hplc分離條件的優(yōu)化步驟以及定量計算公式的選擇(存儲版)
【正文】 tRRR???R=，色譜圖中兩個相鄰色譜峰達到基線分離開； R=，表明兩個相鄰組分只有 94%分離開。 用 UVD（紫外吸收檢測器）檢測：可以苯、四氯乙烯或 KNO3水溶液作探針測死時間 用 RID檢測：可以重水（ D2O）、重氫甲醇（CD3OH）作探針測死時間。 對組成復雜、由具有寬范圍 k′ 值組分構(gòu)成的混合物，需用梯度洗脫技術(shù)，才能使樣品中每個組分都在最佳狀態(tài)下洗脫出來。 適用范圍：樣品中所有組分均能流出色譜柱，并在檢測器上產(chǎn)生信號。 ωi = △ ωi / A ′i(h ′ i) / A i(h i) 1 標準加入法中加入的預測組分（ i） 還可以作為另一組分（ j）的含量。 ωi = ?′i ?ωs?A i(h i) / A s (h s) （ ?′i = f i/ f s） 式中， ?′i— 待測組分（ i）對內(nèi)標物（ s）的質(zhì)量相對校正因子，可由實驗測定或由文獻值進行計算得到。 (二 )梯度洗脫：在同一分析周期內(nèi)．按 — 定程度不斷改變流動相的濃度配比，從而使每個組分都在適宜的條件下獲得分離的一種洗脫方法。 保留時間和容量因子由色譜過程的熱力學因素控制，可通過改變流動相的組成和使用梯度洗脫來進行調(diào)節(jié)。 t M = Lπ r2 εT / F 式中， L為柱長， cm； r為柱內(nèi)徑半徑， cm； F為流動相體積流速， cm3/s； εT 為總孔率，對全多孔固定相為 ，對化學鍵和固定相、離子交換劑為，對薄殼型固定相為 。 (最低指標） 分離度表達式： R=n1/2/4?(α1)/α?k2 ′ /(1+k2 ′ ) R受熱力學因素 [容量因子 k ′和選擇性系數(shù) α（ α = k2 ′ / k1 ′ ） ]和動力學因素（理論塔板數(shù)
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