【正文】 反向間接血凝（RPHA）、雙抗體心ELISA法檢測急性末梢血液，可早期快速診斷。乙腦早期診斷：潛伏期是4—21天，用發(fā)病4—7天血液、腦脊液用ELISA測特異性IgM抗體.。120. 流行性乙型腦炎：又日本腦炎，（乙類），經(jīng)三帶啄庫蚊傳播媒介，豬主要宿主和傳染源。新疆出血熱病毒。由漢坦病毒HV引起的自然疫源性疾病。病原分離：取出疹前3天至疹后3天的咽拭子，尿液標(biāo)本或血中淋巴細(xì)胞，不超過出疹前后5天。糞便須進(jìn)行氯仿處理，可除支細(xì)菌、真菌、有包膜病毒、細(xì)胞毒性脂類，使聚集的病毒分散。WHO及我國推薦HIV感染診斷用：血清學(xué)抗體檢測（監(jiān)測、診斷、血液篩查），篩查試劑須是HIV1/2混合型。對(duì)理化因素抵抗弱，但在2022℃活7天，冷凍血制品中需68℃加熱72小時(shí)才滅活，對(duì)紫外線不敏感。輸注含HDV的血液或血制品。前兩者空心包膜，表面抗原（HBsAg）組成，不含核酸，沒感染性。40倍鏡下可見油滴狀菌落，100倍下可見桑椹狀菌落。病人是唯一的傳染源，體虱傳播媒介，在人與人之間傳播（二）莫氏立克次體() ：又名斑疹傷寒立克次體，是地方性斑疹傷寒的病原體。標(biāo)本保存—80或160℃。111. 立克次體：以節(jié)肢動(dòng)物為傳播媒介，嚴(yán)格細(xì)胞內(nèi)寄生的原核細(xì)胞型微生物。110. 衣原體：嚴(yán)格真核細(xì)胞內(nèi)寄生的原核細(xì)胞型微生物，非運(yùn)動(dòng)性的細(xì)菌，多少呈球形、堆狀，G，一般寄生在動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)。主要采痰液，用無菌鹽水洗3次+ 1%胰酶37度水中90分鐘使痰液均質(zhì)化，該菌產(chǎn)生胞外毒性復(fù)合物(ETC)，主要成分為莢膜多糖（63%）、脂多糖（30%）和少量蛋白質(zhì)（7%）。有雜菌用選擇培養(yǎng)基（GVPC），是在BCYE中加入甘氨酸、多粘菌素B、萬古霉素及放線酮。莢膜是本菌的主要毒力因子，根據(jù)莢膜多糖抗原分為af 6個(gè)血清型，b型致病力最強(qiáng)；依據(jù)吲哚試驗(yàn)、脲素反應(yīng)、鳥氨酸代謝分為：8個(gè)生物型，大部分為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型，其中以Ⅰ、Ⅲ型為主，血清型b型生物型為Ⅰ型。再做42℃、25℃生長試驗(yàn)（布氏桿菌肉湯），H2S試驗(yàn)陽性（排除胎兒彎曲菌）、馬尿酸鹽水試驗(yàn)陽性（排除結(jié)腸彎曲菌）。有莢膜，不形成芽胞。G＋，無動(dòng)力無芽無莢，人是唯一的宿主和傳染源，分瘤型和結(jié)核型。結(jié)核菌素舊結(jié)核菌素（OT）與結(jié)核菌素純蛋白衍化物（PPD）的通稱。各型均應(yīng)采血液標(biāo)本。(2)一種對(duì)懸液中細(xì)胞、微生物或細(xì)胞器等進(jìn)行單個(gè)快速識(shí)別、分析和分離的技術(shù)。20. 原位雜交可直接檢測或定位細(xì)胞內(nèi)毒基因。13. 病毒病的常規(guī)實(shí)驗(yàn)室診斷指病毒的分離和鑒定、形態(tài)學(xué)檢查、免疫學(xué)鑒定、分子生物學(xué)鑒定。8．遲發(fā)感染的特點(diǎn)：又稱慢發(fā)病毒感染。EDTA、胰蛋白酶分散作用?？