免疫組織化學(xué)技術(shù)研討-免費(fèi)閱讀
【正文】 三月 21三月 2121:39:2221:39:22March 28, 20231意志 堅(jiān) 強(qiáng) 的人能把世界放在手中像泥 塊 一 樣 任意揉捏。 三月 219:39 下午 三月 2121:39March 28, 20231少年十五二十 時(shí) ，步行 奪 得胡 馬騎 。 2023/3/28 21:39:2221:39:2228 March 20231做前，能 夠環(huán)視 四周；做 時(shí) ，你只能或者最好沿著以腳 為 起點(diǎn)的射 線 向前。靜夜四無 鄰 ，荒居舊 業(yè)貧 。三、出現(xiàn)假陰性的原因 固定時(shí)間過長，浸蠟、烤片溫度過高，導(dǎo)致抗原丟失，無法補(bǔ)救。⑥ PBS洗 3次， 2分鐘 /次。⑤ 滴上配制好或商品化的胃蛋白酶，處理切片 20分鐘左右。② %H2O2甲醇處理切片 10分鐘。⑤ 待修復(fù)液恢復(fù)至室溫后， PBS洗 3次，隨后按選好的免疫組織化學(xué)染色方法進(jìn)行染色。③ 自來水洗，蒸餾水洗。免疫組織化學(xué)方法熒光標(biāo)記免疫組織化學(xué)酶聯(lián)免疫組織化學(xué)熒光標(biāo)記免疫組織化學(xué) 直接法 間接法酶聯(lián)免疫組織化學(xué)? ABC法? S P法免疫組化二步法 二步法 免疫 組化染色步驟n 二甲苯脫蠟，梯度酒精置換二甲苯n PBS沖洗 3次，每次 3分鐘n 根據(jù)每一種抗體的要求，對組織抗原進(jìn)行相應(yīng)的修復(fù) n %過氧化氫甲醇液阻斷 20分鐘，以消除內(nèi)源性過氧化物酶的活性n PBS沖洗、浸泡 5分鐘， 3次n 正常山羊血清室溫封閉 10分鐘n 甩去血清，加入適當(dāng)稀釋的一抗， 37℃ 孵育 60分鐘或4℃ 過夜n PBS沖洗，浸泡 5分鐘， 3次n 滴加多聚螯合物， 37℃ 孵育 30分鐘n PBS沖洗，浸泡 5分鐘， 3次n 新鮮配置酶底物顯色液 DAB顯色 3－ 10分鐘n 流水沖洗n 蘇木素復(fù)染，脫水，透明，封片。 (2)冰凍切片后需涼干后立即固定 (3)冰凍切片固定后 80℃ 保存?zhèn)溆眉?xì)胞爬片制作n 將處理好的蓋玻片放入接種了細(xì)胞的培養(yǎng)瓶或六孔板內(nèi)。n 小組織： 75％乙醇 30min， 85％乙醇 30min， 95％乙醇 Ⅰ1h 、 Ⅱ1h 、 Ⅲ 過夜或 2h，無水乙醇 Ⅰ 、 Ⅱ和 Ⅲ 各 30min，二甲苯 Ⅰ15min 、 Ⅱ10min 、 Ⅲ10min（肉眼觀察），石蠟 Ⅰ30min ，石蠟 Ⅱ30min ，石蠟Ⅲ1 ～ 2h。 （ 5） 防止細(xì)胞過度收縮或膨脹而失去其原有形態(tài)結(jié)構(gòu)。 免疫組織化學(xué)技術(shù)免疫組織化學(xué)免疫組織化學(xué) 技術(shù)技術(shù)n 基本原理基本原理 通過免疫學(xué)中抗原抗體結(jié)合反應(yīng)，用特異性抗體（通過免疫學(xué)中抗原抗體結(jié)合反應(yīng)，用特異性抗體（單克隆或多克?。z測組織、細(xì)胞內(nèi)相應(yīng)的抗原物質(zhì)，形單克隆或多克隆）檢測組織、細(xì)胞內(nèi)相應(yīng)的抗原物質(zhì)，形成
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