【正文】 糖被通常含有由細胞分泌出來的細胞外基質(zhì)，厚約 5nm，其中的糖類是與質(zhì)膜的蛋白質(zhì)分子、脂類分子共價結合形成糖蛋白和糖脂分子。其 機理是通過對被轉(zhuǎn)運到細胞內(nèi)的分子進行共價修飾（主要是進行磷酸化）使其在細胞中始終維持“較低”的濃度 , 從而保證這種物質(zhì)不斷地沿濃度梯度從細胞外向細胞內(nèi)轉(zhuǎn)運。運輸時需要先建立電化學梯度，在動物細胞主要是靠鈉泵，在植物細胞則是由 H+泵建立的 H＋質(zhì)子梯度。共有四種類型的運輸 ATPase: ① P 型離子泵 (Ptype ion pump),或稱 P 型ATPase 。它可以使紅細胞快速膨脹和收縮以適應細胞間滲透性的變化。 載體蛋白既參與被動的物質(zhì)運輸，也參與主動的物質(zhì) 運輸。 電位 門控通道在神經(jīng)細胞的信號傳導中起主要作用 , 電位 門控通道也存在于其他的一些細胞 ,包括肌細胞、卵細胞、原生動物和植物細胞。通道蛋白可以是單體蛋白 ,也可以是多亞基組成的蛋白 ,它們都是通過疏水的氨基酸鏈進行重排 ,形成水性通道。是指非脂溶性物質(zhì)或親水性物質(zhì) , 如氨基酸、糖和金屬離子等借助細胞膜上的膜蛋白的幫助順濃度梯度或順電化學濃度梯度 , 不消耗 ATP 進入膜內(nèi)的一種運輸方式。如果改變膜兩側(cè)的條件，如加熱或加壓，就有可能改變物質(zhì)的流動方向，其原因就是改變了自由能。可被短桿菌肽 A 離子通道運輸?shù)年栯x子有∶H+ 〉 NH4+〉 K+ 〉 Na+ 〉 Li+。在多細胞生物中 ,整個細胞層作為半滲透性的障礙，而不僅僅是細胞質(zhì)膜。在該技術中將一個含有不配對的電子基團 (通常是硝基氧基團 )加到磷脂的脂肪酸尾端，這就是所謂的自旋標記(spinlabel )。 根據(jù)熒光恢復的速度 , 可推算膜脂的擴散速度為每秒鐘為幾個微米，而膜蛋白的擴散速度變化幅度較大，少數(shù)膜蛋白的擴散速度可達到膜脂的速度，大多數(shù)蛋白的擴散速度都比膜脂慢，還有一些膜蛋白完全限于某一個區(qū)域。 30. 光脫色熒光恢復技術 (fluorescence recovery after photobleaching FRAP) 研究膜流動性的一種方法。 29. 成斑 (patching)、成帽 (capping)反應 淋巴細胞通過產(chǎn)生抗體對外源蛋白進行應答 ,抗體分子位于細胞質(zhì)膜上?；具^程包括細胞融合導致異核體 (heterokaryon)的形成 , 異核體通過細胞有絲分裂導致核的融合 , 形成單核 的雜種細胞。 26. 側(cè)向擴散 (lateral diffusion) 又稱側(cè)向遷移。由于過氧化物酶的分子較大而不能透過細胞膜 ,這樣可以用于標記膜 外表面的蛋白 ,包括外周蛋白和整合蛋白的外部分。 這一模型強調(diào)了膜的流動由性和不對稱性 ,較好地體現(xiàn)細胞的功能特點 ,被廣泛接受 ,也得到許多實驗的支持。另外 ,單位膜模型還認為膜的外側(cè)表面的膜蛋白是糖蛋白 ,而且膜蛋白在兩側(cè)的分布是不對稱的。 1954年對該模型進行了修改：膜上有一些二維伸展的孔 , 孔的表面也是由蛋白質(zhì)包被的 ,這樣使孔具有極性 ,可提高水對膜的通透性。之所以能夠在膜上發(fā)現(xiàn)這類脂錨定蛋白 ,是因為用特異識別和切割含有肌醇磷脂的磷脂酶處理細胞膜能 釋放出蛋白質(zhì)。這種蛋白完全外露在脂 雙層的內(nèi)外兩側(cè) ,主要是通過非共價健附著在脂的極性頭部 , 或整合蛋白親水區(qū)的一側(cè) , 間接與膜結合。