ń槊绾喎Q為：BCG鉤瑞螺旋體可以引起肺部感染Vero細(xì)胞毒素是O157：H7大腸桿菌的最主要致病物質(zhì)耐熱直接溶血素屬于副溶血弧菌的主要致病物質(zhì)Ag與Ab結(jié)合的部位是：VH+VLAg決定基是: 決定Ag特異性最小化學(xué)基團(tuán)HIV造成免疫系統(tǒng)的多種功能發(fā)生缺陷的主要原因是: T4淋巴細(xì)胞耗竭EBV除引起人類皮膚和黏膜的皰疹樣病變外，還與下列人類鼻咽癌疾病密切相關(guān)核衣殼是病毒粒子的主要結(jié)構(gòu)，核衣殼是由衣殼和核酸成分組成的做補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)前血清加熱滅活以破壞它所含有的補(bǔ)體，通常羊血清用58℃溫度滅活我國于1981年開始用地鼠腎細(xì)胞疫苗，近幾年又開始應(yīng)用更為先進(jìn)的狂犬病疫苗，這種疫苗是: Vero細(xì)胞狂犬病疫苗當(dāng)進(jìn)行抗球蛋白試驗(yàn)查不完Ab時(shí)，其中一個(gè)重要試劑是第二Ab，在抗球蛋白試驗(yàn)中第二抗體是雙價(jià)抗體在CFT反應(yīng)中有5種成份：Ag、被檢血清、補(bǔ)體、溶血素和SRBC，CFT反應(yīng)中補(bǔ)體的作用是: 非特異性結(jié)合。產(chǎn)生抗體的細(xì)胞是B細(xì)胞，本質(zhì)是免疫球蛋白（Ig）。Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)：即速發(fā)型，又稱過敏反應(yīng)。在合成發(fā)生錯(cuò)誤時(shí)，DNA多聚酶會(huì)切除錯(cuò)誤核苷酸，于此處加上正確的核苷酸。 核酸檢驗(yàn)基本技術(shù) 轉(zhuǎn)錄在生物體內(nèi)，DNA指導(dǎo)的RNA合成過程。蛋白質(zhì)類代謝試驗(yàn)：靛基質(zhì)試驗(yàn)、硫化氫試驗(yàn)、苯丙氨脫氨試驗(yàn)、尿素酶試驗(yàn)雙糖：葡萄糖、乳糖；三糖：葡萄糖、乳糖、蔗糖；雙糖高層斜面發(fā)酵管：葡萄糖/乳糖=1：10三糖鐵與雙糖鐵區(qū)別：蔗糖。最快的細(xì)菌計(jì)數(shù)方法顯微鏡直接計(jì)數(shù)法。三、凝固物：瓊脂、明膠、卵蛋白及血清瓊脂：成份為多糖，賦形物。蛋白質(zhì)使用免疫測定技術(shù)、電泳技術(shù)、質(zhì)譜技術(shù)；核酸使用—探針技術(shù)、雜交技術(shù)、聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)構(gòu)建基因組文庫，初始DNA長度須在90kb以上。用聚丙烯酰胺制備等電聚焦電泳凝膠。測序儀：蛋白測序儀測定氨基酸排列順序 DNA測序儀測核苷酸排列順序。培養(yǎng)皿分：10cm蛋白質(zhì)、核酸提取及相關(guān)設(shè)備一、蛋白質(zhì)分離純化實(shí)驗(yàn)室常用鹽析法（硫酸銨）。第二階段：遺傳毒性試驗(yàn)。直接觀察細(xì)菌的超微結(jié)構(gòu)：超薄切片技術(shù)、電子顯微鏡。菌落常SR相變異，Ⅰ相S型，Ⅱ、Ⅲ相過渡型，Ⅳ相R型。96. 無芽胞厭氧菌是一大類正常菌群，引起感染是內(nèi)源性感染。厭氧手套箱培養(yǎng)法是迄今最佳厭氧培養(yǎng)儀器之一。快速檢測：尿素呼吸試驗(yàn)簡單快捷，可以特異地診斷HP現(xiàn)癥感染，敏感性高。免疫檢測：霍亂為腸為非侵襲性細(xì)菌，主要剌激局部黏膜產(chǎn)生分泌性AgA抗體，同時(shí)大量毒素及細(xì)菌脂多糖體的產(chǎn)生使機(jī)體產(chǎn)生抗毒和抗菌抗體。病原鑒定： O1群無芽胞，無莢膜，單一鞭毛 ；O139群菌體周圍有一層比較薄的莢膜。