dna重組技術的基本工具概述(ppt72頁)(存儲版)
【正文】 旋結構，即不同生物的 DNA分子基本結構是相同的，都遵循堿基互補配對原則 。所以不同的生物 DNA可以嫁接 地球上的所有生物共用一套遺傳密碼，所以，一種生物的基因可以在另外一種生物體內得以表達 DNA重組技術的基本工具 ?準確切割 DNA的工具（“分子手術刀”） ——限制性內切酶 ? DNA片段的連接工具（“分子縫合針”） ——DNA連接酶 ?基因轉移工具（“分子運輸車”） ——基因進入受體細胞的載體 “分子手術刀” —— 限制性核酸內切酶（簡稱限制酶） 即一種限制酶只能識別 一種特定的核苷酸序列 ，并且能在 特定 的切點上切割 DNA分子。 DNA被限制酶切斷后有兩個反向互補的“黏性末端”。 4）必須是 安全 的 ，對受體細胞 無害 。 質粒的存在與否對宿主細胞生存沒有決定性作用，但復制只能在宿主細胞內成。 如蘇云金芽孢桿菌的抗蟲基因，還有植物的抗病（抗病毒、抗細菌）基因、種子貯藏蛋白的基因，以及人的胰島素基因、干擾素基因等。 目的基因的 mRNA 單鏈 DNA(cDNA) 雙鏈 DNA (即目的基因 ) 反轉錄 合成 2）根據(jù)已知的氨基酸序列合成 DNA法 ： 根據(jù)已知蛋白質的氨基酸序列，推測出相應的信使 RNA序列，然后按照堿基互補配對原則，推測出它的結構基因的核苷酸序列，再通過化學方法，以單核苷酸為原料合成目的基因。處理的受體細胞中真正攝入了目的基因的很少，必須將它從中檢測出來。受材料來源限制產量有限，其價格往往十分昂貴。 用 DNA探針 可以檢測 飲用水中病毒 的含量。 2）用基因工程的方法 從微生物中獲得人們所需要的 糖類 、 脂肪 和 維生素 等產品。 1） 雞蛋白基因 在大腸桿菌和酵母菌中表達獲得成功。 基因治療曙光初照 是指是把 健康的外源基因導入有基因缺陷的細胞 中，達到治療疾病的目的。 生長快、肉質好的轉基因鯉魚 (中國 ) 超級羊 乳汁中含有人生長激素的轉基因牛 (阿根廷 ) 利用某些特定的外源基因在哺乳動物體內表達，從這些動物的 乳腺細胞 中生產藥物，如激素、抗體及酶類等。 ? 將目的基因導入受體細胞的原理 借鑒細菌或病毒侵染細胞的途徑。 啟動子 補：真核細胞的基因結構 編碼區(qū) 非編碼區(qū) 非編碼區(qū) 與 RNA聚合酶 結合位點 內含子 外顯子 能夠編碼蛋白質的序列叫做外顯子 不能夠編碼蛋白質的序列叫做內含子 啟動子 終止子 編碼區(qū)上游 編碼區(qū)下游 內含子： 外顯子： 真核細胞的 基因結構 編碼區(qū) 非編碼區(qū) 外顯子：能編碼蛋白質的序列 內含子：不能編碼蛋白質的序列 ： 有調控作用的核苷酸序列， 包括位于編碼區(qū)上游的 RNA 聚合酶結合位點。 。 最常用的質粒是 大腸桿菌的質粒 。 2）具多個 限制酶切點 ，以 便與外源基因連接 。 你能推測限制酶存在于原核生物中的作用是什么嗎？ 尋根問底 限制酶就是細菌的一種防御性工具，當外源DNA侵入時，會利用限制酶將外源 DNA切割掉，以保證自身的安全。 原理 ： 操作水平 ： 結 果 ： 基因重組 DNA分子水平 定向地改造生物的遺傳性狀，獲得人 類所需要的品種。 特 點 ： 存在原核生物 (主要是微生物 )體 內。被同一種限制酶切斷的幾個 DNA具有相同的黏性末端，能夠通過互補進行配對。 5）載體 DNA 分子應 大小適中 ，以便于 提取 和 操作 1）作為 運載工具 ，將目的基因導入受體細胞中 2）在受體細胞內對目的基因進行 大量復制 ① 細菌的質粒 ②病毒： λ噬菌體衍生物 、動植物病毒等。 基因的運輸工具 —— 質粒 能復制并帶著插入的目的基因一起復制 有切割位點 有標記基因的存在，將來可用含青霉素的培養(yǎng)基鑒別。 補：原核細胞的基因結構 非編碼區(qū)
教學課件相關推薦
鄂ICP備17016276號-1