1-2dna重組技術的基本操作程序-文庫吧在線文庫
【正文】 和金粉粒子，粒子的直徑一般 在 ～ 4um③ 適用：單子葉植物目的基因導入植物細胞的方法（ 3）花粉管通道法：① 操作方法：在植物花受粉后，花粉形成花粉管還未 愈合前期，剪去柱頭，然后，滴入 DNA（含目的基 因）使目的基因借助花粉管通道進入受體細胞② 特點 :十分簡便經濟 ③ 實例：轉基因抗蟲棉目的基因導入植物細胞的方法將目的基因導入動物細胞（ 1）方法：顯微注射法（ 3）程序：含目地基因的表達載體提純 取卵（受精卵） 顯微注射 受精卵 新性狀動物（ 2）受體細胞： 受精卵將目的基因導入微生物細胞① 微生物作受體細胞原因 ： 繁殖快、多為單細胞、遺傳物質相對少② 常用細胞： 大腸桿菌③ 常用方法： Ca2+處理 獲得感受態(tài)細胞④ 過程：Ca2+處理處理大腸桿菌大腸桿菌感受態(tài)感受態(tài) 細胞細胞感受態(tài)細胞感受態(tài)細胞 吸收吸收 DNA表達載體表達載體與感受態(tài)與感受態(tài)細胞混合細胞混合，全部受體細胞都能攝 入重組 DNA分子嗎？真正能攝入重組 DNA分子的受體細胞很少?；虮磉_載體的構建過程質粒 DNA分子限制酶處理兩個切口獲得目的基因DNA連接酶重組 DNA分子（重組質粒）同一種一個切口兩個黏性末端注意：① 載體 與 表達載體 的區(qū)別：二者都有標記基因和復制原點兩部分 DNA片段。2 從基因文庫中獲取 利用 PCR技術擴增 利用 DNA合成儀用化學方法直接人工合成（一） 從基因文庫中獲取目的基因1. 基因文庫的概念基因文庫的概念 : 將含有某種生物不同基因的許多 DNA片斷，導入受體菌的群體中儲存，各個受體菌分別含有這種生物的不同基因。2. 基因文庫的種類基因文庫的種類 :基因組文庫： 含有一種生物的 全部 基因部分基因文庫： 只包含了一種生物的 部分 基因， 如： cDNA文庫基因文庫的構建方法① 基因組文庫的構建提取某種生物的 全部 DNA用適當的限制酶 切割一定大小的 DNA片段將 DNA片段與載體 連接重組 DNA基因組文庫導入受體菌 中儲存② cDNA文庫的構建 反轉錄法： 提取某種生物的 mRNA單鏈 DNA雙鏈 cDNA片段重組 DNA與載體連接cDNA文庫反轉錄酶DNA聚合酶導入受體菌中儲存基因文庫的構建方法mRNA單鏈 DNA雙鏈 DNA思考？真核生物的基因用反轉錄法得到的cDNA與原基因相同嗎？真核細胞的 cDNA的獲取編碼區(qū)編碼區(qū) 非
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