吸光光度法的靈敏度與準(zhǔn)確度(完整版)
【正文】 ? 104～ 5 104 為中等靈敏度 。[ F e 39。 如 phen—Fe2+ 標(biāo)準(zhǔn)曲線 ， 被測液 作參比。c(HL). 代入整理： AAKA A +HLa L= [ H ][HL] [L] L HLAAK AAap = p H + l g 或 配制一系列 c相同 ,pH不同的溶液 ,測 A. 27 MO吸收曲線 Aa(HL) Ab (L) 1 2 3 4 5 6 Ab 6 5 4 3 2 1 Aa 350 400 450 500 550 600 ?/nm A 曲線 pH 1 , 2 3 4 5 6 , 由每份溶液的一對 pH、 A，可求得一個(gè) Ka, 取平均值即可 . 28 MO離解常數(shù)的測定 作圖法 LHLap pH lg AAK AA??? ?H L L2AAA ??AHL (pKa) 1 2 3 4 5 6 A pH=pKa pH pHA 曲線AL LHLlg pHAAAA? ? 曲線 0 pH HLL [ H L ]lg g [ L ]l AAAA ???????? 29 6. 雙波長分光光度法消除干擾 (不要求 ) 在 ?2， A?2 = Ax2+Ay2 在 ?1， A?1= Ax1+Ay1 ?A= A?2 A?1 = Ax2+Ay2 –(Ax1+Ay1) = Ax2 –Ax1 = ?Ax Ay2 ＝ Ay1 ?Ax =(?x2－ ?x1)bcx 消除了 y的干擾 X被測 Y干擾 ?2 ?1 ?1 Ay1 AX1 Ay2 AX2 A ?/nm 180。 應(yīng)用 : 單一組分測定示例 、 多組分測定 、 光度滴定 、絡(luò)合物組成的測定 、 酸堿離解常數(shù)的測定 。L1NaOH4mL溶解后，紫外導(dǎo)數(shù)光譜測定。 4. 干擾組分與顯色劑有反應(yīng) ,又無法掩蔽消除時(shí)： 1） 掩蔽被測組分 ，再加入顯色劑，作參比 . 2） 加入等量干擾組分 到空白溶液中 ,作參比 . 選擇適當(dāng)?shù)膮⒈热芤? 18 吸光光度法的應(yīng)用 1. 單一組分測定 1) 金屬離子 : Fephen, Ni丁二酮肟 , Co鈷試劑 2) 磷的測定 : DNA中含 P～ %, RNA中含 P～ %,
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