【正文】 AD P + P ie I F 5e I F 5GD P + P i8 0 S Me t t R NAim e t m R NAe I F 4 D活化 8 0 S 起始復合物Me tAU G8 0 S（三）多肽鏈的延長： 1）進位需３種延長因子即 EF(EFTu), EF(EFTs)以及 GTP。 ④ 接受甲酰蛋氨?；ɑ螂孽＃┖笠言鲩L一個氨基酸殘基的肽鍵 （ 3）移位（ Translocation) ? 轉(zhuǎn)肽后氨基酸都位于 A位， P位上無負荷氨基酸的tRNA就此脫落，核蛋白體沿 mRNA向 3?端方向移動一組密碼子，使原結(jié)合二肽酰 tRNA的 A位轉(zhuǎn)變成 P位，而 A位空出，可接受新的氨基酰 tRNA進入，移位過程需要 EF2， GTP和 Mg2+的參加。 （四）翻譯終止與多肽鏈釋放 ? 釋放因子 → 轉(zhuǎn)肽酶 → 水解酶 → 肽鏈從核糖體水解下來 → mRNA與核糖體分離 → tRNA脫落。 肽鏈合成的延伸 ⑴ 后續(xù) AAtRNA與核糖體的結(jié)合 第二個 AAtRNA在 EFTu及 GTP的作用下，生成 AA，然后結(jié)合到核糖體的 A位點。 多核糖體循環(huán)： 真核生物 蛋白質(zhì)合成的不同點： 1． 真核生物 蛋白質(zhì)合成與 mRNA的轉(zhuǎn)錄生成 不偶聯(lián) 2． 真核生物 蛋白質(zhì)合成機構(gòu)更復雜，起始步驟 涉及 因子 很多， 過程復雜 。 四環(huán)素和土霉素： ①抑制細菌起始復合物的形成，②抑制氨酰 tRNA進 A位，阻滯肽鏈的延伸；③影響終止因子與核糖體的結(jié)合，使多肽鏈不能脫落離核糖體。 六、蛋白質(zhì)運轉(zhuǎn)機制 真核細胞結(jié)構(gòu)更復雜，因此合成后的蛋白質(zhì)還要面臨跨越不同的膜而到達細胞器，有些蛋白質(zhì)在翻譯完成后還要經(jīng)過多種共價修飾，這個過程叫做 翻譯后處理 。 ? 研究發(fā)現(xiàn)，一旦 信號肽序列 的 N端暴露在核糖體外，該序列和核糖體迅速與 SRP相結(jié)合，并誘發(fā) SRP與 GTP相結(jié)合，停止新生肽的進一步延伸。 ? SRP的特性是能夠與核糖體相結(jié)合并使肽鏈的延伸暫時受阻， SRP對翻譯的阻斷是暫時的 ,當它碰到ＤＰ時，就不再阻止核糖體的翻譯，這時 SRP離開核糖體而去識別新的信號序列。 核定位蛋白跨核膜運轉(zhuǎn)示意圖 （五）蛋白質(zhì)的降解 ? 蛋白質(zhì)降解是一個有序的過程。 。Importin (α,β亞基 )的作用有點像 SRP受體。 ? SRP可以分為兩個結(jié)構(gòu)域： （１）信號識別結(jié)構(gòu)域，由 RNA與蛋白質(zhì)所構(gòu)成。 在蛋白質(zhì)越過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的轉(zhuǎn)運過程中， SRP和船塢蛋白（或 SRP受體）的作用 （三） 蛋白質(zhì)的翻譯－運轉(zhuǎn)同步運輸 絕大部分被運入 ER內(nèi)腔的蛋白質(zhì)都帶有一個Signal peptide。 六、蛋白質(zhì)運轉(zhuǎn)機制 不論原核還是真核生物，所合成的蛋白質(zhì)需定位于細胞特定的區(qū)域，有些需分泌到胞外，稱分泌蛋白 。 （六）蛋白質(zhì)合成的抑制劑 （一）抗生素類阻斷劑： 抑制細菌細胞內(nèi)蛋白質(zhì)合成而對人體副作用最小，它們作用主要抑制起始因子、延長因子及核糖核蛋白體的作用等等。 肽鏈合成的終止 ① 釋放因子水解 P位點上多肽鏈與 tRNA之間的二酯鍵； ②新生的肽鏈及 tRNA從核糖體上釋放； ③核糖體兩個亞基解體，蛋白質(zhì)合成結(jié)束。 ? ③ 30S起始復合物的形成。 RF3的作用還不明確。 肽鍵的形成 ①核蛋白體“給位”上攜甲酰蛋氨酰 基（或肽酰）的 tRNA ② 核蛋白體“受體”上新進入的氨基酰tRNA。（除某些病毒 mRNA外） 真核蛋白質(zhì)合成的起始 （ 3）真核起始復合物的形成 eIF3＋ 40S＋ eIF2＋ MettRNAfmet＋ GTP＋ eIF3＋ eIF4C＋ mRNA→ 起始復合物 ATP ? eIF3 ＋ eIF1 ＋ eIF4A ＋ eIF4B－－ → mRNA ＋ 40S小亞基 ? 