【正文】 elope protein of duck hepatitis B virus suggests a mechanism for membrane translocation during particle morphogenesis. J. Virol. 71, 1107–1114.Heermann, ., Goldmann, U., Schwartz, W., Seyffarth, T., Baumgarten, H., Gerlich, ., 1984. Large surface proteins of hepatitis B virus containing the preS sequence. J. Virol. 52, 396–402.Hildt, E., Saher, G., Bruss, V., Hofschneider, ., 1996. The hepatitis B virus large surface protein (LHBs) is a transcriptional 225, 235–239.Hirsch, ., Lavine, ., Chang, ., Varmus, ., Ganem, D., 1990. Polymerase gene products of hepatitis B viruses are required for genomic RNA packaging as well as for reverse transcription. Nature 344, 552–555.Hollinger, ., Liang, ., 2001. Hepatitis B virus. In: Knipe, .,Howley, . (Eds.), Fields Virology Lippincott Williams amp。一種被稱為丁型肝炎（HDV或delta virus）的缺損病毒可增殖性感染僅HBV感染的肝細胞 (Taylor, 2003)，因為HDV可利用HBV的包膜。在描述20nm亞病毒顆粒形成的章節(jié)中有提到：嗜肝病毒包膜蛋白的組裝過程具有選擇性，尚沒有發(fā)現(xiàn)任何的外源蛋白被組裝進亞病毒顆粒，即便是禽類或哺乳類來源的包膜蛋白也不能混合組裝。突觸中間區(qū)域或頂部的突變則沒有影響。遺傳學分析顯示該環(huán)靠近C端的一半?yún)^(qū)域內(nèi)的短片斷的缺失會抑制病毒粒子的形成，但不抑制20nm亞病毒顆粒的形成(LofflerMary et al., 2000)，但該區(qū)域內(nèi)的點突變不具這種效應(yīng)(V. Bruss, unpublished)。與ipreS結(jié)構(gòu)域具基質(zhì)蛋白功能相一致，胞質(zhì)內(nèi)DHBV衣殼的細胞內(nèi)途徑受DHBV L蛋白的影響 (Summers et al.,1990。但是，N端截短的L蛋白突變體能與野生型L蛋白一樣有效的形成病毒粒子(Bruss and Thomssen, 1994)。 Summers et al.,1991。不成熟、高度磷酸化且含ssDNA的衣殼則不能與膜結(jié)合。僅僅猜測亞病毒顆粒和病毒粒子的出芽處的膜組成相同。融合的I型分泌信號到蛋白L中和前體S的共翻譯則會運輸?shù)絻?nèi)質(zhì)網(wǎng)腔內(nèi)，從而，產(chǎn)生2個中的其中之一的蛋白L的拓撲結(jié)構(gòu)，其可以消除分泌抑制(Bruss and Vieluf, 1995)。 Persing et al., 1986)。分離表達蛋白S于酵母中，可以在細胞內(nèi)產(chǎn)生20nm的HbsAg顆粒，這種材料有很高的免疫原性，可以作為乙肝的有效疫苗(McAleer et al., 1984)。 Patzer et al., 1986)有效地出芽(Eble et al., 1986。許多模型因此顯示，蛋白L的N未端插入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)或者病毒的膜內(nèi)。在蛋白S的結(jié)構(gòu)域，在14個半胱氨酸中多于1個的位置形成鍵橋。