，能使明膠分解為氨基酸而液化。假結(jié)核：25℃有周鞭毛有動(dòng)力37℃無動(dòng)力，最適溫30℃，pH6～8。新一代疫苗：傷寒Vi莢膜多糖疫苗。病原分離：血液和骨髓須按1：10加入血液需氧培養(yǎng)瓶或膽鹽葡萄糖肉湯增菌后接種于血瓊脂平板或營養(yǎng)瓊脂平板，SS—雙糖或三糖鐵（TSI）培養(yǎng)基。測志賀菌的侵襲力用Sereny試驗(yàn)，接種于豚鼠眼結(jié)膜囊內(nèi)。腸出血型（EHEC）：其中O157：H7可引起出血性腹瀉和溶血性尿毒癥，是4歲以下兒童急性腎功能衰的主要病原，8三月最高，北美多見。玻片凝集可定性和半定量，低倍觀察。鏡檢：新鮮標(biāo)本加蓋片暗視野顯微鏡下檢查，漿液不能含有紅細(xì)胞、微生物、組織碎片。72. 淋球奈瑟菌：G人類是唯一天然宿主和傳染源。71. 腦膜炎奈瑟菌：腦液中位于中性細(xì)胞內(nèi)，大多能分解葡萄糖、麥芽糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，具有氧化酶和觸酶。主要抗原有：蛋白質(zhì)抗原、多糖抗原、核蛋白抗原。（一）化膿性鏈球菌：標(biāo)本1天內(nèi)送，不超過2天。常用柯夫培養(yǎng)基或EMJH培養(yǎng)基，需加入10%兔血清或牛血清，培養(yǎng)液透明有輕度乳光，搖動(dòng)時(shí)有云霧狀混濁。微嗜氧G，能自身合成類脂化合物、主要脂肪酸，并將嘌呤堿結(jié)合到核酸中，但不能合成長鏈脂肪酸，發(fā)展酵代謝產(chǎn)物乳酸。 66. 布魯司菌：無鞭無芽G呈散沙狀，S型有莢膜，專性需氧，抵抗力強(qiáng)，37 ℃，～，血液、血清、肝浸液可促進(jìn)生長，48小時(shí)形成微小，無色透明光滑凸起菌落。61. 在細(xì)菌生長到足夠量時(shí)加入抑制蛋白質(zhì)合成的抗生素，在細(xì)菌停止繁殖后質(zhì)粒還在復(fù)制，可以提高質(zhì)粒的收獲量。59. 小白鼠對(duì)肺鏈，破傷外毒素敏感，豚鼠對(duì)結(jié)核白喉易感，貓對(duì)金葡萄菌腸毒敏感。54. 細(xì)菌數(shù)量達(dá)106~107CFU/ml時(shí)培養(yǎng)肉湯才見混濁。普通光學(xué)顯微鏡不能觀察細(xì)胞和細(xì)菌的亞結(jié)構(gòu)。是指病原突破宿主機(jī)體的防御功能，并能在體內(nèi)定居、繁殖和擴(kuò)散的能力。38. 接合：受體菌和供體菌直接接觸，供體菌通過性菌毛所帶的F質(zhì)?；蝾愃七z傳物質(zhì)轉(zhuǎn)移到受體菌。：嘌呤換嘌呤，嘧啶換嘧啶為轉(zhuǎn)換，嘌呤換嘧啶為顛換。遺傳型變異機(jī)制有突變，基因轉(zhuǎn)移，重組。芽胞染色：菌懸液→孔雀綠→水浴1520分鐘→涂片→干燥→固定→水洗脫色→番紅或稀釋石炭酸復(fù)紅復(fù)染→水洗→晾干莢膜染色：（負(fù)染色法、墨水法）。PH59穩(wěn)定；射線和紫外線、X線、r線能滅活病毒。玻璃濾菌器分G1～G6，G5，G6兩型能阻止細(xì)菌通過。20. 細(xì)胞壁的作用：承受胞內(nèi)高滲壓、支持細(xì)胞膜、維持細(xì)菌形態(tài)；是鞭毛運(yùn)動(dòng)的支點(diǎn)。細(xì)菌新陳代謝的產(chǎn)物：熱原質(zhì)、毒素與酶、色素、抗生素、細(xì)菌素。細(xì)菌生長的溫度極限790℃： 嗜冷菌最適溫為10～20℃，嗜溫菌為20～40℃，嗜熱菌為50～60℃。由9種成份，11種蛋白組成。免疫分子：補(bǔ)體、免疫球蛋白、細(xì)胞因子中樞免疫器官：骨髓、胸腺、鳥類法氏囊。