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實(shí)驗(yàn)動(dòng)物遺傳學(xué)及質(zhì)量控制-免費(fèi)閱讀

  

【正文】 3. 了解各品種品系的動(dòng)物的命名方法(包括亞系和支系)。 近交系 封閉群 (遠(yuǎn)交群 ) 雜交群 3. 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的繁殖方法: 由于近交系與封閉群動(dòng)物具有不同的遺傳特點(diǎn),因此應(yīng)分別選擇相應(yīng)的繁殖方法 封閉群動(dòng)物的繁殖方法 4. 近交系動(dòng)物的遺傳質(zhì)量監(jiān)測(cè) 近交系動(dòng)物的遺傳質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) 近交系小鼠、大鼠遺傳檢測(cè)方法及實(shí)施:生化標(biāo)記基因檢測(cè)、皮膚移植法 毛色基因測(cè)試、免疫標(biāo)記基因檢測(cè)、下領(lǐng)骨測(cè)量法、染色體標(biāo)記檢測(cè)、 DNA多態(tài)性檢測(cè)法等 檢測(cè)時(shí)間間隔:近交 系 動(dòng) 物生產(chǎn)群每年至少進(jìn)行一次遺傳質(zhì)量檢測(cè)。由于基因組中存在著上千個(gè)小衛(wèi)星座位,某些座位的重復(fù)單位含相同或相似的核心序列,所以在一定的條件下,一個(gè)小衛(wèi)星探針可以同時(shí)與多個(gè)小衛(wèi)星座位上的等位基因雜交,形成高度變異性和多態(tài)性。 分析得到的電泳譜圖,確定各待測(cè)位點(diǎn)的基因型,然后把這些基因型與各品系的標(biāo)準(zhǔn)遺傳概貌進(jìn)行對(duì)比,列出相同與不同的基因位點(diǎn),從而判斷被檢測(cè)品系的基因純合程度。遺傳污染通常引起急性排斥。小鼠 H2位點(diǎn)是強(qiáng)抗原,引起對(duì)同種移植物產(chǎn)生強(qiáng)的排斥反應(yīng),使移植的皮膚約 11天內(nèi)被破壞。 177。 177。 177。 177。 177。 177。現(xiàn)簡(jiǎn)介英國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心 Festing的下頜骨分析法,取同日齡或 20177。 常用的檢測(cè)特征 形態(tài)學(xué)特征:毛色基因檢測(cè)法,下頜骨形態(tài)法 免疫學(xué)特征:皮膚移植法,混合淋巴細(xì)胞培養(yǎng)法 酶和蛋白質(zhì):生化標(biāo)記法 分子生物學(xué):限制性酶切片斷多態(tài)性, DNA指紋圖,小衛(wèi)星DNA標(biāo)記,微衛(wèi)星 DNA標(biāo)記 原理: 小鼠的毛色等位基因 A、 B、 C、 D分別位于第 9條染色體上。 遺傳突變,來(lái)自 DNA序列的變化,這種變化可能是某核苷酸堿基的置換、缺失或插入。 ②母性因素,前者來(lái)自 C57BL/6,后者來(lái)自 DBA/2,包括細(xì)胞質(zhì)成分,子宮環(huán)境和母乳。 與近交系相比具有雜交優(yōu)勢(shì): 近交系動(dòng)物的生活力、對(duì)疾病的抵抗力、對(duì)實(shí)驗(yàn)的耐受性都較差,而且較難繁殖和飼養(yǎng),反之, F1代具有較強(qiáng)的生命力,對(duì)疾病的抵抗力強(qiáng),壽命較長(zhǎng),容易飼養(yǎng)??赡苁羌兒突蛞部赡苁请s合基因。 近交系數(shù)增量: ?F= 1/2N N:群體個(gè)數(shù), N應(yīng)在 50以上。 :種群名稱。在飼養(yǎng)繁殖過程中無(wú)需詳細(xì)記錄譜系,成本低,易繁殖,可大量生產(chǎn),充足供應(yīng)。在生物的進(jìn)化歷史中,單個(gè)生物個(gè)體的存在與否是無(wú)意義的,生物只有以群體的方式生存,這個(gè)物種才能存在與發(fā)展。 對(duì)復(fù)雜的多基因性狀進(jìn)行遺傳分析。 同源導(dǎo)入近交系命名: 命名是在背景品系的全名或縮寫符號(hào)后,加某些符號(hào) . 