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儀器分析教程--高效液相色譜法(ppt63)-品質(zhì)管理(完整版)

2025-10-07 17:45上一頁面

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【正文】 合物, 7個組分只需 1min就可完成。 為了更好地了解高效液相色譜法優(yōu)越性,現(xiàn)從兩方面進行比較: 來自 中國最大的資料庫下載 1.高效液相色譜法與經(jīng)典液相色譜法 高效液相色譜法比起經(jīng)典液相色譜法的最大優(yōu)點在于 高速、高效、高靈敏度、高自動化 。 (2)氣相色譜 采用流動相是 惰性氣體 , 它對組分沒有親和力 , 即不產(chǎn)生相互作用力 , 僅起 運載作用 。 此外還配有輔助裝置 :如梯度淋洗,自動進樣及數(shù)據(jù)處理等。目前恒流泵正逐漸取代恒壓泵。玻璃管耐壓有限,故金屬管用得較多?,F(xiàn)將常用的檢測器介紹如下 : 來自 中國最大的資料庫下載 ( l)紫外檢測器 ( 2)熒光檢測器 (3) 示差折光率檢測器 幾乎所有物質(zhì)都有各自不同的折射率,因此差示折光檢測器是一種通用型檢測器。硬膠 主要用于離子交換和尺寸排阻色譜中,它由 聚苯乙烯與二乙烯苯基 交聯(lián)而成。如國外的 Porasil, Zobbex、 Lichrosorb系列,上海試劑一廠的堆積硅珠,青島海洋化工廠的 YWG系列,天津試劑二廠的 DG系列等。 所謂溶劑的紫外截止波長指當小于截止波長的輻射通過溶劑時,溶劑對此輻射產(chǎn)生強烈吸收 ,此時溶劑被看作是光學不透明的,它嚴重干擾組分的吸收測量。 不能選與樣品發(fā)生反應或聚合的溶劑 。 只需使用幾種極性不同的固定液即可解決分離問題 。詳細介紹見后。 來自 中國最大的資料庫下載 (二)化學鍵合相色譜法( CBPC) 采用 化學鍵合相的液相色譜稱為化學鍵合相色譜法 ,簡稱鍵合相色譜 。 用醇與硅醇基發(fā)生酯化反應: ≡ Si- 0H+ ROH→≡Si - OR+ H20 由于這類鍵合固定相的有機表面是一些單體 ,具有良好的傳質(zhì)特性 ,但這些酯化過的硅膠填料易水解且受熱不穩(wěn)定 , 因此僅 適用于不含水或醇的流動相 。 當用極性溶劑為流動相來分離含有極性官能團的有機化合物時 , 一方面 , 分子中的非極性部分與固定相表面上的疏水烷基產(chǎn)生締合作用 , 使它保留在固定相中;而另一方面 ,被分離物的極性部分受到極性流動相的作用 , 促使它離開固定相 , 并減小其保留作用 ( 見圖 204) 。此外,由于鍵合到載體上的基團不易流失,特別適用于梯度淋洗。 Kad值小 ,則保留值弱,易于洗脫。 來自 中國最大的資料庫下載 3流動相 一般把吸附色譜中 流動相稱 作 洗脫劑。凡在溶液中能夠電離的物質(zhì),通常都可用離子交換色譜法進行分離。 rrAB ABABK]][[][][/ ?來自 中國最大的資料庫下載 對于典型的磺酸型陽離子交換樹脂 , 一價離子的 KB/A值按以下順序: Cs+> Rb+> K+> NH4+> Na+> H+> Li+ 二價離子的順序為: Ba2+> Pb2+> Sr2+> Ca2+> Cd2+> Cu2+, Zn2+> Mg2+ 對于季鋁型強堿陰離子交換樹指 , 各陰離子的選擇性順序為: ClO4> I> HS04> SCN> NO2> Br> CN> Cl> BrO3> OH > HCO3> H2P04> IO3> CH3COO- > F- 2.固定相 作為固定相的離子交換劑,其基質(zhì)大致有三大類:合成樹脂(聚苯乙烯)、纖維素和硅膠。另一種是鍵合微粒載體型,它的載體是多孔微粒硅膠。例如,分離有機酸和有機堿時,這些酸堿的離解程度可通過改變流動相的 pH值來控制。 通過分離柱后的樣品再經(jīng)過抑制柱 , 使具有高背景電導的流動相轉變成低背景電導的流動相 , 從而用電導檢測器可直接檢測各種離子的含量 。 后來 , Frits等人提出采用抑制柱的離子色譜體系 , 而采用了電導率極低的溶液 , 例如 1 104~ 5 104mol假如有一離子對色譜體系,固定相為非極性鍵合相,流動相為水溶液,并在其中加入一種電荷與組分離子 A相反的離子 B+,B+離子由于靜電引力與帶負電的人組分離子生成離子對化合物 AB+。 容量因子 k隨 KAB和 [B+]水相 的增大而增大 。 ( 4) 不能分辨分子大小相近的化合物,相對分子質(zhì)量差別必須大于 10%才能得以分離。 所謂凝膠 , 指含有大量液體 ( 一般是水 ) 的柔軟而富于彈性的物質(zhì) , 它是一種經(jīng)過交聯(lián)而具有立體網(wǎng)狀結構的多聚體 。s1;否則將影響凝膠孔徑 , 造成不良分離 。 來自 中國最大的資料庫下載 (八 )親和色譜法( AC)簡介 親和色譜是利用生物大分子和固定相表面存在某種特異性親和力 , 進行選擇性分離的一種方法 。 如果樣品可溶于水井屬于能離解物質(zhì) , 以采用離子交換色譜為佳;如樣品可溶于烴類 ( 如苯或異辛烷 ) , 則可采 來自 中國最大的資料庫下載 表 207液相色譜分離類型選擇參考表 溶于水 ——排阻色譜 , 水為流動相 相對分子質(zhì)量 > 2020 不溶于水 ——排阻色譜 , 非水流動相 同系物 ——分配色譜 不溶于水 異構體 ——吸附色譜 樣品 分子大小差異 ——排阻色譜 反相液一液色譜 相對分子質(zhì)量 溶于水 , 不離解 < 2020 排阻色譜 , 水為流動相 堿 ——陽離子交換色譜 溶于水 , 可離解 酸 ——陰離子交換色譜 溶于水, 離子與非離子 — 反相離子對色譜 來自 中國最大的資料庫下載 用液一固吸附色譜;如樣品溶解于四氯化碳,則多采用常規(guī)的分配和吸附色譜分離;如樣品既溶于水又溶于異丙醇時,常用水和異丙醇的混合液作液一液分配色譜的流動相,以憎水性化合物作固定相。( 5) 凝膠色譜; (6) 氣固色譜; (7) 液固色譜 。然后 , 確定采用什么方法合適 。 這種固載化的配基將只能和具有親和力特性吸附的生物大分子相互作用而被保留 , 沒有這種作用的分子不被保留 。當采用軟性凝膠時,溶劑也必須 能溶脹凝膠 。 它們適用以水溶性溶劑作流動相 , 一般用于小分子質(zhì)量物質(zhì)的分析 , 不適宜用在高效液相色譜中 。其固定相為化學情性多孔物質(zhì) —— 凝膠,它類似于分子篩,但孔徑比分子篩大。此法發(fā)展迅速,應用較廣泛 . ?1
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