA與核糖核蛋白結(jié)合共同參與mRNA前體加工 snRNA 長度( nt) 剪接 hnRNA的靶位點(diǎn) U1 U2 U4 U5 U6 U7 165 189 145 115 106 63 5?端 內(nèi)含子腺苷酸分支點(diǎn) 5?端,補(bǔ)充分支點(diǎn) 轉(zhuǎn)酯化反應(yīng), 3?剪接點(diǎn), 使外顯子連接 轉(zhuǎn)酯化反應(yīng) 組蛋白 H3前體的 mRNA3?末端裂解 高等真核細(xì)胞 snRNA的特征 目 錄 (二)催化性小 RNA參與 RNA剪接加工 一些小 RNA分子具有催化特定 RNA降解的活性 ,在 RNA合成后的剪接中具有重要作用 。 融 解 溫 度 Tm7 6 1 0 0 C9 69 28 88 48 00 . 5 00 . 7 00 . 6 50 . 6 00 . 5 5光密度(260nm)5 0 %5 0 %目 錄 ? Tm: 變性是在一個相當(dāng)窄的溫度范圍內(nèi)完成 , 在這一范圍內(nèi) , 紫外光吸收值達(dá)到最大值的 50%時的溫度稱為 DNA 的解鏈溫度 , 又稱熔解溫度 (melting temperature, Tm)。 這種雜化雙鏈可以在不同的 DNA單鏈之間形成 , 也可在 RNA單鏈之間形成 , 甚至還可以在 DNA單鏈和 RNA單鏈之間形成 , 其前提條件是兩種單鏈分子之間存在著一定程度的 堿 基 配 對 關(guān) 系 。 核酸與蛋白質(zhì)的相互作用最為常見。 目 錄 (一)按底物專一性分類 ?DNA酶 (deoxyribonuclease, DNase): 專一降解 DNA ?RNA酶 (ribonuclease, RNase): 專一降解 RNA 一、核酸酶有多種 目 錄 (二)按對底物作用方式不同分類 核酸內(nèi)切酶: 分為限制性核酸內(nèi)切酶和非特異性限制性核酸內(nèi)切酶 核酸外切酶: 5?→3 ?或 3?→5 ?核酸外切酶 (三)按對底物二級結(jié)構(gòu)的專一性分類 雙鏈酶: 作用于雙鏈核酸 單鏈酶: 作用于單鏈核酸 目 錄 二、核糖核酸酶是一類 RNA內(nèi)切酶 (一)胰核糖核酸酶識別嘧啶核苷酸 (二)核糖核酸酶 T1識別鳥嘌呤核苷酸 (三)核糖核酸酶 T2識別腺嘌呤核苷酸 目 錄 3種核酸酶作用位點(diǎn) 目 錄 三、不同脫氧核糖核酸酶有不同的作用方式和產(chǎn)物 (一)胰脫氧核糖核酸酶 Ⅰ 可切割單鏈 /雙鏈 DNA (二)脾脫氧核糖核酸酶 Ⅱ 產(chǎn)物是 3?磷酸末端的寡聚核苷酸 (三) 3?外切酶活性是 BAL 31核酸酶的主要功能 (四)限制性內(nèi)切核酸酶具有位點(diǎn)特異性 目 錄 四、 N糖苷酶可移去堿基 N糖苷酶 ( glycosidase) 有多種 , 各種非特異或堿基特異的糖苷酶可以水解核苷酸的 N糖苷鍵 ,去除核苷酸的堿基 。 構(gòu)成 tRNA的稀有堿基就是化學(xué)修飾的結(jié)果 。 目 錄 目 錄 DNADNA 雜交雙鏈分子 變性 復(fù)性 不同來源的DNA分子 目 錄 目 錄 核酸分子雜交的應(yīng)用 ( 1) Southern印跡 可檢測 DNA ( 2) Northern印跡 用于檢測 RNA 此外, 斑點(diǎn)印跡雜交 (Dot blot)和 DNA芯片(DNA micray)技術(shù)也是 利用核酸雜交原理設(shè)計的。 Tm值是 DNA變性的重要參數(shù) Tm值的經(jīng)驗(yàn)公式是: Tm = +( %G+C) 目 錄 (三)變性的 DNA可以復(fù)性 DNA復(fù)性 (renaturation)的定義 當(dāng)變性條件緩慢地除去后,兩條解離的互補(bǔ)單鏈可重新配對結(jié)合成為雙螺旋結(jié)構(gòu),或恢復(fù)局部雙螺旋結(jié)構(gòu)。 (三)核仁小 RNA參與 rRNA甲基化修飾 (四)小干擾 RNA特異阻斷體內(nèi)同源基因的表達(dá) 目 錄 第 四 節(jié) 核 酸 的 理 化 性 質(zhì) Chemical and Physical Properties of Nucleic Acids 目 錄 ? 核酸的 酸堿及溶解度性質(zhì) ? 核酸為多元酸,具有較強(qiáng)的酸性 。 目 錄 DNA mRNA 蛋白 轉(zhuǎn)錄 翻譯 原核細(xì)胞 細(xì)胞質(zhì) 細(xì)胞核 DNA 內(nèi)含子 外顯子 轉(zhuǎn)錄 轉(zhuǎn)錄后剪接 轉(zhuǎn)運(yùn) mRNA hnRNA 翻譯 蛋白 真核細(xì)胞 目 錄 (一) tRNA分子含有稀有堿基 ? 含 10 % ~2
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