通過帽結(jié)合因子與 mRNA的帽結(jié)合而轉(zhuǎn)移到小亞基上。 1988年，候稚明和 Schimmel的實驗證明丙氨酸 tRNA酸分子的氨基酸臂上 G3： U70這兩個堿基發(fā)生突變時則影響到丙氨酰 tRNA合成酶的正確識別，說明 G3： U70是丙氨酸 tRNA分子決定其本質(zhì)的主要因素。 五 . 蛋白質(zhì)的生物合成 ? 核糖體是蛋白質(zhì)合成的場所， mRNA是蛋白質(zhì)合成的模板， tRNA是模板與氨基酸之間的接合體。 16S rRNA 00C 400C 00C ＋ 21S顆粒 26S顆粒 30S核糖體亞基 21S蛋白質(zhì) 含有 15S蛋白質(zhì) 含有全部 21S蛋白質(zhì) 23S rRNA 00C 440C 00C ＋ 33S顆粒 41S顆粒 48S顆粒 5S rRNA mg2+ 含有 20L 含有全部 mg2+ ＋ 蛋白質(zhì) 34L蛋白質(zhì) 21S蛋白質(zhì) 50S核糖體亞基 核糖體的自我組裝 核糖體至少有 5個活性中心： ① mRNA結(jié)合位點 ② AAtRNA結(jié)合位點 （ A位） ③肽基轉(zhuǎn)移位點（ P位） ④肽酰 tRNA結(jié)合位點 ⑤轉(zhuǎn)肽酶活性中心 ? 此外還有負責肽鏈延伸的各種 延伸因子的結(jié)合位點。其 803－ 811序列高 度保守， 2030－ 2615區(qū)有與 tRNAMet序列 互補的片段，這是其肽酰轉(zhuǎn)移酶的 2個位 點區(qū)域。真核生物核糖體中 RNA占 3/5，蛋白質(zhì)占 2/5。 ? AAtRNA合成酶既要能識別 tRNA，又要能識別氨基酸，它對兩者都具有高度的專一性。 4． tRNA的種類 ? AA tRNA合成酶的作用是將 AA接合于 tRNA上。 2． tRNA的 L形三級結(jié)構(gòu) 3． tRNA的功能 ? tRNA在蛋白質(zhì)合成中處于關(guān)鍵地位。 tRNA的稀有堿基含量非常豐富（ 70余種）。 tRNA是細胞內(nèi)分子量 最小 的一類核酸。 線粒體中共有４組終止碼 AGA 、 AGG 、UAA和 UAG 。 “變偶假說 ” 與簡并性 ? 當一 AA有多個密碼時，如密碼子頭 2個堿基的 任何一個是不同的，則須有不同的 tRNA。 （ 3）密碼的簡并性： 一種氨基酸有 幾組密碼子 ，或者 幾組密碼子 代表一種氨基酸的現(xiàn)象 稱為密碼子的簡并性 。 3）氨基酸的 “ 活化 ” 與核糖體結(jié)合技術(shù) 以人工合成的三核苷酸如 UUU、 UCU、UGU等為模板，在 含核糖體、 AAtRNA的反應(yīng)液 中保溫后通過硝酸纖維素濾膜，只有 游離的AAtRNA因相對分子質(zhì)量小而通過濾膜，而核糖體或與核糖體 結(jié)合的 AAtRNA則留在濾膜上，這樣可把 已結(jié)合與未結(jié)合的 AAtRNA分開 。 實驗 5: 以 共聚三核苷酸 作為模板可得到有 3種氨基酸 組成的多肽。 2） Francis Crick等人第一次證實只有用 三聯(lián) 子密碼 的形式才能把包含在由 AUGC四個 字母組成遺傳信息（核酸）準確無誤地翻 譯成由 20種不同氨基酸組成的蛋白質(zhì)序列， 實現(xiàn)遺傳信息的表達。 ? 無機離子 Mg++ 一 . 遺傳密碼 ——三聯(lián)子 遺傳密碼概況 ? 原核細胞中每種 mRNA分子常帶有多個功能相關(guān)蛋白質(zhì)的編碼信息，以一種 多順反子 的形式排列，在翻譯過程中可同時合成 幾種 蛋白質(zhì)。 ? 轉(zhuǎn)錄 是指拷貝出一條與 DNA鏈序列完全相同（除了 T→ U之外）的 RNA單鏈的過程，是基因表達的 核心 步驟。 序 . 基因與基因表達的一般概念 ? 基因表達包括 轉(zhuǎn)錄 （ transcription）和 翻譯（ translation）兩個階段。 ? mRNA模板 ? rRNA構(gòu)成核糖體作為蛋白質(zhì)合成場所 ? tRNA搬運工具 ? 氨基酸 原料 ? 蛋白質(zhì)因子 起始因子 IF、延伸因子 EF、 釋放因子 RF等 ? 酶 氨基酰 tRNA合成酶、轉(zhuǎn)肽酶、轉(zhuǎn)位酶