打印生化分離工程(存儲版)
【正文】 用于帶電表面時，雙電層的兩部分分別受到相反方向的作用力，膠粒在分散介質(zhì)中朝著某一電極遷移 動電過程 參考教材 （ 1）自由界面電泳 （ 2）自由溶液中的區(qū)帶電泳 （ 3）在不同支持物上的區(qū)帶電泳 （ 4）在有機溶劑中的凝膠電泳 （ 5）親和電泳 （ 6）等速電泳 （ 7）等電聚焦電泳 ？ （ 1）顆粒的性質(zhì)（ 2）電場強度（ 3）溶液的性質(zhì) （ 4） 焦耳熱 （ 5） 支持物 （ 6） 擴散 （ 7）緩沖液的性質(zhì) ？ (1) 瓊脂凝膠和瓊脂糖凝膠 (2) SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳 (3)不連續(xù)凝膠電泳 (4)制備凝膠電泳 （ 1）電泳槽：是凝膠電泳系統(tǒng)的核心部分，管式電泳槽、垂直板電泳槽、水平板電泳槽 （ 2）電源 :聚丙烯酰胺凝膠電泳 200~600V，載體兩性電解質(zhì)等電聚焦電泳 1000~2020V，固相梯度等電聚焦 3000~8000V （ 3）外循環(huán)恒溫系統(tǒng) :高電壓會產(chǎn)生高 熱，需冷卻； (4）凝膠干燥器 :用于電泳和染色后的干燥 （ 5）灌膠模具：制膠，玻璃板和梳子； （ 6）電泳轉(zhuǎn)移裝置：利用低電壓，大電流的直流電場，使凝膠電泳的分離區(qū)帶或電泳斑點轉(zhuǎn)移到特定的膜上，如 PVDF 膜 （ 7）電泳洗脫儀：回收樣品 （ 8）凝膠掃描和攝錄裝置：對電泳區(qū)帶進行掃描，從而給出定量的結(jié)果 原理： 由于聚丙烯酰胺凝膠電泳（ PAGE）是多孔介質(zhì)，不僅能防止對流，把擴散減少到最低；而且其孔徑大小與生物大分子具有相似的數(shù)量級，能主動參與生物分子的分離，具有分子篩效應(yīng)。 (4)電泳后 區(qū)帶易染色，樣品易洗脫，便于定量測定 。 在高電場強度作用下，毛細管中的待測物質(zhì)，可按其分子質(zhì)量，電荷，淌度等因子得到 有效的分離。 ? 在 TT 曲線的上半部的區(qū)域稱為不 穩(wěn)定區(qū)， ? 在該區(qū)域任意一點溶液均能自發(fā)形成結(jié)晶，溶液中溶質(zhì)濃度迅速降低至 SS 線（飽)11(22ln 211 LLRTMCC ?? ??和）； ? 晶體生長速度快，晶體尚未長大，溶質(zhì)濃度便降至飽和溶解度，此時已形成大量的細小結(jié)晶，晶體質(zhì)量差； ? ，溶液中才有晶體析出？ ? 溶液濃度達到飽和溶解度時，晶體尚不能析出，只有當(dāng)溶質(zhì)濃度超過飽和溶解度后，才可能有晶體析出 ? 首先形成晶核，由 Kelvin 公式，微小的晶核具有較大的溶解度。 ? 因此，在過飽和溶液中成核后可以觀察到許多動力學(xué)現(xiàn)象。 ? ? ？ 新鮮空氣 — 過濾器 — 鼓風(fēng)機 — 加熱器 排放 — 引風(fēng)機 — 二次除塵 — 一次除塵 — 干燥器 — 濕料 產(chǎn)品 ? ？除去的 難易程度如何？ ? （ 1）化學(xué)結(jié)合水 ? 水分與物料的離子型結(jié)合和結(jié)晶型分子結(jié)合（結(jié)晶水），結(jié)晶水的脫除必將引起晶體的崩潰； ? （ 2）物化結(jié)合水 ? 包括吸附、滲透和結(jié)構(gòu)水分，其中吸附水分結(jié)合力最強； ? （ 3）機械結(jié)合水 ? 毛細管水、濕潤水分、孔隙水份 ? 