一個(gè)圓點(diǎn) 和一個(gè)供體品系符號(hào)的縮寫 , 然后加連字符與目的基因符號(hào) 。有近交突變系,也有遠(yuǎn)交突變種。為重組近交系提供親代的兩個(gè)近交系稱為祖系。對(duì)于設(shè)計(jì)新的實(shí)驗(yàn)和解釋所得結(jié)果提供了便利條件。 遺傳變異或基因突變的機(jī)率極低 , 并及時(shí)清楚遺傳變異的動(dòng)物 。當(dāng)去除或植入的病毒十分明確時(shí) , 用下面方法表示 。這些處理在某些實(shí)驗(yàn)中會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果,因此有必要對(duì)同一品系或亞系進(jìn)行區(qū)分,這些經(jīng)過處理的動(dòng)物可視為這些近交系或亞系的支系。 已發(fā)現(xiàn)有遺傳差異的品系產(chǎn)生,這種差異的原因可能是殘留雜合、突變或遺傳污染( geic contamination) (即一個(gè)近交系與非本品系動(dòng)物之間雜交引起遺傳改變 )。 ( 2)有些命名可在大寫字母中間加一些阿拉伯?dāng)?shù)字,如: C3H, C57BL等。 : 在近親繁殖的實(shí)踐中,通常伴隨著遺傳缺陷的出現(xiàn),生命早亡較多,動(dòng)物體質(zhì)普遍較差,并且較為容易感染疾病,生產(chǎn)能力和隱性基因暴露增多,這個(gè)現(xiàn)象叫 “近交衰退” 。理論上,隨著同胞交配或親子交配世代數(shù)的增加,近交系數(shù)上升,到 20代時(shí),近交系數(shù)可達(dá) %,雜合基因僅剩 %。 封閉群 ICR品種繁殖能力強(qiáng) 。 ? 目前 , 世界各地培育著 200多種共計(jì) 26000多個(gè) 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物品系 , 其中 2607個(gè) 為常規(guī)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物品系 。 一般用于填封閉群 , 如新西蘭白兔 、 Wistar大鼠 、 KM小鼠等 。 目前,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物已 培育 出眾多不同品種和品系的動(dòng)物,如近交系、突變系、封閉群等等。 為什么實(shí)驗(yàn)動(dòng)物要遺傳學(xué)及質(zhì)量監(jiān)控 ? 20世紀(jì) 50年代 , 羅歇爾 (Russel) 和布魯克 (Bruch): 發(fā)育環(huán)境 周圍環(huán)境 ┌────┐ ↓ ┌────┐ ↓ ┌────┐ │ 基因型 │ ─── ∣ 表現(xiàn)型 │ ─── ∣ 演出型 │ └────┘ └────┘ └────┘ 動(dòng)物的基因型、表現(xiàn)型、演出型與環(huán)境之間的關(guān)系模式 實(shí)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物標(biāo)準(zhǔn)化 應(yīng)從控制實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的遺傳、 微生物和寄生蟲、營(yíng)養(yǎng)、環(huán)境等四方面著手。 ?品系 (strain)在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)上把 基因高度純合 的動(dòng)物稱作品系動(dòng)物,通常指近交系和突變系。 ? 我國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 ( 包括實(shí)驗(yàn)用動(dòng)物 ) 30種共計(jì) 1100多個(gè) 品種 、 品系 , 其中常規(guī)品系 103個(gè) 。 作為一個(gè)品系 , 不僅要有相似的外貌特征 , 獨(dú)特的生物學(xué)特性 , 更重要的是要有穩(wěn)定的遺傳性能 , 即在品系 、 品種自群繁殖時(shí) , 能將其特性穩(wěn)定地傳給后代 。 血緣系數(shù) coefficient of relationship 群體中個(gè)體之間的基因組成的相似程度用數(shù)值來(lái)表示。 