在構建導彈人工脂質(zhì)體時 ,不僅要將被運載的分子或藥物包入脂質(zhì)體的內(nèi)部水相 ,同時要在脂質(zhì)體的膜上做些修飾 ,如插入抗體便于脂質(zhì)體進入機體后尋靶。 14. 膽固醇 (cholesterol) 膽固醇存在于真核細胞膜中。磷脂分子的極性端是各種磷脂酰堿基 , 稱作頭部。錨定蛋白一方面與血影蛋白相連 , 另一方面與跨膜的帶 3蛋白的細胞質(zhì)結構域部分相連 , 這樣，錨定蛋白借助于帶 3 蛋白將血影蛋白連接到細胞膜上，也就將骨架固定到質(zhì)膜上。血型糖蛋白 A是一種單次跨膜糖蛋白 , 由 131個氨基酸組成 , 其親水的氨基端露在膜的外側(cè) , 結合 16 個低聚糖側(cè)鏈。 7. 血影蛋白 (spectrin) 又 稱收縮蛋白，是紅細胞膜骨架的主要成份 ,但不是紅細胞膜蛋白的成份 ,約占膜提取蛋白的 30%。 真核生物除了具有細胞表面膜外，細胞質(zhì)中還有許多由膜分隔成的各種細胞器，這些細胞器的膜結構與質(zhì)膜相似，但功能有所不同，這些膜稱為內(nèi)膜(internal membrane), 或胞質(zhì)膜 (cytoplasmic membrane)。 基因敲除是一套組合技術，包括基因重組、細胞分離培養(yǎng)、轉(zhuǎn)基因等。 34. 基因克隆 (gene cloning) 是 70 年代發(fā)展起來的一項具有革命性的研究技術，可概括為∶分、切、連、轉(zhuǎn)、選。層析柱中的填料是某些惰性的多孔網(wǎng)狀結構物質(zhì)，多是交聯(lián)的聚糖 (如葡聚糖或瓊脂糖 )類物質(zhì)，使蛋白質(zhì)混合物中的物質(zhì)按分子大小的不同進行分離。在氯化銫形成的密度梯度中，離心管頂部的密度為 :，底部為 :。在這種離心分離方法中，要用介質(zhì)產(chǎn)生一種密度梯度， 這種密度梯度覆蓋了待分離物質(zhì)的密度，這樣，通過離心使不同密度的顆粒懸浮到相應的介質(zhì)密度區(qū)。起始的離心速度較低，讓較大的顆粒沉降到管底，小的顆粒仍然懸浮在上清液中。 25. 單 克 隆 抗 體 技 術 (monoclonal antibody technique) 1975 年英國科學家 Milstein 和 Kohler 所發(fā)明， 并獲得 1984 年諾貝爾醫(yī)學獎。在植物組織培養(yǎng)中的愈傷組織是指植物細胞在組織培養(yǎng)過程中形成的無一定結構的組織團塊，在適宜的條件下，愈傷組織可再分化，形成芽、根，再生成植株。因此，較為嚴格地說是指成功傳代之前的培養(yǎng)，此時的細胞保持原有細胞的基本性質(zhì)，如果是正常細胞，仍然保留二倍體數(shù)。這時原子核進動與電磁波產(chǎn)生共振， 叫核磁共振。 18. 顯微分光光度術 (microspectrophotometry) 將顯微鏡技術與分光光度計結合起來的技術。 16. 免疫電鏡 (immunoelectron microscopy) 將抗體進行特殊標記后用電子顯微鏡觀察免疫反應的結果。由于沒有高能電子束， 對表面沒有破壞作用 (如輻射， 熱損傷等 )所以能對生理狀態(tài)下生物大分子和活細胞膜表面的結構進行研究，樣品不會受到損傷而保持完好。當針尖和樣品表面距離很近時 (1nm以下 )， 針尖和樣品表面之間會產(chǎn)生電壓。 11. 冰凍斷裂復型 (freezefracture replication)技術 先將生物樣品在液氮中 (196℃ )進行快速冷凍，防止形成冰晶。