【正文】 本研究中采用SCAR標(biāo)記技術(shù)獲得了對西花薊馬具有特異擴(kuò)增效果的引物1對，該對引物不僅特異性強(qiáng)、靈敏度高，而且還可以明確來源于疫區(qū)但不具有被害癥狀的寄主植物組織中是否攜帶西花薊馬的卵。此外，該技術(shù)靈敏度高，不僅可以檢測西花薊馬的單頭成蟲、幼蟲、預(yù)蛹及蛹，還可檢測單粒卵；當(dāng)以梯度稀釋的單頭雌性成蟲的DNA為模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增時，其最低檢出閾值為1/160頭。 6: 黃瓜花瓣Flowers of cucumber。 7: 雄性成蟲Male adult. B: 不同模板稀釋倍數(shù)Different dilutions. M: DNA分子量標(biāo)準(zhǔn)DNA ladder maker。表明，該對引物靈敏性較高，其最低檢出閾值為1/160頭成蟲。測序結(jié)果表明該片段長 569 bp，GenBank登錄號為GU045557，為基因組DNA中的隨機(jī)克隆片段。 6: 黃胸薊馬T. hawaiiensis (Morgan)。其中冬瓜的檢測部位為葉片，其余均為處于開花盛期的鮮花花瓣。C℃ 預(yù)變性 2 min；35個循環(huán)：94176。C℃ 1 min、72 176。每管加入 20 μL 超純水，充分溶解后于 30 176。表 1 用于SCAR引物種特異性檢驗(yàn)的薊馬種類Table 1 Thrips species used for species specific test of SCAR primer編號No.種類Species寄主Host plant采集地點(diǎn)Collection locality采集時間Collecting date薊馬科Thripidae2花薊馬Frankliniella intonsa (Trybom)月季Chinese rose北京昌平Changping, Beijing3禾花薊馬F. tenuicornis (Uzel)豌豆花Pea甘肅酒泉Jiuquan, Gansu4八節(jié)黃薊馬Thrips flavidulus (Bagnall)月季Chinese rose北京昌平Changping, Beijing5黃胸薊馬T. hawaiiensis (Morgan)非洲菊Gerbera北京海淀Haidian, Beijing6煙薊馬（蔥薊馬）T. tabaci Lindeman萬壽菊Marigold北京海淀Haidian, Beijing7色薊馬T. coloratus Schmutz雜草HC3 wWeed HC3新疆伊犁Yili, Xinjiang.8蔥韭薊馬T. alliorum (Priesner)蔥Scallion北京密云Miyun, Beijing9黃薊馬T. flavus Schrank苦瓜Bitter gourd廣西南寧Nanning, Guangxi10杜鵑薊馬T. andrewsi (Bagnall)茶花Camellia湖南長沙Changsha, Hunan11棕櫚薊馬T. palmi Karny芒果Mmango廣西南寧Nanning, Guangxi12普通薊馬T. vulgatissimus Haliday小葉女貞Ligustrum quihoui福建福州Fuzhou, Fujian13喜馬拉雅薊馬T. himalayanus (Pelikan)雜草wWeed西藏扎囊縣Zhanang, Tibet14帶薊馬屬Taeniothrips sp. Amyot et Serville蜘蛛蘭Spider orchid廣東廣州Guangzhou, Guangdong15菊花薊馬Microcephalothrips abdominalis (Crawford)非洲菊Gerbera北京海淀Haidian, Beijing18塔六點(diǎn)薊馬Scolothrips takahashii Priesner桃樹Peach北京海淀Haidian, Beijing19普通大薊馬Megalurothrips usitatus (Bagnall)絲瓜Loofah湖南長沙Changsha, Hunan20絲大薊馬Meg. sjostadti Trybom空心菜Water spinach湖北武漢Wuhan, Hubei21端大薊馬Meg. distalis (Karny)蔥Scallion湖南長沙Changsha, Hunan22蘇丹呆薊馬Anaphothrips sudunensis Trybom蔥Scallion福建福州Fuzhou, Fujian23芒缺翅薊馬Aptinothrips stylifer Trybom雜草YL1 wWeed YL1新疆伊犁Yili, Xinjiang24茶黃硬薊馬Scirtothrips dorsalis Hood女貞Wigustrum 北京海淀Haidian, Beijing25袖指薊馬Chirothrips manicatus (Haliday)鐵菠蘿花Iron pineapple flower湖北武漢Wuhan, Hubei26齒裂絹薊馬Hydatothrips dentatus (Steinweden et Moulton)大豆Soybean湖北荊州Jingzhou, Hubei27偽棍薊馬屬Pseudodendrothrips