免疫組織化學(xué)技術(shù)-免疫組織化學(xué)方法-文庫(kù)吧在線(xiàn)文庫(kù)
【正文】 95％乙醇 Ⅰ1h 、 Ⅱ1h 、 Ⅲ 過(guò)夜或 2h，無(wú)水乙醇 Ⅰ 、 Ⅱ和 Ⅲ 各 30min，二甲苯 Ⅰ15min 、 Ⅱ10min 、 Ⅲ10min（肉眼觀察），石蠟 Ⅰ30min ，石蠟 Ⅱ30min ，石蠟Ⅲ1 ～ 2h。 （ 5） 防止細(xì)胞過(guò)度收縮或膨脹而失去其原有形態(tài)結(jié)構(gòu)。 ? 組織與細(xì)胞材料的制備 ? 免疫組織化學(xué)方法 組織與細(xì)胞材料的制備 ? 組織石蠟切片制作 ? 組織冰凍切片制作 ? 細(xì)胞爬片制作 ? 細(xì)胞涂片制作 切片的制作 ? 組織的固定 ? 組織石蠟包埋 ? 切片 ? 目的 : （ 1） 防止組織細(xì)胞的死后變化，防止自溶和腐敗，以保持組織細(xì)胞 的固有形態(tài)。該固定劑 較適合富含糖類(lèi)組織，對(duì)超微結(jié)構(gòu)及許多抗原的抗原性保 存較好。 （ 2） APES試劑（ 3氨基、丙基三氧基硅烷） 干凈載玻片 → 丙酮 5min → 用鑷子夾住浸入 APES試劑（ 1ml+50ml丙酮） 1～ 3次 → 純丙酮洗二次 → 干燥玻片 → 用鋁箔包好，室溫或 4℃ 保存?zhèn)溆谩? ? 可加甘油封存置于零下 20度保存。 ③自來(lái)水洗，蒸餾水洗。 ? 高壓抗原修復(fù)法： ①切片脫蠟至水。 ③自來(lái)水洗，蒸餾水洗。 ⑤待抗原修復(fù)液降至室溫后， PBS洗 3次，隨后按選定的免疫組化染色方法進(jìn)行染色。 ? 胰蛋白酶消化法： ①切片脫蠟至水。 即用型抗體：理論上在 4 ℃ 冰箱內(nèi) 可保存半年左右。 抗體濃度過(guò)低。 :23:1311:23Feb2310Feb23 1故人江海別，幾度隔山川。 11:23:1311:23:1311:232/10/2023 11:23:13 AM 1成功就是日復(fù)一日那一點(diǎn)點(diǎn)小小努力的積累。 , February 10, 2023 閱讀一切好書(shū)如同和過(guò)去最杰出的人談話(huà)。 2023年 2月 10日星期五 11時(shí) 23分 13秒 11:23:1310 February 2023 1一個(gè)人即使已登上頂峰，也仍要自強(qiáng)不息。勝人者有力，自勝者強(qiáng)。 2023年 2月 10日星期五 上午 11時(shí) 23分 13秒 11:23: 1楚塞三湘接，荊門(mén)九派通。 2023年 2月 上午 11時(shí) 23分 :23February 10, 2023 1行動(dòng)出成果，工作出財(cái)富。 五、 DAB有致癌性，用后不應(yīng)隨處倒棄。 抗體的交叉反應(yīng)。 ⑤滴上自配的或商品化的胰蛋白酶，處理切片 20分鐘左右。 ④ PBS洗 3次， 1分鐘 /次。 ? 電爐加熱抗原修復(fù)法： ①切片脫蠟至水。蓋上壓力閥至噴汽后持續(xù) 1－ 4分鐘。 ② %H2O2甲醇處理 10分鐘。 ? 在細(xì)胞上加一層甘油
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