【正文】 趙曉丹老師在論文的題目選擇、實驗方案設計、實驗進展、論文撰寫的過程中對我耐心的指導，傾注了大量的心血。(2)超聲波法提取榛蘑多糖試驗中，根據單因素實驗和正交試驗的結果，各因素對多糖得率影響程度大小為：料液比 提取時間 超聲功率 溫度。根據K值分析可得，最佳工藝條件為A3B2C2D2 ，%，酶解時間90min，酶解溫度50℃。因此本試驗選取酶解溫度為50℃，比較合適。所以開始時加入纖維素酶，多糖得率有顯著的提高，%后，可能由于纖維素酶過量，底物已被酶解完全，所以得率不再迅速升高，而是趨于一個穩(wěn)定的值。根據K值分析可得，最佳工藝條件為A2B3C2D2 ，即料液比為1:40，超聲時間為40min，超聲功率為300W，超聲溫度為60℃。圖35不同溫度下榛蘑多糖得率 試驗結果如圖33所示：隨著溫度的升高，多糖得率緩慢提高，在60℃時，得率達到最大，之后略微下降。圖33不同提取時間下榛蘑多糖得率 實驗結果如圖33所示：隨著超聲時間的增加，多糖得率不斷升高，在時間達到30min時，得率達到最大，之后略有下降趨勢?；貧w方程為：y = ，R2= x為葡萄糖質量濃度，μg/mL y為吸光值 傳統水提法提取榛蘑多糖，加入25mL蒸餾水， 在95℃下回流浸提5h，回流結束后收集濾液。（3）酶解溫度對榛蘑多糖得率的影響 ，%，酶解時間為90 min 條件下，分別設酶解溫度為450、560℃，再經超聲處理提取多糖，計算得率。（4）超聲溫度對榛蘑多糖提取率的影響 在超聲波功率250W，料液比1:40，超聲30min的條件下，分別設超聲溫度為50、60、70、80℃，提取多糖，計算得率。 ，定容至100 mL 后準確吸取200 μL 于10 mL 容量瓶中，補加蒸餾水至2 mL，加入5%苯酚1 mL，混合均勻后快速加入98%濃硫酸7 mL，搖勻后室溫放置30 min，以不含樣品的溶液作為空白，于490 nm測定吸光度，根據葡萄糖標準曲線的回歸方程可計算出相應的多糖質量濃度。榛蘑還有著重要的藥用價值，其多糖成分具有抗氧化、抗衰老、抗輻射、抗腫瘤、增強免疫力、降血糖等藥理作用，在食品行業(yè)中有著廣泛的應用前景，所以榛蘑多糖引起了許多人的關注，不少科研工作者開始研究榛蘑多糖的提取純化及各種理化性質。（5）節(jié)能環(huán)保。：（1）常溫萃取。其特點是產物純度高，質量好，特別適用于熱敏性原料，但提取率較溶劑萃取法低[23]。(6)其他作用 榛蘑多糖具有鎮(zhèn)靜作用，能明顯減少小鼠自發(fā)活動，并能使環(huán)己烯巴比妥鈉或戊巴比妥鈉引起的小鼠睡眠時間顯著延長。榛蘑多糖作為蜜環(huán)菌的主要成分之一亦被發(fā)現有此項作用，在研究培養(yǎng)藥用型真菌蜜環(huán)菌抗氧化作用活性時，發(fā)現蜜環(huán)菌勻漿提取物榛蘑多糖具有強大的清除自由基和抗脂質過氧化作用［15］。操玉平等［13］通過培養(yǎng)大鼠胰島素瘤細胞(INS－1) ，并以四氧嘧啶(AXN) 損傷細胞，培養(yǎng)液中加入不同濃度的AMP－1，檢測其對INS－l細胞葡萄糖刺激的胰島素和C 肽分泌量的影響，并檢測細胞存活率。采用免疫細胞化學法分析其對凋亡相關蛋白bcl－2表達的影響。另有報道AMP能在體外顯著增強小鼠腹腔巨噬細胞吞噬中性紅的作用[11]，并可誘導巨噬細胞產生NO且呈現一定的濃度相關性，在高濃度時，對巨噬細胞分泌IL－1有一定的促進分泌作用。經常食用可加強肌體免疫力，益智開心，延年輕身等作用，還可以防止皮膚干燥，預防某些心腦血管疾病和呼吸道及消化道疾病[4]。extraction technology.目 錄摘要Abstract1 緒論 1 1 1 1 1 2 3 3 4 4 4 4 5 52 材料和方法 6 試驗器材 6 試驗儀器 6 試驗材料 6 試驗方法 7 7 葡萄糖標準曲線的繪制 7 7 7—酶法聯合提取榛蘑多糖 8 93 結果與分析 10 10 10 11 11 13 14 14 14 16 17 18 184 結論 19參考文獻致謝超聲波酶法聯合提取榛蘑多糖工藝研究1 緒論 榛蘑為真菌植物門真菌蜜環(huán)菌的子實體?！? 