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培養(yǎng)基驗收作業(yè)指導(dǎo)書刪減版-免費閱讀

2025-07-12 02:47 上一頁面

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【正文】 ③生理生化特性(選擇性和特異性)規(guī)定培養(yǎng)基的基本特性,使用一套適當(dāng)?shù)臏y試菌株對培養(yǎng)基上的目標(biāo)菌的生理生化特性(菌落形態(tài)、大小等)和非目標(biāo)菌的被抑制程度進行測試。 4.5.3微生物學(xué)指標(biāo)控制可根據(jù)要求選用定量方法、半定量方法或定性方法(詳見表1表)對培養(yǎng)基性能進行測試,具體操作方法如下:(1)生長率將適量測試菌株的工作培養(yǎng)物接種至固體、半固體和液體培養(yǎng)基中,每種培養(yǎng)基上菌株的生長率應(yīng)達規(guī)定的最低限值。2)保存時限: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基應(yīng)在30天內(nèi)用完。已配制好的培養(yǎng)基必須在15分鐘內(nèi)滅菌,避免微生物生長繁殖而消耗養(yǎng)分,改變培養(yǎng)基的酸堿度。應(yīng)每月對儲存中的培養(yǎng)基進行常規(guī)檢查,如容器密閉性復(fù)查、首次開封日期、內(nèi)容物的感官檢查,如果培養(yǎng)基發(fā)生結(jié)塊、顏色異常和其他變質(zhì)跡象就不能再使用。培養(yǎng)基質(zhì)量控制作業(yè)指導(dǎo)書培養(yǎng)基質(zhì)量控制作業(yè)指導(dǎo)書目的:為加強我微生物實驗室的工作管理,保證實驗室的檢測質(zhì)量,特制定此作業(yè)指導(dǎo)書;范圍:本規(guī)范適用于實驗室微生物檢測中所使用培養(yǎng)基的質(zhì)量控制。開封的脫水培養(yǎng)基,每次使用前應(yīng)對其質(zhì)量進行檢查,通過粉末的流動性、均勻性、結(jié)塊情況和色澤變化等判斷培養(yǎng)基的質(zhì)量變化。為避免高溫破壞培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分,降低瓊脂的凝膠強度,必須嚴(yán)格控制滅菌溫度和時間,不可重復(fù)滅菌。鑒別培養(yǎng)基應(yīng)在21天內(nèi)用完。1)定量方法生長率PR的計算: PR = NS/NONS:從一個或多個待測培養(yǎng)基平板上得到的菌落總數(shù)。(2)性能評價和結(jié)果解釋按照規(guī)定得到的所有測試菌株的性能均符合規(guī)定,則該批培養(yǎng)基品質(zhì)優(yōu)良;若只有物理指標(biāo)和微生物指標(biāo)符合規(guī)定,則該批培養(yǎng)基可被接收。②定量方法選擇因子SF: SF = DO DSDO:能在參考培養(yǎng)基上生長至少10個菌落的最高稀釋度DS:能在測試培養(yǎng)基上顯示生長的最高稀釋度 要求:非目標(biāo)菌在選擇性培養(yǎng)基上的SF至少為2 ;半定量和定量法中,非目標(biāo)菌應(yīng)部分或全部被抑制。 4.5.1物理指標(biāo)控制1) 測試20℃~25℃的pH值2)瓊脂層厚度;色澤;透明度和(或)是否存在肉眼可見雜質(zhì);4.5.2微生物污染的控制從每批制備好的培養(yǎng)基中選取至少一個(或1%)平板或試管,置于3537℃或按特定標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定的溫度培養(yǎng)48h應(yīng)無菌生長,真菌培養(yǎng)基經(jīng)20~25℃培養(yǎng)72小時候后,應(yīng)無菌生長。培養(yǎng)基保存注意事項:1)環(huán)境條件:各種培養(yǎng)基均應(yīng)在潔凈的普通冰箱內(nèi)保存,以28℃左右為宜,不得凍結(jié)。 滅菌   培養(yǎng)基采用高壓蒸汽滅菌(濕熱滅菌),通常是121℃15min,含糖或特殊培養(yǎng)基,按照國家標(biāo)準(zhǔn)或生產(chǎn)商提供的說明滅菌。4. 2培養(yǎng)基的儲存干粉培養(yǎng)基應(yīng)保存在陰涼干燥處,要避免陽光直射;開瓶后的干粉培養(yǎng)基易吸濕,應(yīng)注意防潮并在有效期或6個月內(nèi)用完。職責(zé): 檢驗人員:按照本規(guī)程規(guī)對培養(yǎng)基使用前及使用過程中進行質(zhì)量控制,確保培養(yǎng)基符合相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的要求。若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基受潮或物理性狀發(fā)生明顯改變則不應(yīng)再使用。 pH測定   在初次使用每批培養(yǎng)基時,均需隨同檢測配制一個測試培養(yǎng)基,在滅菌或消毒后應(yīng)在25℃溫度下采用精密PH 試紙測試PH值,并判斷是否符合要求;使用過程中,如果需要調(diào)整培養(yǎng)基的pH,應(yīng)用1mol/LNaOH或lmol/LHCL調(diào)整,注意不可反復(fù)調(diào)pH,否則會影響培養(yǎng)基的滲透壓。選擇性分離鑒別培養(yǎng)基制成平板后當(dāng)日用完,置保鮮膜(袋)密閉保存期限可延長至一周。N0:從一個或多個規(guī)定的參考培養(yǎng)基平板上獲得的菌落總數(shù)(該菌落總數(shù)應(yīng)≥100cfu )。表1 計數(shù)用選擇性培養(yǎng)基培養(yǎng)基用途培養(yǎng)條件測試菌株參考培養(yǎng)基控制方法判定標(biāo)準(zhǔn)特征反應(yīng)BairdParker[S]生長率37
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