【正文】 運(yùn)用顯微鏡、光譜技術(shù)和化學(xué)平衡形態(tài)模型與化學(xué)形態(tài)連續(xù)提取技術(shù)來系統(tǒng)的研究磷施入受到重金屬污染的土壤后，重金屬在土壤和植物中的遷移與轉(zhuǎn)化，尤其是充分利用薄膜擴(kuò)散梯度技術(shù)(DGT)和同位素技術(shù)等土壤化學(xué)的熱門工具，來明確磷與重金屬的相互作用機(jī)理，并對(duì)具有不同性質(zhì)并受到重金屬污染的土壤，定量的區(qū)分和測(cè)評(píng)各種相互作用機(jī)理。在本次研究中，根據(jù)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可以直觀的看出 蠶豆根尖染色體畸變的形態(tài)雖然是多種多樣的，但是主要以染色體斷片、染色體粘連，而落后染色體都較少，而染色體環(huán)和染色體橋則更少，在實(shí)驗(yàn)中也觀察到相應(yīng)的微核現(xiàn)象。 攀枝花學(xué)院本科畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文） 總結(jié)與展望 18 4 總結(jié)與展望 磷在錳的脅迫下對(duì)蠶豆根尖細(xì)胞分裂指數(shù)的影響 通過本次實(shí)驗(yàn)可以發(fā)現(xiàn)通過磷的加入可以對(duì)蠶豆根尖細(xì)胞有絲分裂產(chǎn)生影響。 染色體粘連如圖 (附錄 A 圖八 )所示，主要形成的情況有兩種：一是在細(xì)胞有絲分裂的前期，已經(jīng)高度螺旋化的染色體不能正常排列到赤道板上。 染色體斷片是指由于染色體斷片化產(chǎn)生的染色體斷片如圖 (附錄 A 圖二 )所示，一個(gè)染色體可以進(jìn)行一處或者兩處斷裂，更甚者就是發(fā)生多處斷裂。只是因?yàn)榱诐舛鹊牟煌绊懙某潭炔煌?，這可能與磷在蠶豆根尖細(xì)胞內(nèi)的作用機(jī)理密切相關(guān)。但是從總體趨勢(shì)來分析，磷的加入任然是促進(jìn)蠶豆根尖有絲分裂的。但是任然明顯高于對(duì)照組，表明了磷的加入對(duì)蠶豆根尖的細(xì)胞分裂時(shí)有促進(jìn)作用的。實(shí)驗(yàn)六組所用磷濃度為 ，此時(shí)染色體畸變率高達(dá) ％ ，比攀枝花學(xué)院本科畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文） 結(jié)果與分析 13 對(duì)照組的染色體畸變率還要高，這可能說明了較低濃度的磷不但不能對(duì)錳有修復(fù)作用，反而增加了蠶豆根尖對(duì)重金屬錳的吸收。然后轉(zhuǎn)在 400倍鏡下進(jìn)行計(jì)數(shù)。 制片 用蒸餾水洗去染液，然后于載玻片上滴上一滴蒸餾水，輕輕蓋上蓋玻片，用攀枝花學(xué)院本科畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文） 實(shí)驗(yàn)方案與過程 10 濾紙?jiān)谝贿呂フ麴s水后，用大拇指適當(dāng)用力壓蓋玻片后，在用中性筆尾輕輕敲片，直到細(xì)胞均勻分散為止。然后用蒸餾水沖洗三次，最后于 1000ml 燒杯中加水 500ml 在20℃條件下浸泡 24— 27h待其吸脹。 卡洛氏 固定液的配制：取無水乙醇三份與一份冰乙酸混勻即可，現(xiàn)配現(xiàn)用。 染色體形態(tài)的畸變是因?yàn)槿旧珕误w或染色體的斷裂造成了染色單體或染色體的丟失，或者是導(dǎo)致了各種重排現(xiàn)象，進(jìn)而出現(xiàn)了結(jié)構(gòu)異常的染色體。到了 70 年代的時(shí)候，蠶豆根尖細(xì)胞染色體畸變技術(shù)就發(fā)展得相當(dāng)成熟。喜溫暖濕潤氣候和 — 8 的粘壤土。次為云南、貴州、湖南、 湖北、江蘇、浙江、青海等省。蠶豆屬于植物界、被子植物門、雙子葉植物綱、豆目、豆科、大豆屬。