14. 肽聚糖的結(jié)構(gòu)由聚糖骨架，四肽側(cè)鏈和五肽交聯(lián)橋（G－無交聯(lián)橋）。、真菌、放線菌或螺旋體等微生物的病毒，具有病毒的基本特性，專性胞內(nèi)寄生，有嚴(yán)格的宿主特異性。致病特點(diǎn)：慢性和反復(fù)發(fā)作性感染，致病物質(zhì)是毒素。8. 桿菌肽用于A（敏感）與非A群鏈球菌的鑒定。雜交百分率＞70%（≥69%）為高度同源性，同源性在60%以上是一個(gè)種，同源性在60%70%是同一種內(nèi)不同亞種，同源性在20%60%同一屬內(nèi)不同菌種，同源性20%≤不同屬的菌種。變性DNA常發(fā)生一些理化及生物學(xué)性質(zhì)的改變： 1）溶液粘度降低。不同的菌株、不同的抗生素紙片需參照NCCLs的標(biāo)準(zhǔn)或者CLSI標(biāo)準(zhǔn)。目名—VRirales。2004年ICTV公布病毒分為：73個(gè)科、11個(gè)亞種、289個(gè)屬。 多黏菌素抑菌圈；在9毫米以上為高敏，6—9毫米為低敏，無抑菌圈為不敏。2）溶液旋光性發(fā)生改變。AFLP的含義是擴(kuò)增片段長度多態(tài)性。O/129抑菌試驗(yàn)對(duì)弧菌有用而對(duì)氣單胞菌無用。L型細(xì)菌在體內(nèi)體外都可形成。由核酸和蛋白質(zhì)組成。磷壁酸為G＋特有，分壁和膜兩種。外周免疫器官：淋巴結(jié)、脾和粘膜相關(guān)淋巴組織特異性免疫：體液免疫、細(xì)胞免疫。補(bǔ)體激活兩個(gè)途徑：傳統(tǒng)途徑（一）被AgAb免疫復(fù)合物IC活化，順序CC2C、3C、5C、6C、7C、8C、C9?！?。熱原質(zhì)除去的最好方法蒸餾。細(xì)胞壁的主要成份：肽聚糖（又稱黏肽、胞壁質(zhì)），是原核生物特有的成份，能破壞肽聚分子結(jié)構(gòu)或抑制其合成的物質(zhì)，都有抑菌和殺菌作用。24. 高壓滅菌指示物：嗜熱脂肪芽胞桿菌（ATCC 7053），紫外線殺菌指示物：枯草芽胞桿菌黑色變種（ATCC 9372）。病毒學(xué)上常用的細(xì)胞類型：原代細(xì)胞、二倍體細(xì)胞、傳代細(xì)胞。負(fù)染色法：制片（蒸餾水+菌）→干燥（晾干）→染色（復(fù)紅）→水洗→干燥（晾干）→涂墨素。突變：突變率由復(fù)制的準(zhǔn)確度，DNA發(fā)生損傷的機(jī)會(huì)，及對(duì)損傷DNA修復(fù)程度來決定。影響基因表達(dá)的因素有：調(diào)控部位，調(diào)節(jié)蛋白，效應(yīng)分子。39. 溶源性轉(zhuǎn)換：是噬菌體的DNA與細(xì)菌染色體重組，使宿主遺傳結(jié)構(gòu)發(fā)生變異。，前一字為屬名，名詞，后一為種名，形容詞。相差顯微鏡特殊裝置—環(huán)狀光闌、相板，利用光干涉現(xiàn)象。55. 血培養(yǎng)中有105菌落形成單位（CFU）/ML時(shí)才能通過革蘭氏染色檢出細(xì)菌。測定病原體的感染性最好選用無菌動(dòng)物或悉生動(dòng)物。62. 糞便嘔吐物應(yīng)接種高鹽卵黃或高鹽甘露醇瓊脂，觸酶陽性，凝固酶陽性玻片法篩選，試管法確證。6個(gè)種19個(gè)生物型，對(duì)人致病是羊、牛、豬種。蜱傳播媒介，鼠主要宿主動(dòng)物，標(biāo)本在 20—4℃運(yùn)送。GFontana鍍銀染色成棕色。THB增菌肉湯、5%脫纖維羊血的胰酶消化大豆瓊脂培養(yǎng)基，血液和腦脊液應(yīng)先增菌后接種平板，膿液、咽拭子直接種于血平板。