結(jié)合水（包括細胞含水、纖維束含水以及毛細管水）較難以除去；而非結(jié)合水（物料表面的濕潤水分和孔隙水份）較容易除去 ? ？ ? （ 1）平衡水分：當(dāng)一種物料與一定溫度及濕度的空氣接觸時，物料勢必會放出或吸收一定量的水分，物料的含水量會趨于一定 值。在這一階段，干燥速率取決于水分和蒸汽在物料內(nèi)部的擴散速度。 在降速干燥階段，非結(jié)合水以及被蒸發(fā)，繼續(xù)進行干燥，只能蒸發(fā)結(jié)合水。 ? （ 2）刺激起晶法：將 溶液蒸發(fā)至亞穩(wěn)定區(qū)后，冷卻，進入不穩(wěn)定區(qū)，形成一定量的晶核，此時溶液的濃度會有所降低，進入并穩(wěn)定在亞穩(wěn)定的養(yǎng)晶區(qū)使晶體生長。 ? 8） 等電點法 ? 利用某 些生物物質(zhì)具有兩性化合物性質(zhì)，使其在等電點時于水溶液中游離而直接結(jié)晶的方法 ? 9） 解析 ? 在溶液中 加入一種非溶劑可與原始溶劑互溶，而溶質(zhì)在混合溶劑中的溶解度下降。 ? ？ ? ? 溶質(zhì)溶解度與溫度、溶質(zhì)分散度（晶體大?。┯嘘P(guān)。 在雙向電泳中，若第一和第二向電泳的緩沖液 PH 相差很大時，第一向電泳的凝膠條要在第二向分離膠的緩沖液（或者在指定的平衡液）中浸泡平衡，保持離子強度和 PH 值基本相同。 (2)瓊脂糖凝膠結(jié)構(gòu)均勻，含水量大 (約占 9899%)， 近似自由電泳 ，樣品 擴散度較自由電泳小 ， 對樣品吸附極微 ，因此電泳圖譜清晰，分辨率高，重復(fù)性好。 22/1 )( WtN R? 2)(16bRWtN?NLH?9 高效液相色譜的分離原理及應(yīng)用 10 蛋白質(zhì)分離的常用色譜方法有哪些？ 免疫親和層析 、 疏水層析 、 離子交換色譜 （ 最常用的蛋白質(zhì)分離手段 ）、 u 課后習(xí)題 1 P281 u 色譜方法共分幾類？常用的蛋白質(zhì)分離方法有哪些？并簡述其原理 u 何為理論塔板高度和理論塔板數(shù)？如何計算？ u 簡述高效反相液相色譜的工作原理？ u 簡 述 HIC 的工作原理？ 經(jīng)溴化氰活化的瓊脂糖與烷基氨反應(yīng)，生成改性的瓊脂糖，具有新的吸附能力，并且對蛋白質(zhì)還有分辨能力，主要是由于蛋白質(zhì)表面的疏水區(qū)域與載體上烷基殘基的疏水區(qū)域相互作用的結(jié)果，這樣就通過疏水基團的疏水力分離生物大分子。 ？其主要的理化性質(zhì)有哪些？ 強酸性陽離子交換樹脂 ， 弱酸性陽離子交換樹脂 ， 強堿性陰離子交換樹脂 ， 弱堿性陰離子交換樹脂 ， 大孔離子交換樹脂 ， 兩性樹脂 ， 螯合樹脂 ， 多糖基離子交換樹脂 （ 離子交換纖維素 ， 葡聚糖凝膠離子交換樹脂 ） 理化性質(zhì)： 外觀：球形、淺色為宜，粒度大小為 16~60 目 90%； 機械強度： 90%； 含水量： ~； 交換容量：重量交換容量、體積交換容量、工作交換容量或稱表觀交換容量（在某一條件下）； 穩(wěn)定性：化學(xué)穩(wěn)定性、熱穩(wěn)定性； 膨脹度：交聯(lián)度、活性基團的性質(zhì)與數(shù)量、活性離子的性質(zhì)、介質(zhì)的性質(zhì)和濃度、骨架結(jié)構(gòu)； 濕真密度：單位體積濕樹脂的重量； 孔度、孔徑、比表面積 ？ A+自溶液中擴散到樹脂表面 A+從樹脂表面進入樹脂內(nèi)部的活性中心 A+與 RB 在活性中心上發(fā)生復(fù)分解反應(yīng)
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