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正文內(nèi)容

細(xì)菌的遺傳分析(2)(完整版)

  

【正文】 大腸桿菌供體 trpA+ supC+ pyrF+ 受體 trpA supC pyrF P1噬菌體作為載體進(jìn)行轉(zhuǎn)導(dǎo), supC+ 為選擇標(biāo)記,得到轉(zhuǎn)導(dǎo)子類型和數(shù)目如下: ( 1) supC+ trpA+ pyrF+ 36 ( 2) supC+ trpA+ pyrF 114 ( 3) supC+ trpA pyrF+ 0 ( 4) supC+ trpA pyrF 453 ( 1) supC+ trpA+ pyrF+ 36 ( 2) supC+ trpA+ pyrF 114 ( 3) supC+ trpA pyrF+ 0 ( 4) supC+ trpA pyrF 453 supC+ trpA+ pyrF+ supC+ trpA pyrF 雙交換 supC+ trpA+ pyrF+ 頻率最低的轉(zhuǎn)導(dǎo)子 3個(gè)基因中, 兩邊的 應(yīng)為供體基因, 中間的 為受體基因。 轉(zhuǎn)化的條件: ⑴ 感受態(tài)的受體細(xì)胞 ⑵ 轉(zhuǎn)化因子 DNA的大小、形態(tài)和濃度 ⑶ 受體和供體染色體的同源性 轉(zhuǎn)化過程 轉(zhuǎn)化因子的吸附 ↓ 單鏈 DNA的吸收 ↓ 聯(lián)會(huì)與整合 F= 100%= % 196+328 196+328+367 轉(zhuǎn)化在遺傳分析中的應(yīng)用 獨(dú)立片段 連鎖片段 合轉(zhuǎn)化頻率越高連鎖越緊密 供體菌株 trp+ his+ tyr+ 受體菌株 trp his tyr 基因 轉(zhuǎn)化子類別 trp + + + + his + + + + tyr + + + + 11940 3660 685 418 2600 107 1180 基因間的重組 親本型( ++) 重組型( +和 +) 重組值(重組數(shù) /總數(shù)) trphis 11940+1180=13120 2600+107+3660+418 6785/19905= trptyr 11940+107=12047 2600+1180+3660+685 8125/20222= histyr 11940+3660=15600 418+1180+685+107 2390/17990= 13 34 40 trp his tyr 利用對(duì) 4種藥物 A、 B、 C、 D具有抗性的一個(gè)供體菌株的 DNA轉(zhuǎn)化對(duì)這 4種藥物敏感的受體細(xì)胞,經(jīng)初步培養(yǎng)后再將該細(xì)胞群涂布到含有各種藥物組合的培養(yǎng)基上,結(jié)果如下: 加入的藥物 菌落數(shù) 加入的藥物 菌落數(shù) 加入的藥物 菌落數(shù) 無(wú) 10000 AB 46 ABC 30 A 1156 AC 640 ABD 42 B 1148 AD 942 ACD 630 C 1161 BC 51 BCD 36 D 1139 BD 49 ABCD 30 CD 786 ⑴ 4個(gè)基因中有 3個(gè)基因似乎是緊密連鎖的,另一基因距三者相當(dāng)遠(yuǎn), 這是哪一個(gè)基因? ⑵三個(gè)緊密連鎖基因的排列順序如何? B ADC或 CDA 四 . 轉(zhuǎn)導(dǎo) 以 噬菌體為媒介 所進(jìn)行的細(xì)菌遺傳物質(zhì)重組的過程。 性導(dǎo) :接合時(shí)由 F′因子所攜帶的外源 DNA整合到細(xì)菌染色體上的過程。 ⑵ 基因位點(diǎn)離原點(diǎn)越近,進(jìn)入 F﹣ 越早,重組機(jī)會(huì)越多;反之越晚。 –該方法原理與選擇培養(yǎng)法一致,但是采用影印法將在完全培養(yǎng)基上單菌落同時(shí)接種到不同選擇培養(yǎng)基上同時(shí)對(duì)所有菌落進(jìn)行選擇培養(yǎng),鑒定效率大大提高。 ? 通常采用平板表面涂布法或劃線法可以獲得單菌落。這種方法獲得的純系,稱為“菌種純”。 影印培養(yǎng)法 ? 把長(zhǎng)有許多菌落的母種培養(yǎng)皿倒置于包有滅菌絲絨布的木質(zhì)圓柱印章上,使其沾上來(lái)自平板上的菌落。 ⑶ F 因子插入的位置不同,使不同的 Hfr菌株有自己穩(wěn)定的轉(zhuǎn)移起點(diǎn)和次序。 F′lac F′lac tsx 可攜帶一個(gè)至多個(gè)基因,甚至半條染色體。 1. 轉(zhuǎn)導(dǎo)現(xiàn)象的發(fā)現(xiàn) 1952年 Zinder Lederberg J. 鼠傷寒沙門氏菌
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