由于電子密度高的重金屬鹽包埋了樣品中低電子密度的背景，增強了背景散射電子的能力以提高反差，這樣，在圖像中背景是黑暗的，而未被包埋的樣品顆 粒則透明光亮，這種染色稱為負染技術。 7. 掃描透射電子顯微鏡 (scanning transmission electron microscopy， STEM) 既有透射電子顯微鏡又有掃描電子顯微鏡的顯微鏡。 相差顯微鏡具有兩個其他顯微鏡所不具有的功能 :①將直射的光 (視野中背景光 )與經(jīng)物體衍射的光分開 。物質(zhì)經(jīng)過紫外線照射后發(fā)出熒光的現(xiàn)象可分為兩種情況，第一種是自發(fā)熒光，如葉綠素、血紅素等經(jīng)紫外線照射后，能發(fā)出紅色的熒光，稱為自發(fā)熒光 。細胞社會學主要是在體外研究細胞的社會行為，用人工的細胞組合研究不同發(fā)育時期的相同細胞或 不同細胞的行為 。染色體的一級結構是由核小體組成的串珠結構，其直徑為 10nm,又稱為 10 納米纖維。 膜結構體系的基本作用是為細胞提供保護。 22. 真細菌 (Bacteria, eubacteria) 除古細菌以外的所有細菌均稱為真細菌。 19. 剪接體 (splicesome) 進行 hnRNA 剪接時形成的多組分復合物 , 主要是有小分子的核 RNA和蛋白質(zhì)組成。 15. 模板組裝 (template assembly) 由模板指導 ,在一系列酶的催化下 ,合成新的、與模板完全相同的分子。支原體具有細胞膜，但沒有細胞壁。如 1943 年克勞德 (Claude)用高速離心法從細胞勻漿液中分離線粒體，然后研究它的化學組成和生理功能并得出結論 : 線粒體是細胞氧化中心。 6. 細胞學說 (cell theory) 細胞學說是 1838～ 1839 年間由德國的植物學家施萊登和動物學家施旺所提出 ,直到 1858 年才較完善。 2. 細胞質(zhì) (cell plasma) 是細胞內(nèi)除核以外的原生質(zhì) , 即細胞中細胞核以外和細胞膜以內(nèi)的原生質(zhì)部分 , 包括透明的粘液狀的胞質(zhì)溶膠及懸浮于其中的細 胞器。 3. 原生質(zhì) (protoplasm) 生活細胞中所有的生活物質(zhì) , 包括細胞核和細胞質(zhì)。它是關于生物有機體組成的學說，主要內(nèi)容有： ① 細胞是有機體， 一切動植物都是由單細胞發(fā)育而來， 即生物是由細胞和細胞的產(chǎn)物所組成； ② 所有細胞在結構和組成上基本相似； ③ 新細胞是由已存在的細胞分裂而來； ④ 生物的疾病是因為其細胞機能失常。 1924 年 Feulgen 發(fā)明的DNA 的特殊染色方法 Feulgen 反應開創(chuàng)了 DNA的定性和定量分析。它有一環(huán)狀雙螺旋 DNA，沒有類似細菌的核區(qū) (擬核 ), 能指導合成700 多種蛋白質(zhì)。這是細胞內(nèi)一種極其重要的組裝方式 , DNA和 RNA的分子組裝就屬于此類。 20 原核細胞 (prokaryotic cell) 組成原核生物的細胞。最初用于表示“真”細菌的名詞主要是為了與其他細菌相區(qū)別。質(zhì)膜將整個細 胞的生命活動保護起來，并進行選擇性的物質(zhì)交換；核膜將遺傳物質(zhì)保護起來，使細胞核的活動更加有效；線粒體和葉綠體的膜將細胞的能量發(fā)生同其它的生化反應隔離開來，更好地進行能量轉(zhuǎn)換。核糖體是由 RNA和蛋白質(zhì)構成的顆粒結構，直徑為 15～ 25nm，由大小兩個亞基組成，它是細胞內(nèi)合成蛋白質(zhì)的場所。 