細(xì)菌的遺傳分析(2)-免費閱讀
【正文】 + + + 3. 局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)（特殊性轉(zhuǎn)導(dǎo)） 轉(zhuǎn)導(dǎo)的細(xì)菌基因僅限于某些特定的基因 1956年， Morse 和 Lederberg 以 λ噬菌體為媒介做轉(zhuǎn)導(dǎo)試驗，轉(zhuǎn)導(dǎo)僅限于 gal和 bio 區(qū)以內(nèi)的基因 。 2. 普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)（一般性轉(zhuǎn)導(dǎo)） 普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)頻率很低，一般只有 %左右的噬菌體是轉(zhuǎn)導(dǎo)噬菌體。 比較 F′、 F+和 Hfr可知 F′因子的特點 ： ⑴ 是細(xì)胞質(zhì)因子，可攜帶 1至多個緊密連鎖的基因。 從 A到 E為源于同一大腸桿菌 F＋ 菌株的 5個 Hfr株，括號內(nèi)的數(shù)字示中斷雜交試驗的 5個基因進(jìn)入 F－受體菌所需的時間： A B C D E mal (1) ade (13) pro (3) pro (10) his(7) str(11) his(28) met(29) gal(16) gal (17) ser(16) gal(38) xyl(32) his(26) pro(23) ade(36) pro(44) mal(37) ade(41) met(49) his(51) met(70) str(47) ser(61) xyl(52) ⑴ 繪出 F＋ 菌株的遺傳圖，表明所有基因的位置，并以分鐘表示基因的相對距離。然后可把這一“印章”上的菌落一一接種到不同的選擇性培養(yǎng)基平板上。 ? 有時采用顯微操縱器進(jìn)行菌絲尖端切割等方法從單個細(xì)胞直接培養(yǎng)建立純系。 (二 ) 建立純系的方法 —— 純培養(yǎng) ? 挑取由單個細(xì)胞繁殖而來的菌落進(jìn)行培養(yǎng)就可以獲得由一個細(xì)胞繁殖而來的純系。 (四 ) 突變型與重組型的批量篩選方法 為高效檢測、分離混和群體中不同突變型，黎德伯格夫婦設(shè)計了 影印培養(yǎng)法 。在以下結(jié)果中， M表示許多重組子， L表示少量重組子， O表示無重組子，請根據(jù)下述結(jié)果，指出每一菌株的性別類型（ Hfr、 F＋ 還是 F） 1 2 3 4 5 O M M O 6 O M M O 7 L O O M 8 O L L O 1 7, 2 8, 3 8 → L 8 不是 Hfr 2 5, 2 6, 3 5, 3 6, 4 7 →M 6 、 4是 Hfr, 7 是 F－ 1 5, 1 6, 1 8, 2 7, 3 7, 4 8 → O 1是 F+ 8是 F+ F+ F－ F－ Hfr Hfr Hfr F－ F+ 3. 中斷雜交試驗及染色體作圖 1957年 Hfr菌株 strs azir tonAr gal+ lac+ F﹣ 菌株 strr azis tonAs gal﹣ lac﹣ 鏈霉素 疊氮化物 T1噬菌體 半乳糖發(fā)酵 乳糖發(fā)酵 步驟 : 供體受體混合培養(yǎng) ↓ 隔時取樣 ↓ 稀釋攪拌，中斷雜交 ↓ 在含鏈霉素的完全培養(yǎng)基上選重組子 ↓ 鑒定重組體基因型 ↓ 記錄重組體頻率及首次出現(xiàn)的時間 ↓ 分析作圖 Hfr菌株 strs azir tonAr gal+ lac+ F﹣ 菌株 strr azis tonAs gal﹣ lac﹣ Lac gal ton azi Hfr 基因轉(zhuǎn)移順序 HfrH 1 2 3 AB312 0 Thr Pro lac pur gal his gly thi 0 Thr Thi gly his gal pur lac pro 0 Pro Thr thi gly his gal pur lac 0 Pur Lac pro thr thi gly his gal 0 Thi Thr pro lac pur gal his gly 用中斷雜交法確定的幾個 Hfr菌株的基因順序 轉(zhuǎn)移的基因鄰里關(guān)系不變 Hfr 基因轉(zhuǎn)移順序 HfrH 1 2 3 AB312 0 Thr Pro lac pur gal his gly thi 0 Thr Thi gly his gal pur lac p
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