chapter11細(xì)胞增殖及其調(diào)控(存儲(chǔ)版)
【正文】 in和 Cdk都消失 ， 這在多細(xì)胞生物尤其明顯 。 1988年 Maller實(shí)驗(yàn)室分離純化了 MPF，證明它主要含有 p32和 p45兩種蛋白，二者結(jié)合后，表現(xiàn)出蛋白激酶的活性。 APC介導(dǎo)選擇性降解的靶蛋白與 Ubiquitin結(jié)合 五、細(xì)胞周期運(yùn)轉(zhuǎn)的阻遏 細(xì)胞至少可通過兩種不同機(jī)制阻遏細(xì)胞周期的運(yùn)轉(zhuǎn)： Cdk抑制蛋白 (CDI)阻止 CyclinCdk復(fù)合物的裝配或活 性；周期調(diào)控系統(tǒng)組分停止合成 。 比較這幾個(gè)實(shí)驗(yàn)得出的結(jié)論 MPF的 p32亞基與酵母中的 p34cdc2為同源產(chǎn)物，而 MPF中的 p45與 p56 cdc 13和 周期蛋白B是同源物。 Johnson和 Rao進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)及其發(fā)現(xiàn) 對(duì)間期的細(xì)胞進(jìn)行同步化后進(jìn)行細(xì)胞融合 G1+S S+G2 G1+G2 結(jié)論 ：在 S期的細(xì)胞質(zhì)中存在有刺激 G1期細(xì)胞進(jìn)入 S期的某種因子 ， 定名為 SPF。 CDK 人們從不同物種成功分離到了十多個(gè) cdc相關(guān)基因，它們編碼的產(chǎn)物共同之處在于： 含有一段類似的 AA序列 都可以與周期蛋白結(jié)合并將周期蛋白作為其調(diào)節(jié)亞單位，進(jìn)而表現(xiàn)出蛋白激酶的活性。 減數(shù)分裂前 S期與有絲分裂前 S期長度比較 減數(shù)分裂前 S期 有絲分裂前 S期 蠑螈 10天 12小時(shí) 小鼠 14小時(shí) 56小時(shí) 小麥 12小時(shí) 酵母 1小時(shí) 在適當(dāng)時(shí)候激活細(xì)胞周期各個(gè)時(shí)相的相關(guān)酶和蛋白 ,確保細(xì)胞周期向下一個(gè)階段進(jìn)行 ， 然后以某種方式失活 (正調(diào)控 )。 胞質(zhì)分裂開始時(shí) ， 大量肌動(dòng)蛋白和肌球蛋白在中體處組裝成微絲并相互組成微絲束 ， 環(huán)繞細(xì)胞 ， 稱為收縮環(huán) （ contractile ring)。 前期 (prophase) 標(biāo)志前期開始的第一個(gè)特征是染色質(zhì)開始濃縮 (condensation)形成 有絲分裂染色體 (mitotic chromosome） 第二個(gè)特征細(xì)胞骨架解聚 ， 有絲分裂紡錘體(mitotic spindle)開始裝配 Golgi體 、 ER等細(xì)胞器解體 ， 形成小的膜泡 ?這種染色體由兩條染色單體 (chromatid)構(gòu)成 ?在前期末，染色體主縊痕部位形成一種蛋白復(fù) 合物稱為 動(dòng)粒 (kiochore) 間期動(dòng)物細(xì)胞含一個(gè) MTOC，即中心體，在 S期末，兩個(gè)中心粒在各自垂直的方向復(fù)制出一個(gè)中心粒，形成兩個(gè)中心體。 細(xì)胞周期調(diào)控因子和調(diào)節(jié)機(jī)制與一般體細(xì)胞標(biāo)準(zhǔn)的細(xì)胞周期基本是一致的 。 優(yōu)點(diǎn)是同步化效率高 ， 幾乎適合于所有體外培養(yǎng)的細(xì)胞體系 。 細(xì)胞周期 M G2 S 1 n 細(xì)胞周期同步化 ◆ 自然同步化 ， 如有一種粘菌的變形體 plasmodia，某些 受精卵早期卵裂 ◆ 人工選擇同步化 ◆ 藥物誘導(dǎo)法 ◆ 條件依賴性突變株在細(xì)胞周期同步化中的應(yīng)用： 將與細(xì)胞周期調(diào)控有關(guān)的條件依賴性突變株轉(zhuǎn)移到限定條件下培養(yǎng) ， 所有細(xì)胞便被同步化在細(xì)胞周期中某一特定時(shí)期 。 影響細(xì)胞從 G1期進(jìn)入 S期的因素 G2期 DNA復(fù)制完成，在 G2期合成一定數(shù)量的蛋白質(zhì)和RNA分子，為細(xì)胞進(jìn)入 M期做準(zhǔn)備。 細(xì)胞周期時(shí)間 不同細(xì)胞的細(xì)胞 周期時(shí)間差異 很大 S+G2+M 的時(shí)間變化較小 ， 細(xì)胞周期時(shí)間長短主要差別在 G1期 有些分裂增殖的細(xì)胞 (早期胚胎細(xì)胞 )缺乏 GG2期 根據(jù)增殖狀況，細(xì)胞分類三類 連續(xù)分裂細(xì)胞 (cycling cell) 休眠細(xì)胞 (G0細(xì)胞 ) 有些細(xì)胞會(huì)暫時(shí)離開細(xì)胞周期 ,停止細(xì)胞分裂 ,但受到適當(dāng)剌激時(shí)又可重新進(jìn)入細(xì)胞周期 的細(xì)胞稱為 G0期細(xì)胞 。 CENPE被認(rèn)為在促使與染色體與來自兩極的微管相聯(lián)結(jié)過程中起重要作用。 機(jī)體創(chuàng)傷愈合 、 組織再生 、 病理組織修復(fù)等 ， 都要依賴細(xì)胞增殖 。 成體生物仍然需要細(xì)胞增殖 ， 主要取代衰老死亡的細(xì)胞 ， 維持個(gè)體細(xì)胞數(shù)量的相對(duì)平衡 和機(jī)體的正常功能 。 CENPE是一種驅(qū)動(dòng)蛋白，定位于動(dòng)粒外層表面的冠上。 細(xì)胞周期時(shí)相組成 細(xì)胞周期時(shí)間 根據(jù)增殖狀況，細(xì)胞分類三類 細(xì)胞周期時(shí)相組成 間期 (interphase): G1期 ， S期 ， G2期 M期 : 有絲分裂期 (Mitosis), 胞質(zhì)分裂期 (Cytokinesis) 細(xì)胞沿著 G1→S→G 2→M→G 1周期性運(yùn)轉(zhuǎn) ， 在間期細(xì)胞體積增大 (生長 )， 在 M 期細(xì)胞先是核分裂 ，接著胞質(zhì)分裂 ， 完成一個(gè) 細(xì)胞周期 。 如能通過 R點(diǎn)則細(xì)胞就可以進(jìn)入 S期 ， 如不能通過則細(xì)胞就會(huì)進(jìn)入 G0期或進(jìn)一步分化 。 細(xì)胞周期長短測定 ◆ 脈沖標(biāo)記 DNA復(fù)制和細(xì)胞分裂指數(shù)觀察測定法 ◆ 流式細(xì)胞儀測定法 (Flow Cytometry) ◆ 縮時(shí)攝像技術(shù) 可以得到準(zhǔn)確的細(xì)胞周期時(shí)間及分裂間期和分裂期的準(zhǔn)確時(shí)間 。
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