LofflerMary et al., 1997。 Prange and Streeck, 1995)。L蛋白具兩種拓撲結(jié)構(gòu)。拓撲基因信號序列在這個區(qū)域沒有被發(fā)現(xiàn)。S區(qū)存在于所有三種蛋白中。端PS2的啟動子轉(zhuǎn)錄并不完全一致，但大致分部于一個相當弱的啟動子位于E的三聯(lián)體109位處（或者120處，依基因型而定）。很可能這種突變誘導了一種構(gòu)型的變化，最終導致了構(gòu)成早期的包膜化信號的表達。從而，特異性感染的DHBV和每個有感染力的病毒粒子相似(Jilbert et al., 1996)。因此，可以推測，不成熟的，含有RNA的衣殼在出芽過程中被排除，病毒DNA的合成是和衣殼的結(jié)構(gòu)變化相聯(lián)系的，只有成熟的衣殼結(jié)構(gòu)才能有包膜的形成(Summers and Mason, 1982)，這個模型得到了實驗的支持。 Kau andTing, 1998)。這些區(qū)域可能是出芽過程中與包膜發(fā)生相互作用的結(jié)合位點。 Conwayet al., 1997)，(Wynne et al., 1999)。這兩種結(jié)構(gòu)在感染的人類肝細胞中也被發(fā)現(xiàn)(Kenney et al., 1995)。乙肝衣殼和跨膜的包膜蛋白及病毒的亞結(jié)構(gòu)的相互作用，本文的大多數(shù)介紹來自于人類乙肝的研究，還有一些來自于動物的嗜肝DNA病毒。蛋白P接合于前體的超基因組核心的RNA，位于包裝信號處，這個復合物產(chǎn)生的核衣殼蛋白包裹，在衣殼中，通過反轉(zhuǎn)錄形成病毒的DNA基因組(Summers andMason, 1982)。另外，這個轉(zhuǎn)錄的mRNA翻譯的產(chǎn)物為蛋白P，它來自于下游的第二個開放閱讀框。在進入到細胞質(zhì)后，核衣殼被轉(zhuǎn)運到細胞核中并釋放出部分雙鏈DNA基因組到核中(Rabe et al., 2003)。慶幸的是，來自于肝癌細胞的細胞系，例如HepG2和Huh7，當它們轉(zhuǎn)染進病毒基因組后可以產(chǎn)生感染性的病毒顆粒(Acs et al.,1987。啟動子（C、PSPS2和X）用黑色箭頭表示，單一的Poly（A）加尾信號用長方盒表示。這個科的一些成員可以感染哺乳類，例如土拔鼠肝炎病毒（WHV），或者鳥類，例如鴨乙肝病毒（DHBV），此病毒作為了重要的乙肝感染研究模型。這個過程需要S和L蛋白，而不需要M蛋白。原 文：Envelopment of the hepatitis B virus nucleocapsid作 者：VOLKER BRUSS作者單位：Department of Medical Microbiology, University of Gottingen, D37075 Gottingen, Germany發(fā)表刊物：Virus Research 106 (2004) 199–209 以下為中文翻譯稿 ： 乙型肝炎病毒核殼的包膜化過程摘要：乙型肝炎病毒（HBV）是一種二十面體的有包膜的DNA病毒，其復制具逆轉(zhuǎn)錄過程。包膜化過程發(fā)生在高爾基前體復合物的結(jié)構(gòu)中。 前言：乙肝病毒是嗜肝DNA病毒科的代表種，這個科由一小類有包膜的DNA病毒組成，它們?yōu)槎骟w結(jié)構(gòu)，在特異性宿主的肝細胞中經(jīng)過逆轉(zhuǎn)錄過程復制(Ganem and Schneider, 2001)。白色箭頭表示起始密碼。在研究過程中遇到的主要障礙是缺少感染乙肝的小的實驗動物模型，一直到現(xiàn)在，也還是缺少一種有感染性的細胞系(Gripon et al.,2002)。這個蛋白，然而在其它的一些細胞中并沒有表現(xiàn)出一種持續(xù)的侵染狀態(tài)。端非常近，并被翻譯成蛋白C。亞基因組的轉(zhuǎn)錄并翻譯成3個包膜蛋白（見下）和蛋白X。在以下的部分中，將討論亞狀態(tài)乙肝的出芽過程。