+ 2%的脫氧膽酸3537℃培養(yǎng)2小時(shí)，管液清澈或濁度消失為陽性。能產(chǎn)生自溶菌不宜冰箱應(yīng)立即保溫送檢，冬末春初為流行高峰，青霉素G為首選。不耐干燥，35—36℃，—5%CO2生長,，對(duì)糖類生化最低只能發(fā)酵葡萄糖，主要有菌毛蛋白，脂多糖，外膜蛋白抗原。熒光標(biāo)記、ELISA普光下查，鍍銀染色螺旋體染成棕褐色光鏡下查。RPR用未處理活性炭顆粒吸附VDRE抗原。毒力因子：志賀樣毒素、溶血素、LEE毒力島、Vero毒素?？焖僭\斷：免疫染色法免疫熒光菌法協(xié)同凝集試驗(yàn)?zāi)z乳凝集試驗(yàn)分子生物學(xué)方法77. 傷寒與副傷寒菌：無芽無莢有鞭毛（除雞沙門）多數(shù)有菌毛，H2S可陽性，傷寒菌產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，菌體抗原有58種，鞭毛抗原有兩相即特異性和共同，表面抗原有Vi，M，5三種，變異有：SR，HO，vw，相位。糞便接種麥康凱（MaC）/DHL、SS平板上，或SF增菌。78. 變形桿菌屬：普通，奇異，產(chǎn)黏。血清檢測的抗體是F1經(jīng)典鼠疫“四步檢驗(yàn)”：顯微鏡檢查（美蘭染色）、培養(yǎng)、鼠疫噬菌體裂解試驗(yàn)（早期為暗黃的灰色表面粗糙的顆粒樣突起，在血培養(yǎng)上有花邊狀薄而透明不整齊的邊緣菌落。氧化酶試驗(yàn)用于腸桿菌科與假單胞菌的鑒別。測定耐熱的特異性O(shè)抗原，用玻片凝集或ELISA鑒定， 血清效價(jià)1：401：50。恢復(fù)期帶菌者是指臨床癥狀消失后3個(gè)月內(nèi)帶菌者，恢復(fù)期帶菌的時(shí)間一般不超過 2 周，健康帶菌者的排菌時(shí)間一般不超過7天。主要采用13C、14C（放射性同位素）標(biāo)記尿素，13C用于兒童和孕婦。92. 厭氧狀態(tài)的指示劑有：美藍(lán)和刃天青，無氧時(shí)白色，有氧時(shí)美藍(lán)藍(lán)色，刃天青粉紅色。97. 白喉棒狀桿菌：為放線菌，G+，無莢無芽無鞭無毛，奈瑟（Neisser）染色成黃褐色，一端或兩端染成藍(lán)色或深藍(lán)色顆粒即異染顆粒，阿培特（Albert）染色菌體呈藍(lán)綠色，異染顆粒成藍(lán)黑色。有百日咳毒素，絲狀血細(xì)胞凝聚素和腺嘌呤環(huán)化毒素。102. 芽胞：在80℃水中迅速死亡，在100℃水中能耐受2小時(shí)以上，在70%乙醇中能存活20年。第三階段：亞慢性毒性試驗(yàn)。核酸純化酚、氯仿抽提制備細(xì)胞外膜蛋白超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)。物質(zhì)是；質(zhì)粒、噬菌體、PCR產(chǎn)物擴(kuò)增儀：能做PCR稱DNA擴(kuò)增數(shù) 酶標(biāo)儀：二、電泳類：用于原 理聚丙烯酰胺凝膠電泳（PAGE）蛋白質(zhì)、核酸分離用垂直電泳槽，凝膠介質(zhì)形成立體多孔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，過硫酸銨起催化聚合作用, Tris甘氨酸緩沖液。濃縮效應(yīng)、分辨率高、重復(fù)性好、用時(shí)少對(duì)流免疫電泳（CIE）測定抗體或抗原，使抗原抗體均帶負(fù)電，抗原向正泳，抗體電滲作用向負(fù)泳。純化的mRNA在70%的乙醇中可保存1年以上。固培養(yǎng)基2—3%，—%明膠:主含蛋白質(zhì),24℃以上溶解,20℃以下凝固四、抑制劑：五、指示劑：酚紅、溴甲酚紫、中性紅、