【正文】 培養(yǎng)時間至 7天進行菌落計數(shù)并報告 。 ④ 液體 培養(yǎng)基 指示能力檢查 。 ⑤改梭菌 培養(yǎng)時間 72～ 96小時為 48小時 。 ⑵為防止藥品由于微生物污染而引起變質(zhì)，對服用者造成不良反應，在藥品生產(chǎn)過程中加入一定劑量的抑菌劑。見表 1 表 1 產(chǎn)品分類 類別 藥品 1 類 注射劑、 其他非腸道制劑， 包括 乳劑、耳用制劑、無菌鼻用制劑及眼 用制劑 2 類 局部給藥制劑、非滅菌鼻用制劑及用于 黏膜的乳劑 3 類 口服非固體制劑（非抗酸制劑） 4 類 非固體抗酸制劑 ⑵ 培養(yǎng)基 ① 培養(yǎng)基的制備 胰酪胨大豆肉湯瓊脂培養(yǎng)基 胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基 沙氏葡萄糖肉湯培養(yǎng)基 ②培養(yǎng)基的適用性檢查 同控制菌 培養(yǎng)基 的適用性檢查 ⑶ 抑菌劑效力測定方法 ① 菌種 菌液制備 菌種 同培養(yǎng)基適用性檢查，制劑中常見的污 染微生物也可作為試驗菌。 真菌 與初始值比， 1 28天菌數(shù)均不增加。 二、藥品微生物檢驗替代方法驗證指導原則 ⒈ 目的 ⑴是為所采用的試驗方法能否替代藥典規(guī)定的 方法用于藥品微生物的檢驗提供指導。 本指導原則將對標準和方法中的特定內(nèi)容及標準的應用做進一步的說明。 ③在以上情況下，生產(chǎn)單位或研制單位應進行全面的風險評估 以保證檢驗方法的可靠性，從而保證產(chǎn)品質(zhì)量 。其中的動物類原藥材粉是指除蜂蜜、王漿、動物角、阿膠外的所有動物類原藥材粉，如牡蠣、珍珠等貝類，海蜇、冬蟲夏草、人工牛黃等。 ⒉培養(yǎng)基 培養(yǎng)基是微生物試驗的基礎(chǔ)，直接影 響微生物試驗結(jié)果。 ３、 菌種的傳代和使用 ⑴ 工作菌種的傳代次數(shù)應嚴格控制，不得超過 5代防止過度的傳代造成菌種變異 ,工作菌株不可代替標準菌株 . ⑵ 任何亞培養(yǎng) 的形式均被認為是轉(zhuǎn)種或傳代一次。 ⑷ 建立帶菌培養(yǎng)物溢出的意外事件制定處理規(guī)程 。此外，還應考慮微生物生長特性。 演講完畢，謝謝觀看！ 。 ⒐ 實驗記錄的保存 實驗結(jié)果可靠性的依賴于試驗嚴格按照標準操作規(guī)程進行，包括正確的試驗操作、實驗記錄、(所有關(guān)鍵的實驗細節(jié) )，以便確認數(shù)據(jù)的完整性。 ⑵ 消毒劑的配制應按標準操作規(guī)程配制，對所用的消毒劑種類應定期更換，使用的消毒劑應無菌。 ２、 菌種保藏的原則 ⑴ 標準儲備菌株 可用于制備每月或每周一次轉(zhuǎn)種的工作菌株 .冷凍菌株一旦解凍轉(zhuǎn)種制備工作菌株后 ,不得重新冷凍或再次使用。不斷接受系統(tǒng)的教育與職責范圍相關(guān)的培訓。 ⑸眼用制劑應符合無菌檢查法要求。 ② 若采用允許的最高稀釋級供試液進行驗證試驗還存在一株或多株試驗菌的回收率達不到要求 。 三、藥品微生物限度檢查法應用指導原則 目的 為更好的應用微生物限度檢查法及限度標準的合理執(zhí)行提供指導。 注： 表中“不增加”是指對前一個測定時間，試驗菌增加的數(shù)量 不超過 lg。 ⑸ 結(jié)果判斷 結(jié)果符合表 3要求 ， 可判斷該產(chǎn)品抑菌效力符合規(guī)定。 ④本試驗方法和抑菌劑抑菌效力判斷標準用于包裝未啟開的成品制劑。 結(jié)果判斷 非革蘭陽性菌，顯微鏡下未見厚膜孢子、假菌絲、芽管判未檢出白色念珠菌。 ③大腸菌群 檢查用膽鹽乳糖培養(yǎng)基改為 乳糖膽鹽。 ② 固體 培養(yǎng)基 促生長能力檢查 。 常見干擾物的中和劑 和 滅活方法 參見 表 1常見干擾物的中和劑或滅活方法 供試品檢查增修訂內(nèi)容 ⑴平皿法 刪去 采用平皿法進行菌數(shù)測定時，連續(xù) 2～ 3個稀釋級的供試液。在供試品溶液性狀允許的情況下，應盡量選用薄膜過濾法。 供試液的制備增修訂內(nèi)容 ⑴供試品檢查時使用表面活性劑應證明其對 微生物 生長和存活無影響 修改為 無毒性 。 表 1 、 表 2 、 表 3增修訂 表 1 （第 3列） 接種每種培養(yǎng)基改為 所需 的最少檢驗數(shù)量 表 2 （表題）上市抽驗樣品（液體制劑）的最少檢驗數(shù)量修改為 液體制劑最少檢驗量及上市抽驗樣品的最少檢驗數(shù)量 第二列每支樣品接入每管培養(yǎng)基的最少樣品量 修改為 每支供試品接入每管培養(yǎng)基的最少樣品量 第三列最少檢驗數(shù)量（瓶或支） ≤1 全量 ２ 0 ① 修改為 供試品最少檢驗數(shù)量（瓶或支） １ 0 ① 注① 每種培養(yǎng)基各接種１０支供試品 修改為 若供試品每個容器內(nèi)的裝量不夠接種兩種培養(yǎng)基，那么表中的最少檢驗數(shù)量加倍 。 ⒉薄膜過濾法 供試品用量 將規(guī)定量 供試品 按薄膜過濾法過濾 修改為 取每種培養(yǎng)基規(guī)定接種的供試品總量。 2 、 無菌檢查 要進行環(huán)境檢測 增加了 日常檢驗還需進行環(huán)境檢測 。 二、 進一步明確了無菌檢查保障 檢驗全過程必須嚴格遵守無菌操作，防止再污染 ， 但采用的措施不得影響微生物的生長。 五、方法驗證試驗增修訂內(nèi)容 ⒈試驗菌株 刪除 銅綠假單胞菌 增加 大腸埃希菌及大腸埃希菌菌液的制備 (同金黃色葡萄球菌 )。 ⒋ 直接接種法 刪除 β－內(nèi)酰胺類或磺氨類供試品。 ⑵ 沙門菌檢驗量 修改為 檢驗量為 20 g或 20ml并注明（其中 10 g用于陽性對照）。 ⑷具抑菌活性的供試品增修訂內(nèi)容 刪除 應 消除供試液的抑菌活性 修改為 當供試品具有抑菌活性時，應盡量選擇操作簡便、快速的方法，應避免損傷供試品中污染的微生物。