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正文內(nèi)容

dna復(fù)制是半保留式的(完整版)

  

【正文】 并使崗崎片段延伸 DNA pol I 識(shí)別并結(jié)合于新 DNA鏈的 3ˊ端和下一個(gè) RNA引物之間的切口 。 連續(xù)和不連續(xù)合成的結(jié)合使得復(fù)制叉整體向一個(gè)方向延伸 。 Kornberg發(fā)現(xiàn)的 DNA聚合酶就是現(xiàn)在的 DNA聚合酶 I, 是分子量為 109,000的一條多肽鏈 , 具有聚合活性及 3ˊ 5ˊ 外切酶活性 , 還有 5ˊ 3ˊ 核酸酶活性 。 將生長(zhǎng)在 15NH4Cl培養(yǎng)基的 氮源,但密度較低的 14N ( 14NH4Cl) 培養(yǎng)基中培養(yǎng)。 兩種復(fù)制模式 ( a)單向復(fù)制模式 ( b)雙向復(fù)制模式 DNA復(fù)制是雙向進(jìn)行的 大腸桿菌染色體DNA雙向復(fù)制模式 復(fù)制起點(diǎn) 復(fù)制叉 復(fù)制叉 真核生物 DNA復(fù)制有多個(gè)復(fù)制起點(diǎn),同時(shí)雙向復(fù)制 DNA合成時(shí) , 核苷酸是通過(guò)酶催化加到一個(gè)正在延伸的DNA鏈上 , 這種酶要求一條完整的 DNA鏈作為模板 , 去合成一條互補(bǔ)鏈 , 所以這樣的酶叫做 DNA指導(dǎo)的 DNA聚合酶 。 [詳見 P414— 415] 由于 DNA的兩條模板鏈?zhǔn)欠雌叫械?, 又因?yàn)?DNA總是沿5ˊ→ 3ˊ方向合成 , 即兩條新鏈?zhǔn)茄刂喾捶较蚝铣?。 RNA引物是通過(guò) 引發(fā)酶 合成的 , 引發(fā)酶 是一個(gè)稱為 引發(fā)體的大的復(fù)合物 中的成分 , 引發(fā)體還包括使 DNA解旋的 解旋酶和其它的一些輔助蛋白 。 引發(fā)體 引物酶 DNA聚合酶 III DNA聚合酶 I DNA連接酶 滯后鏈 前導(dǎo)鏈 單鏈結(jié)合蛋白 解旋酶 復(fù)制叉移動(dòng)需要多蛋白復(fù)合體 復(fù)制叉的移動(dòng)除了需要用于聚合反應(yīng)的 DNA pol III以外,至少還需要四種其它蛋白質(zhì)。 單鏈結(jié)合蛋白 ( SSB) :其 作用是當(dāng)解旋酶作用后 , 它可以防止解開的螺旋恢復(fù)原來(lái)狀態(tài) 。 大腸桿菌和其它細(xì)菌的 DNA連接酶要求 NAD+提供能量,在高等生物和噬菌體中,則要求 ATP提供能量。 (見 P422表 344) 富含 AT重復(fù)區(qū)的部位起著使復(fù)制泡中心定位的作用。 一旦形成 Tuster復(fù)合物 , 就可以通過(guò)阻止解旋酶解旋 DNA來(lái)封閉復(fù)制叉的通路 。 ? 真核生物也象 ,復(fù)制是雙向的。由 端粒酶 負(fù)責(zé)新合成鏈 5?RNA引物切除后的填補(bǔ),亦保持 端粒的一定長(zhǎng)度 。當(dāng)前導(dǎo)鏈合成到某一點(diǎn)時(shí), 露出滯后鏈的起點(diǎn) ,滯后鏈開始復(fù)制。 據(jù)估計(jì)人體內(nèi)細(xì)胞中每天每 109堿基對(duì)就有多達(dá) 103堿基對(duì)發(fā)生脫嘌呤 。 DNA損傷之一的胸腺嘧啶二聚體可以通過(guò)直接修復(fù)機(jī)制修復(fù)。 每種 DNA糖基化酶通常對(duì)一種類型的堿基損傷特異。 這一區(qū)別很重要 , 因?yàn)樾迯?fù)酶需要識(shí)別兩個(gè)核苷酸殘基中的哪一個(gè)是錯(cuò)配的 ,否則如果將正確的核苷酸除去就會(huì)導(dǎo)致突變 。它包括由于 DNA損傷和錯(cuò)配得不到修復(fù)而引起的突變,以及由于不同 DNA分子之間的交換而引起的遺傳重組。在 , pol Ⅲ 是主要的復(fù)制酶 , 而 pol I既有復(fù)制功能 , 又有修復(fù)功能 。 6. 由于 DNA聚合酶催化的鏈的延伸是 5′→ 3′ 方向,以及雙螺旋 DNA中的兩條鏈?zhǔn)欠雌叫械模虼司酆厦秆刂鴱?fù)制叉處兩條模板鏈移動(dòng)的方向是相反的。 。 7. 復(fù)制起始是借助于引發(fā)酶合成的 RNA引物開始的 , 前導(dǎo)鏈合成需要一個(gè) RNA引物 , 而滯后鏈需要多個(gè) RNA引物 。 DNA pol I和 III還具有 5′ → 3′ 外切酶活性 。 在半保留復(fù)制方式中兩條親代鏈分開 , 分開后的每一條鏈都可作為模板用于合成互補(bǔ)的 、 反平行的子鏈 。 錯(cuò)配修復(fù) E. DNA的重組修復(fù) 胸腺嘧啶二聚體 復(fù)制 核酸酶及重組蛋白 修復(fù)復(fù)制 DNA聚合酶 DNA連接酶 重組 重組修復(fù)(rebination repairing): ? 這是 DNA的復(fù)制過(guò)程中所采用的一種有差錯(cuò)的修復(fù)方式 。然后一個(gè)稱為 AP內(nèi)切核酸酶 切去含有 AP位點(diǎn)的脫氧核糖 5磷酸,出現(xiàn)一個(gè)核苷酸空隙。在可見光存在下, 光激活酶催化兩個(gè)胸腺嘧啶堿基再生,正常的 AT堿基對(duì)重新形成, 然后光復(fù)活酶從已修復(fù)好的 DNA上脫落。 化學(xué)因素:如 亞硝酸與亞硝酸鹽 , 可加速 C脫氨基生成 U, A脫氨基生成 I。 DNA再 轉(zhuǎn)錄生產(chǎn)病毒 RNA,或者與宿主 DNA分子整合,使病毒潛伏于宿主后代中。 生成的雙鏈 DNA分子通過(guò)一個(gè)噬菌體編碼的內(nèi)切酶在+鏈上的特定部位制造一個(gè)缺口。 真核生物 DNA復(fù)制類似于原核生物 DNA復(fù)制 真核生物中 DNA的復(fù)制特點(diǎn) 真核生物染色體有多個(gè)復(fù)制起點(diǎn),多復(fù)制眼,呈雙向復(fù)制,多復(fù)制子。 終止區(qū)這樣安排可確保兩個(gè)從相反方向進(jìn)入 ter區(qū)的復(fù)制叉總能相遇 ,當(dāng)一個(gè)復(fù)制叉遇到另一個(gè)復(fù)制叉時(shí), DNA復(fù)制就完成了。然后引發(fā)酶合成 RNA引物,而 DNA pol III開始前導(dǎo)鏈和滯后鏈的合成。 3‘ 5‘ 3
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