植物基因工程育種-文庫(kù)吧在線文庫(kù)
【正文】 農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物安全管理?xiàng)l例 中華人民共和國(guó)國(guó)務(wù)院令 第 304號(hào) 《農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物安全管理?xiàng)l例》已經(jīng) 2023年 5月 9日國(guó)務(wù)院第 38次常務(wù)會(huì)議通過(guò)，現(xiàn)予公布，自公布之日起施行。 進(jìn)入 90年代特別是 1992年聯(lián)合國(guó)環(huán)境與發(fā)展大會(huì)的召開(kāi)，更加促進(jìn)了國(guó)際上對(duì)生物安全立法工作的重視，特別是大會(huì)由許多國(guó)家簽署的兩個(gè)綱領(lǐng)性文件 《 21世紀(jì)議程》 和《 生物多樣性公約》 均在有關(guān)條款中提到了生物技術(shù)安全問(wèn)題。熒光素是熒光素酶催化的底物總成，不同熒光素的化學(xué)結(jié)構(gòu)有一定差異甚至完全不同。 葡萄糖苷酸酶基因（ gus） ? 氯霉素乙酰轉(zhuǎn)移酶基因 ? 223。潮霉素林酸轉(zhuǎn)移酶可通過(guò)對(duì)潮霉素磷酸化而使其失活。 （ Southern 雜交 ） 鑒定步驟： ? 篩選鑒定（利用質(zhì)粒上的選擇標(biāo)記） ? 報(bào)告基因鑒定（利用質(zhì)粒上的報(bào)告基因） ? 遺傳鑒定 ? 生長(zhǎng)試驗(yàn) DNA鑒定 southern RNA鑒定 northern 蛋白質(zhì)鑒定 western 一、植物基因工程中的選擇基因 ? 植物基因工程中的基因主要是一類編碼可使抗生素或除草劑失活的蛋白酶基因。 (2）基因槍法 —— 純物理轉(zhuǎn)化，不存在物種的限制。 優(yōu)點(diǎn)：操作簡(jiǎn)便； 工作效率高； 無(wú)宿主限制，適應(yīng)于各種動(dòng)植物； 對(duì)受體細(xì)胞生命活動(dòng)影響小； 受體的類型廣泛； 用于細(xì)胞器的基因轉(zhuǎn)化． 基因槍法（微彈轟擊法） 工作原理：將外源 DNA包被在微小的金?；蜴u粒表面，然后在高壓的作用下將微粒高速射入受體細(xì)胞或組織，微粒上的外源DNA進(jìn)入細(xì)胞后，整合到植物染色體上并得到表達(dá)，從而實(shí)現(xiàn)外源基因的轉(zhuǎn)化。 特點(diǎn)：轉(zhuǎn)化率高 。再 2023年全球轉(zhuǎn)基因作物種植面積仍有 66%在工業(yè)化國(guó)家，但發(fā)展中國(guó)家轉(zhuǎn)基因作物的種植面積已逐年增加。 而且油的純度質(zhì)量更好 。 轉(zhuǎn)基因玉米 利用轉(zhuǎn)基因改良植物的品質(zhì) 轉(zhuǎn)基因牽?；? 我國(guó)科學(xué)工作者，用轉(zhuǎn)基因技術(shù)，可以轉(zhuǎn)變矮牽?；ǖ幕ㄉ?，使矮牽牛花的花色更加豐富多彩。 世界上第一種基因移植作物是一種含有抗生素藥類抗體的煙草， 1983年得以培植出來(lái)。 轉(zhuǎn)基因小麥 從植物體中分離出合成賴氨酸的基因，把這基因轉(zhuǎn)入小麥植株中，培育出轉(zhuǎn)基因小麥。 國(guó)內(nèi)轉(zhuǎn)基因作物發(fā)展現(xiàn)狀 在某些領(lǐng)域達(dá)到了國(guó)際先進(jìn)水平。 操作繁瑣 。 動(dòng)力類型：火藥爆炸力； 高壓氣體； 高壓放電． 操作步驟 （ 1）制備 DNA微彈； （ 2）準(zhǔn)備靶外植體材料； （ 3） DNA微彈轟擊； （ 4） 培養(yǎng)轟擊后的外植體． 轉(zhuǎn)化率影響因素 ? 金屬微粒 金粉顆粒較鎢粒性質(zhì)優(yōu)良 ,但是價(jià)格昂貴 . ? DNA沉淀輔助劑 這些化合物對(duì) DNA在微粒上的黏附有重要作用 ,但對(duì)植物受體細(xì)胞也產(chǎn)生一定的傷害 . ? DNA純度及濃度 ? 微彈速度 ? 植物材料內(nèi)在因素 根癌桿菌介導(dǎo)法 ? 根癌農(nóng)桿菌廣泛親染雙子葉植物和裸子植物。 農(nóng)桿菌介導(dǎo) —— 存在宿主范圍的局限性。最常用的有新霉素抗性基因（ neor）、慶大霉素抗性基因（ gentr）、潮霉素磷酸轉(zhuǎn)移酶（ HTP）基因（ hpt） ,以及膦絲菌素乙酰轉(zhuǎn)移酶基因（ bar）等。 （ bar） 該基因是從吸水鏈霉菌中克隆的一種基因，其對(duì)應(yīng)的選擇試劑為膦絲菌素（ basta） ,膦絲菌素可抑制谷氨酰胺合成酶的活性，從而導(dǎo)致非轉(zhuǎn)化細(xì)胞發(fā)生氨的致死性累積。 葡萄糖苷酸酶基因（ gus） gus基因編碼 223。熒光素酶基因的活性檢測(cè)非常簡(jiǎn)單，直接將被檢的材料進(jìn)入加有熒光素和ATP的緩沖液中，置于暗室用肉眼直接觀察熒光，或覆蓋 X光 膠片曝光，也也用熒光光度計(jì)定量 檢測(cè) . 轉(zhuǎn)化體的鑒定和證實(shí)的必要性 為了驗(yàn)證外源基因整合到染色體 . 我們
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