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周德慶微生物學筆記2(存儲版)

2025-05-07 03:21上一頁面

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【正文】 酶來催化它的分解?!   ?NADP+ NADH2 NADPH2+NAD     在體內(nèi)還有HMP供給NADPH2與磷酸糖 ?!   ?EMP逆過程?!   ?亞單位轉(zhuǎn)移至細胞壁的生長點上(插入),萬古霉素、桿菌肽抑制?!   ?固氮機制     只有在不含有化合態(tài)氮的培養(yǎng)基上生長,且提供ATP、還原力等條件下才能固氮。     (二)氨基酸合成     直接從培養(yǎng)基中吸收。     DLSer+丙酮酸+苯酚 菌體 L Tyr     丙酮酸+ NH3+吲哚 菌體 LTrp     4節(jié):代謝調(diào)控     代謝生化反應酶催化基因編碼→基因調(diào)控     ↓     環(huán)境因子影響 環(huán)境調(diào)控     代謝調(diào)節(jié)部位:真核和原核     合成調(diào)節(jié):誘導合成、終產(chǎn)物阻遏、分解代謝物阻遏     酶     活性調(diào)節(jié):反饋(終產(chǎn)物)抑制、酶活性共價修飾     一、主要調(diào)節(jié)機制     (一)酶的誘導合成     Karstrom 適應酶 Monod 誘導酶     組成酶 Cohn 組成酶     誘導劑不一定是底物,但底物大多數(shù)情況下是有效誘導劑。     機制:調(diào)節(jié)基因 原阻遏物(阻遏物蛋白)     與終產(chǎn)物結(jié)合時被激活,與操縱基因結(jié)合,阻止結(jié)構(gòu)基因轉(zhuǎn)錄?!   ?葡萄糖效應并不是由葡萄糖直接造成,而是葡萄糖某種分解代謝物引起。 圖654     同工酶:多個酶催化同一個反應,分別受不同終產(chǎn)物抑制?!   ?Ea Eb Ec     A B C D E     Ec 缺失,積累C,低濃度供給E。      青霉素生產(chǎn)中,葡萄糖雖能很好利用,但生產(chǎn)不適宜,而乳糖雖緩慢利用,卻可多產(chǎn)青霉素。為了大量生產(chǎn)酶,要避免使用豐富,復雜培養(yǎng)基,不要含快速利用的糖類。     (1)游離基因轉(zhuǎn)移法     (2)phage轉(zhuǎn)導法     5節(jié):自養(yǎng)菌代謝。要注意底物誘導劑的濃度。在自然條件下,微生物產(chǎn)生次級產(chǎn)物能力一般不高,其生產(chǎn)也受代謝調(diào)控。     酶X 酶 + X (X:小分子化合物)     修飾酶      如大腸桿菌Gln合成酶:AMP與酶共價結(jié)合時(腺苷酰轉(zhuǎn)移酶催化)活性低,脫去AMP,活性高。如多粘芽孢桿菌的Asp族氨基酸合成。此稱葡萄糖效應。      (二)終產(chǎn)物阻遏(反饋阻遏)     主要在合成代謝途徑中,終產(chǎn)物或其衍生物對該途徑上一個或多個酶形成的抑制作用?!   ?工業(yè)生產(chǎn)氨基酸     最初利用蛋白質(zhì)水解法生產(chǎn),1957年開始用發(fā)酵法生產(chǎn)?!   ?其中C2H2→C2H4 ,可用氣相色譜檢測,可作為固氮系統(tǒng)存在的有效指標。      ②共生固氮菌:與豆科共生為根瘤菌,與非豆科共生是放線菌。     UDPNAM五肽轉(zhuǎn)至膜上,與一脂質(zhì)載體(細菌萜醇      C55類異戊二烯醇)結(jié)合,釋放出NAM五肽焦磷脂,在膜內(nèi)側(cè)與UDPNAG結(jié)合,構(gòu)成肽聚糖亞單位。     