磷酸鹽穩(wěn)定重金屬的機(jī)理是特別復(fù)雜的，其中主要包括磷酸鹽對(duì)重金屬直接吸附、誘導(dǎo)吸附，或者是與磷酸鹽發(fā)生沉淀反應(yīng)三個(gè)方面。包括水溶性磷肥，重過磷酸鈣 (Ca(H2PO4)2)、過磷酸鈣 (CaSO4和 Ca(H2PO4)2)及磷酸二氫鈣 (Ca(H2PO4)2)等；弱酸溶性的磷肥 ,如鋼渣磷肥 ()與鈣鎂磷肥 (CaSiO3和 Ca3(PO4)2)等 [18]。廣泛存在于動(dòng)植物組織中，也是人體含量較多的元素之一，稍次于鈣排列為第六位。錳毒害的癥狀通常表現(xiàn)在老葉脈間的區(qū)域有褐斑和皺縮，使植物的根部變?yōu)楹稚?，葉緣出現(xiàn)白化的象或者是變?yōu)樽仙?。因此錳在植物體內(nèi)必須維持一個(gè)正常量，過低則導(dǎo)致低錳脅迫、過高則導(dǎo)致高猛脅迫，都會(huì)對(duì)植物體產(chǎn)生毒害作用。當(dāng)時(shí)錳工業(yè)污染問題成為了高層關(guān)注的話題。 而變異系數(shù)的大小則反應(yīng)了其人為干擾因數(shù)的大小，越大則說明人為干擾越是強(qiáng)烈。錳在空氣中達(dá)到 500ug/m3就可能引起錳中毒。 錳污染現(xiàn)狀 錳是一種化學(xué)元素，錳的英文名為 Manganese?？傊亟饘偻ㄟ^各種各樣的方式不斷的積累，最終導(dǎo)致嚴(yán)重的環(huán)境問題。主要通過以下三個(gè)途徑來污染環(huán)境。由于不同的重金屬具有各種不同的性質(zhì)，以及不同的密度形態(tài) [2]，因此不同的重金屬對(duì)環(huán)境的污染程度是不同的。大量的錳可對(duì)植物產(chǎn)生毒害作用，它能阻礙植物的生長，降低光合作用，減少蒸騰作用和水分的吸收，還能引起銅的缺乏。 結(jié)果表明當(dāng)用 2mmol/L 的錳分別與 13mmol/L、 、 、 ，在該實(shí)驗(yàn)條件下蠶豆根尖細(xì)胞平均有絲分裂指數(shù)呈現(xiàn)先增后減的趨勢(shì)，在磷濃度為‰ ；而平均染色體畸變率呈現(xiàn)先減后增的趨勢(shì)，磷濃度為 ％。說明在該實(shí)驗(yàn)條件下，有絲分裂指數(shù)和染色體畸變率與該復(fù)合 培養(yǎng)液有明顯的劑量 —— 效應(yīng)關(guān)系。研究重金屬對(duì)植物的傷害是近年來植物生態(tài)學(xué)領(lǐng)域中一個(gè)較有現(xiàn)實(shí)意義的課題。重金屬污染物因?yàn)榫哂卸拘源?、潛伏期長、來源廣泛并且具有能隨食物鏈積累的特點(diǎn)，因此重金屬污染是我們應(yīng)該優(yōu)先考慮解決的污染問題之一。最主要是廣泛的使用化肥與農(nóng)藥。 目前使用的重金屬修復(fù)技術(shù)包括了化學(xué)修復(fù)、物理修復(fù)、微生物修復(fù)、熱處理法、淋洗絡(luò)合法、生物修復(fù)等。其化學(xué)符號(hào)是 Mn，它的原子序數(shù)是 25，是一種過渡金屬。錳可以對(duì)大氣、水體 、 土壤造成不同程度的污染。由此則說明攀枝花地區(qū)的錳將可能對(duì)環(huán)境造成的污染問題不容忽視。經(jīng)過幾年的努力，目前錳三角的形式已經(jīng)發(fā)生了較大 的變化，但是任然不容忽視，應(yīng)隨時(shí)保持高度的警惕，既要經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，同時(shí)也要環(huán)境的保護(hù)，二者不可分割。 錳在植物體內(nèi)參與酶系活動(dòng)中，其主要作用則是作為一種活化劑，根據(jù)統(tǒng)計(jì)顯示，有 36 中酶將錳作為活化劑， 3 種酶將錳作為自身成分 [11]。植 物體中過量的錳還可能導(dǎo)致植物體對(duì)其他的元素的吸收，比如鎂、鐵、鈣的吸收，從而影響了植物體的光合作用 [16]； 當(dāng)植物體內(nèi)的錳含量過低的時(shí)候，則會(huì)產(chǎn)生低錳脅迫現(xiàn)象。