高二生物血紅蛋白的提取和分離(存儲(chǔ)版)
【正文】 蛋白處在穩(wěn)定的 pH范圍內(nèi)，維持結(jié)構(gòu)和功能正常。 三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析與評(píng)價(jià) 你是否完成了對(duì)血液樣品的處理？你能描述處理后的樣品發(fā)生了哪些變化嗎？ 你裝填的凝膠色譜柱是否有氣泡產(chǎn)生？你的色譜柱裝填得成功嗎？你是如何判斷的？ 由于凝膠是一種半透明的介質(zhì)，因此可以在凝膠柱旁放一支與凝膠柱垂直的日光燈，檢查凝膠是否裝填得均勻。 A相同 B相反 C相對(duì) D相向 4. 哺乳動(dòng)物和人的成熟的紅細(xì)胞中的（ ）與氧氣的運(yùn)輸有關(guān)。 A分子的大小 B相對(duì)分子質(zhì)量的大小 C帶電荷的多少 D溶解度 2．緩沖液的作用是：在一定范圍內(nèi)，抵制外界的影響來(lái)維持（ ）基本不變。 ： ：（略） 觀察你處理的血液樣品離心后 是否分層 （見(jiàn)教科書(shū)圖 518）， 如果分層不明顯，可能是洗滌次數(shù)少、未能除去血漿蛋白的原因。貼壁加樣。 ②滴加透析樣品： 吸管吸 1ml樣品加到色譜柱的頂端，滴加樣品時(shí)，吸管管口貼著管壁環(huán)繞移動(dòng)加樣，同時(shí)注意不要破壞凝膠面。 ③ 凝膠色譜柱的裝填方法： A、固定：將色譜柱裝置固定在支架上。 注意事項(xiàng) ： 底塞中插入的玻璃管的上部不得超出橡皮塞的凹穴底面，否則難以鋪實(shí)尼龍網(wǎng)，還會(huì)導(dǎo)致液體殘留，蛋白質(zhì)分離不徹底。 (2)血紅蛋白的釋放： 加蒸餾水到 原血液體積 ，再加40％體積的 甲苯 ，置于 磁力攪拌器 上充分?jǐn)嚢?10分鐘（ 加速細(xì)胞破裂 ） ,細(xì)胞破裂釋放出血紅蛋白。 3. SDS作用機(jī)理 : 用 SDS測(cè)定蛋白質(zhì)分子量的方法 使用 SDS— 聚丙烯酰胺凝膠電泳 測(cè)定蛋白質(zhì)的分子量時(shí)，可選用一組 已知分子量的標(biāo)準(zhǔn)蛋白 同時(shí)進(jìn)行電泳，根據(jù)已知分子量的標(biāo)準(zhǔn)蛋白的 電泳區(qū)帶位置 ，可以測(cè)定未知蛋白質(zhì) 的分子量。 在 電場(chǎng) 的作用下， 這 些 帶電 分子 會(huì) 向著與 其所 帶電 荷相反的 電極 移 動(dòng) 瓊脂糖凝膠電泳示意圖 聚丙烯酰胺凝膠電泳 在測(cè)定蛋白質(zhì)分子量時(shí)常用 十二烷基硫酸鈉（ SDS） — 聚丙烯酰胺凝膠電泳。 能夠抵制 外界的酸和堿 對(duì)溶液 PH值 的影響， 維持 PH基本不變。 ： 根據(jù)蛋白質(zhì) 各種特性 的差異，如 分子的形狀和大小、所帶電荷的性質(zhì)和多少、溶解度、吸附性質(zhì)和對(duì)其他分子的親和力 等等，可以用來(lái)分離 不同種類(lèi) 的蛋白質(zhì)。 主要概念： ① 凝膠色譜法 ②電泳法 ③緩沖溶液 ④它們?cè)谘t蛋白的提取中分別起到什么作用。 ： ① 當(dāng)相對(duì)分子量不同的蛋白質(zhì)通過(guò)凝膠時(shí)，相對(duì)分子量較小的蛋白質(zhì)容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，路程較長(zhǎng)，移動(dòng)
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