關(guān)鍵酶:1,5二磷酸核酮糖羧化酶、磷酸核酮糖激酶?!   ?3節(jié):合成代謝一、生物合成三要素     能量 、還原力、 小分子前體物     能量由ATP供給,ATP產(chǎn)生有三種方式(底物水平磷酸化,氧化磷酸化,光合磷酸化)     還原力產(chǎn)生:還原力主要指NADH2 和NADPH2     EMP 與TCA 產(chǎn)生的NADH2有3個去向:     1)供H體(中間產(chǎn)物還原成發(fā)酵產(chǎn)物);     2)通過呼吸鏈產(chǎn)生ATP;     3)用于細胞物質(zhì)合成?!   ?丙氨酸+2甘氨酸 3乙酸+3NH3     脫羧作用     通過氨基酸脫羧酶作用,生成有機胺和二氧化碳。包括脫氨反應(酶促)與水解反應(非酶促)?!   ?三種方式:a:末端甲基氧化,     b:次末端亞甲基氧化,     c:兩端甲基氧化 ? 氧化?!   ?分解果膠的微生物主要是一些細菌和真菌,麻類植物漚浸脫膠技術(shù)就是為了利用果膠分解菌分解果膠的能力?!   ?二、纖維素與半纖維素的分解     纖維素是葡萄糖通過β1,4糖苷鍵連接,分子量更大,不溶于水,不能直接被人和動物消化,但它可以被許多真菌包括木霉、青霉、根霉以及放線菌與細菌中的一些菌株分解與利用      纖維素酶復合物:纖維二糖酶(β葡萄糖苷酶),C1酶, Cx酶。枯草桿菌通常用作α淀粉酶的生產(chǎn)菌。     2.甲基紅()反應     大腸桿菌產(chǎn)酸多,,      甲基紅由黃變紅,反應陽性。經(jīng)HMP 途徑?!   ?氧的危害     O2 + e → O2 超氧化物自由基     有一些酶可解除危害?!   ?專性厭氧菌只能在無氧條件下生長,分子氧對其有害?!   ?依據(jù)最終氫受體不同,分成多種類型?!   ?TCA在代謝中占有重要樞紐地位      四種途徑產(chǎn)能比較:      二、遞氫和受氫     根據(jù)遞氫特別是最終氫受體不同劃分     發(fā)酵(分子內(nèi)呼吸)     無氧條件下,底物脫氫后產(chǎn)生的還原力不經(jīng)呼吸鏈而直接傳遞給某一中間代謝物的低效產(chǎn)能反應?!   ?生物氧化過程分為:脫氫、遞氫、受氫三個階段?!   ?分解代謝:復雜營養(yǎng)物分解為簡單化合物(異化作用)?!   ?依功能不同:選擇、鑒別     二、選擇和配制培養(yǎng)基的原則和方法     (一)四個原則     目的明確     培養(yǎng)什么微生物,獲得什么產(chǎn)物,用途     營養(yǎng)協(xié)調(diào)     恰當配比,尤其是C/N比(100/)     物理化學條件適宜     pH,考慮區(qū)別,培養(yǎng)基調(diào)節(jié)能力?!   ?基團轉(zhuǎn)位 group translocation     屬主動運輸,但溶質(zhì)分子發(fā)生化學修飾定向磷酸化?!   ?脂溶性物質(zhì):易透過     離子化合物:弱快強慢(極性)     一、營養(yǎng)物吸收     單純擴散 simple diffusion     依靠胞內(nèi)外溶液濃度差,順濃度梯度運輸,不消耗代謝能,無特異性。     無機元素來源與功能:     一些無機元素加入鹽:     (六)水     存在狀態(tài):游離態(tài)(溶媒)和結(jié)合態(tài)(結(jié)構(gòu)組成)     生理作用:組成成分;反應介質(zhì);物質(zhì)運輸媒體;熱的良導體?!   ?(一)碳源物質(zhì)     定義:凡能提供微生物營養(yǎng)所需碳元素的營養(yǎng)源?!   ?HIV專門侵犯淋巴細胞,造成免疫缺陷?!   ?雙層平板法     單層平板法     玻片快速法     效價(titre),噬菌斑形成單位(pfu)     (二)防治措施     消滅phage,杜絕其依賴生存條件。