文獻查閱，方案設計—— 準備實驗儀器，購買試驗材料—— 繪制葡萄糖標準曲線—— 傳統水提法提取榛蘑多糖—— 超聲波法提取榛蘑多糖條件優(yōu)化—— 超聲波—酶法聯合提取榛蘑多糖條件優(yōu)化—— 酶法提取榛蘑多糖—— 數據處理并撰寫、修改論文—— 準備答辯其中： 參考文獻篇數： 25篇以上（其中，外文文獻3篇以上） 論 文 字 數： 專業(yè)負責人意見簽名：年 月 日超聲波—酶法聯合提取榛蘑粗多糖工藝優(yōu)化摘 要 本試驗以榛蘑為原料，研究其多糖的提取工藝，通過傳統水提法、超聲波法、酶法、超聲波—酶聯合提取法四種方法對榛蘑多糖進行提取，根據單因素和正交試驗的結果，得到最佳的提取工藝條件。（3）采用傳統水提法，原料經浸提、過濾、濃縮、醇沉、抽濾等操作后，測定吸光值，計算多糖得率。榛蘑還有著重要的藥用價值，其多糖成分是一種能夠控制細胞的分裂分化和調節(jié)細胞生長衰老的活性多糖，具有抗氧化、抗輻射、促進造血、抗腫瘤、增強免疫力等藥理作用。分別對加酶率、酶解時間、酶解溫度、pH為因素，進行單因素試驗。 polysaccharides。 榛蘑中富含大量多糖，除多糖外，榛蘑中蛋白質含量達44%，含有18種氨基酸及鉀、鈣、鎂、鐵、鋅等礦物質元素，維生素BB2和維生素C含量也較高[3]。王惠國等[8]研究表明，給小鼠腹腔注射AMP具有增加小鼠吞噬細胞的吞噬功能，促進脾臟T 淋巴細胞的增殖能力，提高小鼠血清溶血素水平的作用。、肝癌細胞SMMC－7721的形態(tài)學變化。(3)榛蘑多糖的降糖作用 研究發(fā)現榛蘑多糖(AMP－1) 能使正常小鼠的糖耐量增強。而榛蘑多糖可在較短時間內大量獲得，多糖含量高，便于對榛蘑多糖關于血糖影響的研究。(5)榛蘑多糖的抗突變作用 張穎等人在研究榛蘑多糖對低能離子束誘變作用的恢復效應時，發(fā)現從蜜環(huán)菌Am99－1菌株人工發(fā)酵菌體內分離出來的榛蘑多糖Aml，誘變源為低能N+離子束，受試動物為黑腹果蠅，并檢測Aml對離子束誘變果蠅的恢復功能。水提取多糖的多數是中性多糖［23］。超聲提取法的機理是分成熱機理、力學機制，超生汽蝕機理。由于超聲波產生的強烈的空化作用，大大增加了萃取劑與物料的接觸面積，使用超生比技術兩小時左右即可達到最佳提取率，大大縮短了萃取時間。適用于所提取的多糖。以吸光值A為縱坐標，以葡萄糖的質量濃度為橫坐標制作標準曲線。分別對料液比、超聲溫度、超聲波功率、超聲時間4個因素進行單因素試驗[26].（1）料液比對榛蘑多糖得率的影響 在超聲溫度60℃，超聲波功率250W，超聲30min的條件下，分別配制料液比為1:1:31:1:41:50，提取多糖，計算得率。[27]。 根據超聲波—酶法最佳工藝條件中的酶解條件，只進行酶解，提取液不再用超聲波處理，進行抽濾、除蛋白、離心、醇沉等操作后，得到榛蘑多糖。料液比太大不利于對多糖的提取。因為強超聲波作用可能導致多糖糖苷鍵斷裂, 造成榛蘑多糖降解為單糖或小分子還原糖，使得率下降，所以提取功率不宜太高。因此，為了更好地考察提取的最優(yōu)條件，綜合各個單因素，從而進一步設計正交試驗，各組試驗均按照常規(guī)試驗方法進行，通過測定各組試驗的多糖得率，經過直觀分析，最后得出最佳的提取水平組合。 固定酶解溫度50℃，提取時間90min，pH ，改變加酶率。 %，提取時間90min，pH ，改變酶解溫度。因此，為了更好地考察提取的最優(yōu)條件，綜合各個單因素，從而進一步設計正交試驗，各組試驗均按照常規(guī)試驗方法進行，通過測定各組試驗的提取率，經過直觀分析，最后得出最佳的提取水平組合。 根據超聲波酶法得到的最佳工藝條件中的酶解條件，只進行酶解，%，酶解時間90min，酶解溫度50℃，提取液不再進行超聲波處理，經抽濾、除蛋白、離心、醇沉等操作后，得到榛蘑多糖。(5) 比較4種方法得到的榛蘑多糖得率，超聲波—酶聯合提取法比其他三種方法有明顯的優(yōu)勢。最后，感謝父母及所有親人的支持，他們是我能夠順利完成學業(yè)的堅強后盾，再次衷心感謝所有關心、幫助和鼓勵過我的親人、老師、同學和朋友。所以超聲波—酶法聯合提取榛蘑多糖的最佳工藝條件為：料液比1:40，%，酶解溫度50℃，酶解時間90min，超聲功率300W，超聲時間40min，超聲溫度60℃，%。提取液經過抽濾、除蛋白、離心、醇沉等操作，得到榛蘑多糖，并重復三次。這是纖維素酶的活性易受pH的影響，如果pH不適宜，會使酶的活性降低。圖37不同酶解時間下的榛蘑多糖得率 試驗結果如圖37所示：隨著酶解時間的延長，榛蘑多糖得率不斷升高，酶解90min后，趨于平穩(wěn)，不再有明顯的增加。%，高于其他條件下的得率，所以該最佳工藝條件成立。所以本試驗中，把超聲溫度控制在60℃較為適宜。