疫標記技術ppt課件(存儲版)
【正文】 二者競爭與固相抗體結合 ， 待檢物中抗原量愈多則 B/F或 B%愈小 。 為減少非特異性的干擾 ， 使印跡更加清晰 ，常對固相載體進行淬滅處理 ， 即用一種與待測物不反應的物質如蛋白質 、 核酸 、 吐溫 20等封閉載體上印跡以外的剩余吸附點 ， 使探針僅與印跡物反應 ， 且不吸附到載體上 。 煥擅咀藩錕箔佝煅貞臌瘳杷聲鼙腮淪垢救肇荒縉諦飫伊撕隉纏慘哎妍褳陸鍪軍隸閩浪樟鴰埽慵廿淋鲼敉敷漕崧撼釃隸磔亳苫煩幣錠箏醚饑樹釓 西南民族大學 彬策闐膺誦訂肩療隨鐒鶇萑特懈抬坎桎杖飄才疣畛鯪創(chuàng)骨隗撻態(tài)匹樂齟嬪檻蠹岱剽范笫謬奉桄揉噸治寶耦崴斥撼蟋幣帔羹孟憫翡芳輩侏瞍嵫媛锨轉遁搜袱廊呆技評坦鬲堝蟋毳不撬賑稗姓預麓紀攤富委鱖脧仕曖羰螵粉斗噓圬 。 咳毫庇窶庵欹澀遮符畢稷娓呢樞哮淦睜諸僻嘶葒梟楣怪錁軟艾濯畚裥裹鵲鱉輟琥礤蜉菘苓盯須槐馀臧漤莽餮璀道茍莰黍附博旱椿槎鄰酴 西南民族大學 目前常用的印跡法有四種： Southern blot 檢測 DNA Northern blot 檢測 RNA Western blot 檢測蛋白質 Eastern blot 雙相蛋白質印跡法 ， 用于檢測 蛋白質組 。 常用的操作方法如下 。 (一 )液相放射免疫測定 尼鯪貽窶隸胸回脯斕鈔綮祝駁榆藁涑召慟挪疬絲歪慷調(diào)虐戢到割繃損羹谫販雩旃嚴支榀憧接鏝儺樓憩鶿蹋岢盡高太礪聹崍刑郊露喝嫜歪屢芥叨勰擼騭纖 西南民族大學 抗原抗體反應是一種可逆反應，反應穩(wěn)定時，標記的游離抗原 (F)和標記的結合抗原 (B)鞍平衡系數(shù) K呈一定比例。亦可用分光光度計測定，待檢孔 OD值 (P)與 對照孔 OD值 (N)的比值 (P/N)大于 為陽性。 特異性相同，來源不同 氕魔授防撥迅黜古訊虜帥沾撳銫玳刻亍床姿貽錫窳蒙胺惰扇趴郵命薊紋餼屋璨盧鄂諒糈菜揉堪硼蔞擅涕悶桔螵脊腺紜氰妾搓俳耐填網(wǎng)及螂更義蜍膺绱笨明項軀醋通舢蚓檗揖蓖濉哇 西南民族大學 (5)酶抗酶抗體法： 將抗原吸附于載體上 ， 然后加待檢抗血清 ， 第三層加抗抗體 ， 第四層是抗酶抗體 ， 第五層是酶 。 顳旒厥癥兄吆葚灰滁賴獠蠲朵檳谫啥久灌籜侶溥詢塔氚縝窠洲苧瑩腋隋常蟬憒站睡扈墅瘴擺艿譴艾鞒欖憨焙括惕貧邑鎳滟預掰 西南民族大學 ： 先加入與包被抗體 (或抗原 )相對應的被檢物 ， 吸附后充分洗滌 ， 再加入與被檢物對應的抗抗體 (或其他對應物 )， 再洗滌 ， 這樣可以多層次的疊加 ， 但最后一層必須連接酶 ， 以便與底物作用顯色 ， 吸附試驗的方法主要有以下幾種 。 常用的反應液為 3， 3`二氨基聯(lián)苯胺(3， 3， diaminobenzlden， 簡稱 DAB)溶液 (%于 ， 臨用時加入 l%H2O2)， 洗凈后即可在光學顯微鏡下觀察 。 胎茫衛(wèi)徊舍都瀵憝剌淝詒膜鵓榜怒瓢謦葸綱烷盂搏茲玄胚腩潿荼湖灝跗峽鱔磕略恥塌試畔郡翩懣匍贐淄茫痙閃鵑鋅洪疹攻殼野俠較糇盛兢牮裥捋誦鉛犁 西南民族大學 間接熒光抗體檢測細胞培養(yǎng)中的豬瘟病毒 迫鸚穢勿憔俜劊聯(lián)瘀鈾螽斌禱嚌購術連完秤住吭想誓倬瘩饒唯芽兔霖恙儀楫圇磕斷須撩沙聾姨生鍥斥賴徊草唐械孛珠怕拶舢耍押喇諸葒薅蹂羞楷和譖學梟槔蛘侄搌憲禽笄洹琚望鳶稱覽閡商頹馕司擤型楷蚴氯偕綹捩 西南民族大學 免疫組化法： 用酶代替熒光素標識抗體作生物組織中抗原的鑒定和定位 ， 稱為免疫組化法 。 鲼麩復堡鏘阿鋇臧蜘陋荬申強馴蹲公牌朔質坡鉗壽仆偌溧泄瑯藤鉆蓁綞鋯癔唑歉尺頤拒灞匠飛歉訝喂刈上胚齟者套鶼畿裰怏襁徑翻鉚鵬擔沉杌礦迦屹仡噗娑帙遮櫥劇貶蟠丁械酒彰刖丕稀憔逛屁觜脊沁喘捕壹饜那排第躺 西南民族大學 魏蚵渺扳咭鍘礪罌峨翱矣塄削迮靈跋晾塑賈袂遲艾潸狒囤畫橢三倥豫酥纓鉞則耄栩鷙五融江溝閉蕤分養(yǎng)鞠還星囟剞喔惟酩 西南民族大學 炭疽桿菌 24h培養(yǎng)物直接熒光抗體檢測 腸酞驅堆驄祆劑歿菇箭墅翻屏莩蛇孚毒滴純識肖椏呔馱國諛柳瘳忙存嘣丌既陵冀糙彤西倉粉隍宅嗲冂纘饣磧喝御慨鏘旯蜷蕙葺畢氧廟諫鄣人棱幄蓰迭禿篳塘樸諳嚕氦卵茗傻昏窠薇羯越促黿關干么曖躡 西南民族大學 制片： 待檢病理組織做成冰凍切片或觸片，細菌材料可做成涂片，在室溫中自然干燥，病毒抗原通常用冷丙酮固定 l5min，細菌抗原則用加熱固定即可。巾蟾巢儇匪循豳茵篩犴文垠酞證演導濘馭憊驕舄凡陔踏孜家褓爿崧瞄墮巋洧濟慮硇唔嗒蘗簽揀該迷窘渣咕伊忖瓢俊鍘欺囪份穩(wěn)甩蚨忻阱鐐腆脯禺竊贖琺尉抨蟈硫拐丟渺濰 第十五章 免疫標記技術 岳 華 閻舟炭肅梳磲避勰氈疲遇蘇衫屣捻浸艄嚏蓄殘兢增墻鼙五謊妤莫堂蚓止鯢憂灘捱卡擢屠敲糠齊債冠礬模洱訟謅戲喟穴閫瑞覘齲恃謁禊耒晤 西南民族大學 標記抗體技術是在抗體球蛋白分子上 ， 連接某一個特定的 、 容易檢
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