研究細胞之間的識別、粘連、通訊以及由此產(chǎn)生的相互作用、作用本質(zhì)、以及對形態(tài)發(fā)生的影響等。第二種是誘發(fā)熒光，即物體經(jīng)熒光染料染色后再通過紫外線照射發(fā)出熒光， 稱為誘發(fā)熒光。②將大約一半的波長從相位中除去，使之不能發(fā)生相互作用，從而引起強度的變化。象 SEM 一樣， STEM 用電子束在樣品的表面掃描，但又象 TEM，通過電子穿透樣品成像。負染色是只染背景而不染樣品，與光學顯微鏡樣品的染色正好相反。然后將冷凍的樣品迅速轉(zhuǎn)移到冷凍裝置中，并迅速抽成真空。當針尖沿 X 和 Y 方向在樣品表面掃描時，就會在針尖和樣品表面第一層電子之間產(chǎn)生電子隧道。 ④ 掃描隧道顯微鏡的掃描速度快，獲取數(shù)據(jù) 的時間短，成像也快，有可能開展生命過程的動力學研究。根據(jù)標記方法的不同， 分為免疫鐵蛋白技術、免疫酶標技術和免疫膠體金技術。它以物質(zhì)分子的光吸收、熒光發(fā)射和光反射特性作為測 定基礎， 可用來分析生物樣品細微結構中的化學成分，同時進行定位、定性和定量。核磁共振時， 原子核吸收電磁波的能量， 記錄下的吸收曲線就是核磁共振譜 (NMRspectrum)。但實際上，通常把第一代至第十代以內(nèi)的培養(yǎng)細胞統(tǒng)稱為原代細胞培養(yǎng)。 24. 細胞融合 (cell fusion) 在 自發(fā)或人工誘導下，兩個不同基因型的細胞或原生質(zhì)體融合形成一個雜種細胞。它是將產(chǎn)生抗體的單個 B 淋巴細胞同腫瘤細胞雜交， 獲得既能產(chǎn)生抗體， 又能無限增殖將雜種細胞，并以此生產(chǎn)抗體的技術。收 集沉淀，改用較高的離心速度離心懸浮液，將較小的顆粒沉降，以此類推，達到分離不同大小顆粒的目 的。在這種梯度離心中，顆粒的密度是影響最終位置的惟一因素，因此用這種方法分離顆粒，主要是根 據(jù)被分離顆粒的密度差異。因為DNA 的密度是 ，會停留在離心管的中部。 32. 親和層析 (affinity chromatography) 將具有特殊結構的親和分子制成固相吸附劑放置在層析柱中，當要被分離的蛋白混合液通過層析柱時，與吸附劑具有親和能力的蛋白質(zhì)就會被吸附而滯留在層析柱中。 分 是指分離制備合格的待操作的 DNA，包括作為運載體的DNA和欲克隆的目的 DNA； 切 是指用序列特異的限制性內(nèi)切酶切開載體 DNA，或者切出目的基因； 連 是指用 DNA 連接酶將目的 DNA 同載體DNA連接起來，形成重組的 DNA分子； 轉(zhuǎn) 是指通過特殊的方法將重組的 DNA分子送入宿主細胞中進行復制和擴增； 選 則是從宿主群體中挑選出攜帶有重組 DNA分子的個體。 3. 細胞質(zhì)膜與跨膜運輸 1. 膜 (membrane) 通常是指分割兩個隔間的一層薄薄的結構 ,可以是自然形成的或是人造的 ,有時很柔軟。內(nèi)膜包括細胞核膜、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜、高爾基體膜等。血影蛋白屬紅細胞的膜下蛋白，這種蛋白是一種長的、可伸縮的纖維狀蛋白 ,長約 100 nm,由兩條相似的亞基∶β亞基 (相對分子質(zhì)量 220kDa)和α亞基(相對分子質(zhì)量 200kDa)構成。血型糖蛋白的基本功能可能是在它的唾液酸中含有大量負電荷 ,防止了紅細胞在循環(huán)過程中經(jīng)過狹小血管時相互聚集沉積在血管中。 11. 帶 蛋白 (band protein) 是由兩個亞基組