雙鏈DNA噬菌體三階段轉(zhuǎn)錄:     遺傳信息轉(zhuǎn)移:     成熟(裝配):潛伏期     裂解(釋放):裂解期     上述烈性噬菌體的生長方式,稱為一步生長。病毒的核酸與細胞型也不同?!   ?應用:食用子實體、菌絲體深層培養(yǎng)。通常栽培的僅10多種?!   ?一、形態(tài)和構(gòu)造     營養(yǎng)體由菌絲(hyphae)構(gòu)成,直徑310um,菌絲再形成菌絲體(mycelium)     菌絲:無隔,多核單細胞,低等真菌     有隔,多細胞,高等真菌     菌絲體:營養(yǎng)菌絲,伸入培養(yǎng)基吸收營養(yǎng)     氣生菌絲,向空中生成,形成繁殖器官?!   ?有性繁殖     產(chǎn)生子囊和子囊孢子。由于有細胞器分化,功能不及細菌多,主要是調(diào)節(jié)滲透壓、吸收營養(yǎng)、分泌代謝物等     細胞質(zhì)及內(nèi)含物     細胞核:真核:雙層單位膜,大量核孔,可見染色體,一個或幾個核仁,核膜外有中心體。第一種 家養(yǎng)微生物 ,與人類關(guān)系密切。可濾過,專性活細胞內(nèi)寄生。細胞球狀或桿狀,不運動?!   ?孢子形成方式:橫隔分裂     孢囊孢子     放線菌生活史(發(fā)育周期)     三、代表屬及常見菌     (一)鏈霉菌屬 Streptomyces     90%抗生素,菌絲發(fā)育良好。     純培養(yǎng):克隆clone     菌苔lawn     四、常見常用細菌     細胞結(jié)構(gòu)、菌落特點、代謝產(chǎn)物等?!   ?趨性運動:栓菌實驗     菌毛fimbria (pilus ):許多G尤其是腸道菌,表面有比鞭毛更細,數(shù)目多, ,長23um。 成分:90%以上為水,余為多糖(肽)?!   ?原核:游離態(tài)、多聚核糖體,70S     真核:游離態(tài)、結(jié)合內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上,70、80S     多聚核糖體:一條mRNA與一定數(shù)目的單個RS結(jié)合而成。     間體 mesosome(中質(zhì)體)     細胞膜內(nèi)陷形成。 特點:對滲透壓敏感;長鞭毛也不運動;對噬菌體不敏感;細胞不能分裂等。     脂多糖 lipopolysaccharide LPS     G特有成分。根據(jù)多元醇不同,有甘油型、核糖醇型等5種類型。 凡是經(jīng)乙醇脫色,呈復染劑顏色,稱為革蘭氏陰性菌 G.     結(jié)果不同主要是細胞壁組成及結(jié)構(gòu)差異造成的?!   ?細胞重量10131012g ,每g細菌二、細菌細胞結(jié)構(gòu)     研究細菌細胞結(jié)構(gòu)是分子生物學重要內(nèi)容之一,有了電子顯微鏡才有可能?!   ?螺旋菌 Spirillum:是細胞呈彎曲桿狀細菌統(tǒng)稱,一般分散存在。     四、分類系統(tǒng)     原核生物:     《伯杰氏細菌鑒定手冊》第8版,1973《伯杰氏系統(tǒng)細菌學手冊》第9版,1984     真菌:Ainsworth (1973)系統(tǒng) 酵母:Lodder分類系統(tǒng)     菌種鑒定工作三部曲     獲得該微生物的純培養(yǎng) 測定一系列必要的鑒定指標 查找權(quán)威性鑒定手冊     一章:微生物類群與形態(tài)結(jié)構(gòu)     非細胞型:病毒     細胞型:原核微生物:細菌、放線菌等,     無明顯核,也無核膜、核仁。     三、分類方法     (一)經(jīng)典分類法     隨機地和不系統(tǒng)地根據(jù)一些特征進行分類?!   ?