【正文】 2．操作方法 麻醉、切口、暴露前列腺，在大鼠精囊內(nèi)注射 1． 4x107個／ml大腸桿菌生理鹽水混懸液 1ml， 2— 3日后形成細(xì)菌性前列腺炎的模型。 2，操作方法 麻醉動物、切口、暴露前列腺，在前列腺頭葉上的精液囊注入 1％角叉菜膠生理鹽水溶液，術(shù)后縫合，術(shù)后 24h可形成非細(xì)菌性前列腺炎的模型。對實(shí)驗(yàn)性細(xì)菌性前列腺炎模型還叮作細(xì)菌培養(yǎng)，檢查其菌數(shù)。而非細(xì)菌性炎癥。 2．操作方法 取體重 250— 300g， 7— 10周齡雄性大鼠在戊巴比妥鈉60mg/kg(體重 )腹腔注射麻醉下剖開腹部，仔細(xì)分離前列腺，用針尖或有鋒利尖端的小鑷向前列腺內(nèi)植入 16日胎鼠的尿生殖竇組織，對照組進(jìn)行同樣手術(shù)操作，但僅用針頭探刺兩次作為假手術(shù)，然后縫合腹壁。 4．注意點(diǎn) 選用小鼠盡可能體重相近，鼠齡相同，雄性激素水平無顯著差異。 (二 )其他試驗(yàn) 1．抗炎試驗(yàn) 前列腺肥大者常見炎細(xì)胞浸潤，具有局部抗炎作用的藥物也利于本癥癥狀的改善，通過制造一般的炎癥模型來評價其抗炎藥效即可。 (2)前列腺的形態(tài)學(xué)觀察：鏡檢可見腺上皮和平滑肌前列腺細(xì)胞肥大者呈高柱狀，胞核也增大。西醫(yī)藥物治療 — 般用雌激素、睪酮還原酶抑制劑或受體阻滯劑等處理。 2．操作方法 本模型為同種免疫復(fù)合物型腎炎模型。吸取上清液。與待測藥物一樣，給藥劑量以臨床成人給藥劑量來計(jì)算。②治標(biāo)作用。 14 日后二期手術(shù)，依法麻醉，摘除左腎。將預(yù)先浸入液氮瓶內(nèi)的冷刀依次在腎臟的上下極和外側(cè)前后共 4個位，每處冷凍 40s，然后復(fù)位腎臟，分層縫合。 藥物的療效觀察基本同腺嘌呤。 4．注意點(diǎn) (1)為了減少差異，最好用雄性動物。 2．制作方法 用含 0． 75％腺嘌吟 (adenine)飼料喂養(yǎng)大鼠，每日投放量約350mg／ kg(體重 )。凡是公認(rèn)為 CRF毒素物質(zhì)應(yīng)當(dāng)是反應(yīng)新藥療效最主要的指標(biāo)，目前臨床和評價藥效多用的觀察指標(biāo)是肌酐、尿素氮。 (2)大鼠 5／ 6腎切除的 CRF模型：經(jīng)兩期外科手術(shù)切除大鼠 5／ 6腎造成的CRF。 (2)BUN、 Scr，血清總白和白蛋白，血清 K和 Na。 3．注意點(diǎn) (1)HgCl2溶液必須是新鮮配制。受累細(xì)胞由于汞 — 硫反應(yīng)而損害細(xì)胞及其膜的功能與結(jié)構(gòu)，細(xì)胞呼吸功能喪失，變性壞死，并部分脫落于管腔中阻塞腎小管，使原尿通過受阻。所試藥物的藥效可根據(jù)以上指標(biāo)的改善來坪價，結(jié)果進(jìn)行檢驗(yàn)作組間比較。 2．操作方法 取 10— 20kg雄性家犬，以戊巴比妥鈉 30mg／ kg，靜脈注射麻醉后，于術(shù)分離 — 側(cè)輸尿管，插入管收集尿液。 3．造模成功指標(biāo)和藥物療效觀察 (1)24h尿量較對照組明顯減少，尿蛋白明顯升高。 (三 )陽性對照藥 (1)地塞米松。本模型所用動物價廉易得，方法簡便，病變穩(wěn)定，在 — 定時間內(nèi)做動態(tài)觀察，也可用家兔，以便多次采血檢查。 (5)大鼠抗生素 ARF模型：大劑量抗生素 (慶大霉素 )給大鼠腹腔注射，通過影響腎小管上皮細(xì)胞膜脂代謝及抑制線粒休的能量代謝，造成腎小管損害，引起尿量改變及尿蛋白和尿素氮升高等急性癥狀。其臨床表現(xiàn)主要是小便點(diǎn)滴而下，或點(diǎn)滴全無，起病往往突然發(fā)作。 (2)犬去甲腎上腺素模型：雄性犬麻醉以適當(dāng)?shù)娜ゼ啄I上腺素經(jīng) — 側(cè)腎動脈連續(xù)滴注，引起腎流量急劇下降，同側(cè)輸尿管收集的尿量也相減少等一系列腎衰癥狀。 3，方法學(xué)評價 (1)ARF模型較多，從機(jī)制分為缺血性和中毒性。 (二 )相關(guān)藥效學(xué)試驗(yàn)和機(jī)制研究 1，輔助試驗(yàn) 對能反映解除主癥有作用的其他試驗(yàn)，如藥物的利尿作用、血管擴(kuò)張作用對高血鉀，酸中毒的控制作用，以及藥物對其他原因引起的氮質(zhì)肌癥的影響，均可酌情選用。紀(jì)錄正常飲水量從尿量，用藥前禁水 24h。 4．注意點(diǎn) (1)個別大鼠叫在肌注甘油后，腎臟損害過重而北亡。 3．藥物療效的評價指標(biāo) (1)尿量及尿常規(guī)檢查 (用藥前 1h及用藥 1h、 2h、 4h后 )。腎衰陰性對照組 (只手術(shù)，不夾閉腎動脈 )用等量生理鹽水，每組動物至少 5只。以氯化汞 2． 5mg／ kg—次靜脈注射 (氯化汞可用生理鹽水或蒸餾水配成適當(dāng)濃度的溶液 )。此外， AG還作用于線粒體氧化磷酸化，造成腎小管損傷。綜上所述屬脾腎氣虛證并兼有濕濁或瘀血，故以“健脾益腎，通腑降濁、活血化瘀”法治療。 以上模型的具體建立方法將在后面敘述，試驗(yàn)治療的給藥途徑應(yīng)與臨床一致。 2，尿毒清顆粒刑 適用降低毒素、改善腎功能為主要功效，用于慢性腎功能衰竭、氮質(zhì)血癥和尿毒癥早期的新藥。 (2)生化及血液檢查。術(shù)后 7—10日行第二次手術(shù)，同樣方法麻醉，右側(cè)背部切開暴露右腎，結(jié)扎腎蒂，摘除右腎。 (5)應(yīng)設(shè)假手術(shù)組代替正常動物對照組。 (四 )小鼠電凝摘除腎臟 CRF模型 1 原理 燒灼小鼠右腎表面 2星期后左腎摘除，燒灼腎皮質(zhì)壞死，腎小球、腎小管大量破壞，殘余腎單位的功能代償性增強(qiáng)，形成以腎小球硬化，腎間質(zhì)組織纖維化為主要特點(diǎn)的模型。其臨床表現(xiàn)為水腫、高血壓、蛋白尿、血尿及腎功能損傷等。②血肌酐及血尿素氮。給綿羊皮下或肌內(nèi)分 5處汁射。新藥組分三個劑量組，陽性對照組可用地塞米松 ，每日 1次；或環(huán)磷酰胺 6mg/kg，每日 1次；陰性對照組用等量生理鹽水，正常組不注射抗腎血清，僅用等量的生理鹽水。實(shí)驗(yàn)可延長 14星期，每星期測 13次， 4．注意點(diǎn) Heymann腎炎常需 l4星期或更長，生化指標(biāo)的測量應(yīng)進(jìn)行多次，并和造模前后、給藥前后作比較。 (3)尿生殖竇植入法模型：向前列腺內(nèi)植入胎鼠的尿生殖竇組織而形成前列腺增生。 (5)前列腺組織的多巴胺含量：因?yàn)槎喟桶分饕獊碜郧傲邢?，測定前列腺組織中的多巴胺可作為探索藥物作用機(jī)制和手段。 三、動物模型建立方法 (