sp. Schmutz灰綠藻Gray green algae河北承德Chengde, Hebei28陽針?biāo)E馬屬Heliothrips sp. Haliday甘薯Sweet potato湖南長沙Changsha, Hunan29紅帶滑胸針?biāo)E馬Selenothrips rubrocinctus (Giard)紅槭木Red maple湖南長沙Changsha, Hunan紋薊馬科Aeolothripidae30橫紋薊馬Aeolothrips fasciatus (Linnaeus)玉米Corn北京密云Miyun, Beijing31新疆紋薊馬Aeo. xinjiangensis Han三葉草Clover新疆烏魯木齊Urumqi, Xinjiang34間紋薊馬 Aeo. intermedius Bagnall茼蒿菊Shrubby Argyranthemum甘肅酒泉Jiuquan, Gansu35西藏紋薊馬 Aeo. xizangensis Han雜草Wweeds西藏扎囊縣Zhanang, Tibet36白腰紋薊馬Aeo. albicinctus Haliday小白菊花Chrysanthemum甘肅酒泉Jiuquan, Gansu37基白黑薊馬Melanthrips pallidior Priesner蠶豆Horsebean重慶北碚Beibei, Chongqing管薊馬科Phlaeothripidae38稻簡管薊馬Haplothrips aculeatus (Fabricius)芥藍(lán)Cabbage mustard北京順義Shunyi, Beijing39華簡管薊馬H. chinensis Priesner長鬃蓼Korean persicary湖北武漢Wuhan, Hubei40含羞簡管薊馬H. leucanthemi (Schrank)長鬃蓼Korean persicary湖北武漢Wuhan, Hubei41菊簡管薊馬H. gowdeyi (Franklin)菊花Chrysanthemum甘肅酒泉Jiuquan, Gansu42簡管薊馬屬Haplothrips sp. Amyot et Serville玉米Corn北京密云Miyun, Beijing43榕母管薊馬Gynaikothrips ficorum (Marchal)榕樹Banyan廣西南寧Nanning, Guangxi44榕端寬管薊馬Mesothrips jordani Zimmermann榕樹Banyan福建福州Fuzhou, Fujian45棒管薊馬屬Bactrothrips sp. Karny油菜Rape甘肅酒泉Jiuquan, Gansu46眼管薊馬屬Ophthalmothrips sp. Hood黃槐花Yellow necklacepod重慶云陽Yunyang, Chongqing11 / 11 基因組DNA的提取薊馬類昆蟲基因組DNA的提取參照周志湘等(2007)的方法并稍加改進(jìn)。特征序列擴(kuò)增區(qū)域(sequence characterized amplified regions, SCAR)標(biāo)記技術(shù)是通過隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA (random amplified polymorphic DNA, RAPD)技術(shù)篩選出靶標(biāo)種特異片段，然后將目標(biāo) RAPD 片段進(jìn)行克隆和測序，并根據(jù)此目標(biāo)片段兩端的堿基序列設(shè)計特異性引物；然后以該對特異性引物對基因組 DNA 片段再次進(jìn)行PCR擴(kuò)增，進(jìn)而將與原RAPD片段相對應(yīng)的單一位點(diǎn)鑒別出來；SCAR標(biāo)記為共顯性遺傳，待檢 DNA 間的差異可直接通過有無擴(kuò)增產(chǎn)物來顯示(黎裕等, 1999)。 Wijkamp and Peters, 1993)、煙草條紋病毒(tomato chlorotic spot virus, TCSV) (Wijkamp et al., 1995) 和番茄斑萎病毒(tomato spotted wilt virus, TSWV) (Gardener et al., 1935)等，使病毒病大流行，造成植物嚴(yán)重減產(chǎn)甚至絕收(Jones, 2005)。 detectable threshold limit value西花薊馬Frankliniella occidentalis (Pergande)是纓翅目(Thysanoptera)薊馬科(Thripidae)花薊馬屬的一種重要害蟲，自20世紀(jì)40年代即對美國西部的花卉產(chǎn)業(yè)造成巨大的危害(Bailey, 1940)，近30年來，隨著國際貿(mào)易活動的日益頻繁，西花薊馬迅速傳播擴(kuò)散，已成為世界性入侵害蟲(Kirk and Terry, 2003)。本檢測技術(shù)在口岸檢疫以及花卉、蔬菜和種苗調(diào)運(yùn)中的害蟲檢測和監(jiān)測中具有重要意義。種特異性檢測結(jié)果顯示，該對引物只對西花薊馬的基因組DNA具有擴(kuò)增能力，對同域發(fā)生的花薊馬F. in