質粒的提取與純化ppt課件(完整版)
【正文】 1L） 胰蛋白胨 10g 酵母提取物 5 g NaCl 10 g 加去離子水至 800ml 攪拌，使溶質完全溶解，用NaOH調節(jié) pH值至 ，加入去 離子水至總體積為 1升，高壓蒸汽滅菌 20 分鐘。 實驗原理 ? 質粒是一種細菌染色體外的、具有自主復制能力的、共價閉合環(huán)狀超螺旋結構的小型 DNA分子。 ? 用異丙醇或乙醇沉淀后洗滌，可得到較純的質粒DNA。 ? 5. 氨芐青霉素（ Amp） 用無菌水配制成 100 mg/ml 溶液，置 20℃ 冰箱保存?zhèn)溆谩? ? 5. 12,000rpm，離心 5min，將上清移至 1個新 Eppendorf 管中，注意所取體積（約 600 μL ） 。 ? Biospin 質粒 DNA 小量提取試劑盒（ 實際用） ? ? 操作過程 ? 1. 將 1～ 過夜培養(yǎng)的細菌菌液加入 離心管中。注意不要讓反應持續(xù)超過 5 分鐘。 ? 9. 重復第 8 步一次。 ? 如有蛋白質殘留，干燥后不透明，而呈白色。如不進行該步離心，則無法保證離心柱內殘液被徹底清除。 ? 溶液應該出現(xiàn)絮狀物，但不會出現(xiàn)局部沉淀。 ? 如有需要，可多次重復步驟 2，以收集更多細菌菌體。12,000rpm， 4℃ ，離心 10min，取上清液。 7.
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