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2024-12-30 19:58 上一頁面

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【正文】 用兩種限制酶處理質粒和外源 DNA,因形成的末端不同可避免上述情況的發(fā)生。 9.解析:當限制酶在它識別序列的中心軸線兩側將 DNA 的兩條鏈分別切開時,產(chǎn)生的是黏性末端,而當限制酶在它識別序列的中心軸線處切開時,產(chǎn)生的則是平末端。 DNA連接酶是在兩個 DNA片段之間形成磷酸二酯鍵,將兩個 DNA 片段連接成重組 DNA 分子。 ① 采用 BamHⅠ 和 HindⅢ 酶切,得到 ________種 DNA片段。 (5)請畫出質粒被切割形成黏性末端的過程圖。 (2)質粒運載體用 EcoRⅠ 切割后產(chǎn)生的片段如下: AATTC??G G??CTTAA 為使運載體與目的基因相連,含有目的基因的 DNA除可用 EcoRⅠ 切割外,還可用另一種限制性內(nèi)切酶切割,該酶必須具有的特點是 ___________________________________。 (4)與只使用 EcoRⅠ 相比較,使用 BamHⅠ 和 HindⅢ 兩種限制酶同時處理質粒、外源 DNA的優(yōu)點在于可以防止 ________________。 3.選 C 解旋酶可催化堿基之間氫鍵 (①) 的斷裂,限制酶可使兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵 (②) 斷開,而 DNA連接酶則催化磷酸二酯鍵 (③) 的形成。 B項氨芐青霉素抗性基因和四環(huán)素抗性基因都完好,在四環(huán)素培養(yǎng)基上和氨芐青霉素 培養(yǎng)基上都能生長。 (2)SmaⅠ 識別的是 CCCGGG序列,在 C與 G之間切割, SmaⅠ 酶切位點越多,也就是 C— G堿基對越多,由于 C與 G之間的氫鍵 (3個 )比A與 T之間的氫鍵 (2個 )數(shù)量多,故其含量越多,質粒的熱穩(wěn)定性越高。 答案: (1)0、 2 (2)高 (3)SmaⅠ 會破壞質粒的抗性基因和外源 DNA中的目的基因 (4)質粒和含目的基因的外源 DNA片段自身環(huán)化 (5)DNA連接 (6)①2 ②3 。基因工程中除質粒外,還有噬菌體、動植物病毒等也可作為運載體。 7
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