這種有害影響是由于若干對(duì)不利的隱性基因純合造成的,如不能產(chǎn)生正常生活所需要的酶,或者產(chǎn)生不正常的蛋白質(zhì)和其它化合物,或激素的不平衡。 ( 3)近交系的代數(shù)用大寫的英文字母 F表示,例如:當(dāng)一個(gè)近交系的代數(shù)為 87代時(shí),寫成( F87)。 亞系的命名 在原品系的名稱后加 一道斜線后 表明亞系的符號(hào)。 1. 經(jīng)人為技術(shù)處置形成的支系 , 應(yīng)在原品系名稱后附加一個(gè)小寫英文字母標(biāo)明處理方式 。 在品系名稱后 加一橫線 , 以大寫英文字母標(biāo)明病毒的名稱 , 最后加上一個(gè)“ +” 或 “ ” 的符號(hào)分別表示植入或去除 。 如 DBA小鼠已維持近 100年 。 三.近交系動(dòng)物的分類和應(yīng)用 ? 普通近交系 ? 重組近交系 ? 同源近交系: ? 同源突變近交系 ? 同源導(dǎo)入近交系 ? 分離近交系 : 普通近交系動(dòng)物是通過至少(或相當(dāng)) 20代以上兄妹或親子交配之后培育成。該品系動(dòng)物既具有其雙親品系的特性 。 ( 2)同源突變近交系 兩個(gè)近交系除了 一個(gè)指明位點(diǎn)等位基因不同 外,其它遺傳基因全部相同的品系。 如: B10?129H2b, 表示以 C57BL/10sn(=B10)為遺傳背景的品系 , 導(dǎo)入 129品系上的等位基因 H2b。 動(dòng)物的交配方式: 近交、雜交、遠(yuǎn)緣交配、隨機(jī)交配 近交系保種: 育成的近交系嚴(yán)格按全同胞方式進(jìn)行交配。 基因頻率和基因型頻率 基因頻率( gene frequency) 就是在一個(gè)群體中某一種基因的數(shù)量與占據(jù)同一基因座的全部等位基因總數(shù)的比例,取值范圍在 0到 1之間,通常寫成小數(shù)的形式 。廣泛應(yīng)用于一般實(shí)驗(yàn)及學(xué)生的教學(xué)實(shí)驗(yàn)。種群保持者名稱為 1~4個(gè)英文字母的縮寫,首字母大寫,其余小寫。 國(guó)際實(shí)驗(yàn)動(dòng)物委員會(huì)規(guī)定封閉群每代近交系數(shù)增加量不得超過 1%,由 ?F= 1/2N得到每代動(dòng)物數(shù)量不能少于 25對(duì)。 雜交 F1代動(dòng)物雖然基因型是雜合的,但個(gè)體間的遺傳型與表現(xiàn)型都是一致的,符合實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有明確遺傳背景的基本要求,在實(shí)驗(yàn)研究中應(yīng)用時(shí)能獲得一致的、可重復(fù)的、正確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。在某些方面比近交系更適用于科學(xué)研究。 三、雜交 F1代動(dòng)物的命名 雜交組合的選擇: 根據(jù)研究需要和各個(gè)品系的特性選擇雜交組合,例如( C57BL/6XC3H) F1為乳癌低發(fā)小鼠;而( C3HXC57BL/6)F1為乳癌高發(fā)小鼠。 各種品系分布到各地長(zhǎng)期隔離,造成品系特性發(fā)生很大變異。 A、B、 C、 D基因?qū)ζ湎鄳?yīng)的 a、 b、 c、 d等位基因是顯性;而 C基因又是其它色素基因的上位基因,當(dāng) cc隱性基因存在時(shí),細(xì)胞內(nèi)缺乏酪氨酸酶而不能合成色素,因此不論其它控制色素生成的基因是什么,小鼠均表現(xiàn)為白化。 1g小鼠的頭骨,將其煮沸 3分鐘以上,再用胰酶 37℃ 消化 24小時(shí)后用清水洗凈,取下頜骨置于 L形直角坐標(biāo)板上測(cè)量 11個(gè)位點(diǎn)(圖 314), 16為高度測(cè)量點(diǎn), 711為長(zhǎng)度測(cè)量點(diǎn),將各測(cè)量點(diǎn)的值記入表中,并列四個(gè)判別函數(shù)。 x 2( mm) 177。 x 4( mm) 177。 x 6( mm) 177。**
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