動(dòng)物體內(nèi)磷主要集中于骨和牙，同時(shí)也分布于全身各組織及體液中，其中一半存在于肌肉組織。 影響磷材料對(duì)重金屬修復(fù)效果的因素包括以下幾個(gè)方面：首先是磷材料的類型，磷材料類型的不同其對(duì)重金屬的修復(fù)效果是不一樣的，其類型的不同，則磷的含量不同。 磷酸鹽加入土壤后，也可能導(dǎo)致很多的環(huán)境問題。 一年生或二年生草本。蠶豆株 高 30— 180 厘 米。蠶豆子粒蛋白質(zhì)含量約 25%— 28%，含 8 種必需氨基酸。作為一種檢測(cè)化學(xué)品遺傳學(xué)毒性的方法為人們所知，并且被廣泛的應(yīng)用。重金屬攀枝花學(xué)院本科畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文） 緒論 7 引起染色體形態(tài)畸 變的原因是多種多樣的，其中主要有： DNA 造成損傷； 擾亂 DNA 和有關(guān)蛋白質(zhì)合成，以及干擾 RNA 轉(zhuǎn)錄的過程，進(jìn)而使與染色體移動(dòng)的相關(guān)物質(zhì)幾乎不能合成或者是合成量遠(yuǎn)遠(yuǎn)的減少，不能滿足正常的活動(dòng)的需要 ； 色體造成損傷過后不能修復(fù)，重接形成新的染 色體 [31]。 染液的配制：依次如下配制 A 液、 B 液、 C 液，最后才配成染液。 催芽 于醫(yī)用托盤上先鋪蓋兩層醫(yī)用脫脂棉，然后用 150ml蒸餾水使其浸濕，在整齊擺放已吸脹蠶豆于醫(yī)用脫脂棉上，最后蓋上一層醫(yī)用脫脂棉保濕，并在 24℃培養(yǎng)箱中催芽 42h待根長長至 — 2cm左右，且 24h 后補(bǔ)充水分 100ml。 表 實(shí)驗(yàn)處理以及分組 一組 二組 三組 四組 五組 六組 1 139。 照相 本實(shí)驗(yàn)拍照分為實(shí)驗(yàn)過程拍照和顯微拍照。當(dāng)實(shí)驗(yàn)三組用 修復(fù)時(shí)，隨著磷濃度的增加，其染色體畸變率也下降到 ％ 。 攀枝花學(xué)院本科畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文） 結(jié)果與分析 14 本次實(shí)驗(yàn)染色體畸變的形態(tài)同樣主要是染色體斷片和染色體粘連，而落后染色體次之。 本次實(shí)驗(yàn)從表中數(shù)據(jù)也可以直接 看出，染色體畸變的形態(tài)仍然主要以染色體斷片、染色體粘連與落后染色體出現(xiàn)，而以染色體粘連更為明顯。 表 磷在錳的脅迫下對(duì)蠶豆根尖細(xì)胞平均染色體畸 變率（ %） 一組 二組 三組 四組 五組 六組 Z1 % Z2 % Z3 % % 磷對(duì)重金屬錳的修復(fù)作用同樣也是反應(yīng)的比較明顯，如表 。染色體斷片是染色體畸變的主要形式之一。二是在有絲分裂的中期已經(jīng)排列在赤道板上的染色體，不能正常的移向細(xì)胞的兩極形成新的子細(xì)胞核。通過細(xì)胞分裂指數(shù)可以得出的結(jié)論為：在磷濃度為 分裂指數(shù)達(dá)到 ‰ 。 展望 在本次實(shí)驗(yàn)中只是涉及到了不同濃度的磷對(duì)錳的修復(fù)能力的研究，但是還未涉及到磷對(duì)錳修復(fù)機(jī)理的研究，同時(shí)也沒有涉及相關(guān)的時(shí)間變量，希望在以后的研究中更多的涉及相關(guān)項(xiàng)目和因素的研究。 攀枝花學(xué)院本科畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文） 參考文獻(xiàn) 20 參考文獻(xiàn) [1] 黃先飛 ,秦樊鑫 ,胡繼偉．重金屬污染與化學(xué)形態(tài)研究進(jìn)展 [J]． 微量元素與健康研究 ,20xx,25(1):4851. 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