顆粒表現(xiàn)出二種的類型(Crowther et al., 1994)：一種為直徑30nm由90個二聚體組成，為T=3的對稱結(jié)構(gòu)，另一各種為較大一點的直徑為34nm，由120個二聚體組成的為T=4的對稱結(jié)構(gòu)。這種材料適合讓拆疊的蛋白C在低分辨率的電鏡下進行觀察(Bottcher et al., 1997。52個暴露在衣殼表面的氨基酸單個置換成丙氨酸的突變表明，每個單體中的11個殘基（黑球表示）的突變對于衣殼形成、病毒DNA在顆粒體內(nèi)的合成都沒有影響，但會阻斷核衣殼的包膜化）（Porsel and Bruss，2003）。 Kann and Gerlich, 1994。 Weiser et al., 1983)。僅當競爭復制的衣殼體被包裝到病毒粒子而且釋放到血液中去。這個殘基在突觸結(jié)構(gòu)的內(nèi)部結(jié)構(gòu)中。發(fā)生于5180。這個表達模型使得乙肝包膜蛋白有著相同的未端（見圖1）。蛋白S的C末端57個氨基酸（170226位）有很高的疏水性，他被認為在這個區(qū)域是包埋于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中的。蛋白M的折疊方式與S蛋白類似，N聯(lián)糖基化的preS2位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔。 Ostapchuk et al., 1994。細胞質(zhì)分子伴侶Hsc70和細胞質(zhì)的前體S1及缺失結(jié)合位點的前體S1結(jié)合，導致了共同翻譯定位的區(qū)域，表明了分子伴侶在細胞質(zhì)中修復了該鏈(Lambert and Prange, 2003。Wunderlich and Bruss, 1996)。蛋白L在2位的甘氨酸處被豆蔻酸化(Persing et al.,1987)。亞病毒脂蛋白顆粒乙肝包膜蛋白在質(zhì)膜中并不出現(xiàn)，盡管它們能從后－內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，前－高爾基體中(Huovila et al., 1992。球形亞病毒顆粒由僅為接近100個蛋白鏈的L蛋白組成，相對的蛋白L數(shù)量在纖維體中還要多些，在病毒粒子的包膜中最多(Heermann et al.,1984)。共同表達蛋白L和S，導致了一種劑量依靠的顆粒釋放抑制(Ou and Rutter,1987。 Prange et al., 1991)。然而，關(guān)于20nm的顆粒從膜上的釋放知道之甚少，僅是一種猜測。在DHBV中，含dsDNA和非高度磷酸化的核心蛋白的成熟衣殼可與膜結(jié)合，該過程不依賴病毒包膜蛋白(Mabit and Schaller, 2000)。 HBV衣殼的包膜化依賴病毒包膜蛋白(Bruss and Ganem, 1991。（iii）包膜化過程由S蛋白的出芽能力所主導。表明L蛋白前體S結(jié)構(gòu)域含有一些區(qū)域能介導與衣殼的聯(lián)系。第二個暴露在ER胞質(zhì)一側(cè)的包膜蛋白結(jié)構(gòu)域是S蛋白跨膜區(qū)的環(huán)狀結(jié)構(gòu)。11個突變體特異性引起核殼包膜化的缺失（），它們成簇地定位在突觸的基部或突觸之間的凹處。在體外結(jié)合實驗中，肝組織來源的病毒衣殼和重組衣殼都能與對應(yīng)于L和S蛋白基質(zhì)結(jié)構(gòu)域的多肽較好的結(jié)合(Hourioux et al., 2000)，這表明衣殼與包膜蛋白的相互作用可能并不能區(qū)分成熟和未成熟的衣殼。該融合體與HBV在細胞系中的共表達可產(chǎn)生表型混合的病毒，并將外源結(jié)構(gòu)域暴露在病毒粒子表面。參考文獻：Acs, G., Sells, ., Purcell, ., Price, P., Engle, R., Shapiro, M.,Popper, H., 1987. 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