屬名 + 種名 +命名人     如大腸桿菌: Escherichia coli (Migula) Castellani amp。 Crick 提出DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)以及半保留復制假說。 Beijerinck M. W.,18511931,發(fā)現(xiàn)了非共生固氮菌。     Robert Koch 18431910     建立微生物學研究基本技術(shù)     (1)分離和純化細菌:劃線法,混合倒平板法。 在一封閉容器內(nèi),對完全滅菌的汁液加上一些收集到的微生物,無例外地引起微生物生長?!   ?(1)證實了微生物活動和否定了微生物自然發(fā)生學說?!   ?分布廣、種類多     分布區(qū)域廣,分布環(huán)境廣?!   ?特點1舉例     乳酸桿菌:120,000     雞蛋:     人(200磅):      吸收多、轉(zhuǎn)化快     這一特性為高速生長繁殖和產(chǎn)生大量代謝物提供了充分的物質(zhì)基礎(chǔ)。于是提出將生物分成為三界(Kingdom)(后來改稱三個域):古細菌、真細菌( Eubacteria)和真核生物(Eukaryotes)。周德慶微生物學筆記第一節(jié):微生物學的研究對象與任務 一、微生物的含義(什么是微生物)非分類學上名詞,來自法語Microbe一詞。隨后他又對包括某些真核生物在內(nèi)的大量菌株進行了16Sr RNA(18SrRNA)序列的分析比較,又發(fā)現(xiàn)極端嗜鹽菌和極端嗜酸嗜熱菌也和產(chǎn)甲烷細菌一樣, 具有既不同其他細菌也不同于其核生物的序列特征,而它們之間則具有許多共同的序列特征。     這一特點也是微生物與一切大型生物相區(qū)別的關(guān)鍵所在。遺傳物質(zhì)易變異?!   ?微生物學的奠基生理學時期     Louis Pasteur,18221895     他的一生給人類生活帶來了史無前例的影響。 加熱過的空氣通入汁液(煮沸過)并不導致微生物生長?!   ?觀察丁酸發(fā)酵時,發(fā)現(xiàn)厭氧生命,提出好氧、厭氧術(shù)語?!   ?其他人     Serge Winogradsky,18561953,發(fā)現(xiàn)微生物的自養(yǎng)生活。 1953,Watson amp。     (二)命名     命名按照《國際細菌命名法規(guī)》,采用林奈氏雙名法?!   ?生活史     血清學反應     近年又發(fā)展了紅外光譜,GC含量,DNA雜交等。 近年來,采用紅外、核磁、電鏡等新技術(shù)越來越廣泛。是細菌中種類最多的。     (二)細菌大小     如何測量:顯微測微尺          ,長為直徑1幾倍     螺旋菌直徑031um,長150um     細菌大小也不是一成不變的?!   ?革蘭氏染色     Cristein Gram,1884發(fā)明(Koch實驗室)     染色過程:(插入)     凡是不能被乙醇脫色,呈藍紫色,稱為革蘭氏陽性菌 G+。     多元醇與磷酸復合物,通過磷酸二酯鍵與NAM相連。外層:脂多糖層,外壁重要成分,810 nm。有一定抗性?!   ?膜結(jié)構(gòu)(插入)     功能:1)高度選擇透性膜,物質(zhì)運輸:2)滲透屏障,維持正常滲透壓;3)重要代謝活動中心;4)與壁、莢膜合成有關(guān);5)鞭毛著生點,供運動能量?!   ?與真核區(qū)別:     核糖體 ribosome RS     核糖核蛋白的顆粒狀結(jié)構(gòu),RNA+蛋白。 折光率低,負染法觀察。 鞭毛著生狀態(tài)決定運動特點。 形態(tài)包括大小、形狀、隆起、邊緣、表面狀態(tài)、表面光澤、質(zhì)地、顏色等
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