產(chǎn)前診斷中絨毛、臍血、羊水取樣與標(biāo)本(存儲(chǔ)版)
【正文】 ? 宮內(nèi)感染 ? 胎兒丟失（流產(chǎn)、早產(chǎn)） ? 大多數(shù)并發(fā)癥為短暫性和非致命性 產(chǎn)前診斷中心 南京鼓樓醫(yī)院 臍帶血穿刺并發(fā)癥 —胎兒丟失 ? Maxwell 1991年報(bào)道胎兒超聲結(jié)構(gòu)篩查示正常超聲者臍穿的流產(chǎn)率為 1%（ 1/76）；異常超聲者流產(chǎn)率為 7%（ 5/76）；胎兒結(jié)構(gòu)明顯異常者流產(chǎn)率為 25%（ 9/36） ? Antsaklis 1998年報(bào)道胎兒超聲結(jié)構(gòu)篩查示正常超聲者臍穿的流產(chǎn)率 1%（ 2/191）；異常超聲者流產(chǎn)率為 13%（ 11/84） 產(chǎn)前診斷中心 南京鼓樓醫(yī)院 臍帶穿刺部位 產(chǎn)前診斷中心 南京鼓樓醫(yī)院 臍血穿刺 —確定胎兒血樣 ? 血紅蛋白電泳 ? KleihauerBetke試驗(yàn)：胎兒紅細(xì)胞在酸中穩(wěn)定 ? APT試驗(yàn)： NaOH中胎兒血為粉紅色 ? 有核紅細(xì)胞的出現(xiàn) 產(chǎn)前診斷中心 南京鼓樓醫(yī)院 臍血穿刺 —排除臍血中母血污染 ? X染色體 DMD基因內(nèi)部 5對(duì) CA重復(fù)序列的連鎖分析 產(chǎn)前診斷中心 南京鼓樓醫(yī)院 絨毛組織、羊水細(xì)胞、臍血細(xì)胞培養(yǎng) 產(chǎn)前診斷中心 南京鼓樓醫(yī)院 絨毛組織的培養(yǎng) ? 直接法 ? 培養(yǎng)法（懸浮培養(yǎng)、貼壁培養(yǎng)） 產(chǎn)前診斷中心 南京鼓樓醫(yī)院 絨毛組織的染色體檢查 —直接法 ? 孕早期 Langhan’s細(xì)胞有較高的有絲分裂活性，能提供足以分析的良好有絲分裂相，較絨毛培養(yǎng)簡(jiǎn)易可靠、操作簡(jiǎn)單快速 產(chǎn)前診斷中心 南京鼓樓醫(yī)院 絨毛組織的染色體檢查 —直接法 ? 絨毛組織的分離洗脫 ? 加秋水仙素（終濃度 2ug/ml，可一次加，也可分次少量加） ? 37OC 5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng) 45分鐘 ? 低滲（ 1%枸櫞酸鈉低滲 10分鐘或 1%枸櫞酸鈉和： 1低滲 40分鐘） ? 預(yù)固定（甲醇：冰醋酸 3： 1） 10分鐘 ? 固定（甲醇：冰醋酸 3： 1） 1020分鐘 ? 冰醋酸解離絨毛細(xì)胞（輕吹打） ? 制片 產(chǎn)前診斷中心 南京鼓樓醫(yī)院 絨毛組織的染色體檢查 —懸浮培養(yǎng)法 ? 絨毛挑選洗脫 ? 絨毛組織剪成小塊入培養(yǎng)瓶（ 25ml培養(yǎng)瓶每瓶 10mg） ? 加特定培養(yǎng)液 3ml ? 培養(yǎng) 36天 ? 收獲（加秋素、低滲、固定、制片） 產(chǎn)前診斷中心 南京鼓樓醫(yī)院 絨毛組織的染色體檢查 —貼壁培養(yǎng)法 ? 絨毛組織挑選洗脫 ? 絨毛組織剪成小塊 ? 加 %+%EDTA 5ml 37OC 搖床中 20分鐘 ? 加培養(yǎng)基終止消化，離心后棄上清加培養(yǎng)基接種培養(yǎng) 510天 ? 收獲 產(chǎn)前診斷中心 南京鼓樓醫(yī)院 羊水細(xì)胞培養(yǎng) —細(xì)胞類型 ? 成纖維樣細(xì)胞（ F細(xì)胞） ? 上皮樣細(xì)胞（密集型上皮樣細(xì)胞 E細(xì)胞、鐮刀樣上皮細(xì)胞、圓形上皮細(xì)胞） ? 羊水樣細(xì)胞（ AF細(xì)胞） 產(chǎn)前診斷中心 南京鼓樓醫(yī)院 羊水細(xì)胞培養(yǎng) —收獲方法 ? 原位法 ? 消化法 ? 刮取法 產(chǎn)前診斷中心 南京鼓樓醫(yī)院 羊水細(xì)胞培養(yǎng)中存在的問(wèn)題 ——
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