腫瘤的分子診斷ppt課件-免費閱讀
【正文】 三、基因治療的基本流程 （一） 外源基因 的選擇與制備 （二） 載體 的選擇與構(gòu)建 （三） 靶細(xì)胞 的選擇 （四） 基因轉(zhuǎn)移 （五）基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞的 篩選與鑒定 （六） 回輸體內(nèi) 基因治療的方式 ? 根據(jù)基因?qū)氲姆绞椒譃閮煞N： 1. 直接 體內(nèi)療法 （ in vivo） ? 是指將目的基因 直接導(dǎo)入 體內(nèi)有關(guān)的組織器官 ，使其進入相應(yīng)的細(xì)胞并進行表達 。 ? 大腸桿菌胞嘧啶脫氨酶 （ CD） 基因 ? 將 5’氟 胞 嘧啶 （ 5’FC） 轉(zhuǎn)化為 5’氟 尿 嘧啶 （ 5’FU）而發(fā)揮細(xì)胞毒性作用 。 二、基因治療的策略 (一 ) 直接策略 ： ? 針對致病基因 (二 ) 間接策略 ： ? 導(dǎo)入與致病基因無直接聯(lián)系的治療基因 (一 )直接策略 1. 基因 矯正 （ gene correction） 2. 基因 置換 （ gene replacement） 3. 基因 增補 （ gene augmentation） 又稱為 補償性 基因治療 4. 基因 失活 （ gene inactivation） 又稱為 反義 基因治療 (一 )直接策略 1. 基因 矯正 （ gene correction） ? 指將致病基因的 突變堿基加以糾正 ， 而保留正常部分 。 2. 基因 置換 （ gene replacement） ? 指通過同源重組或基因打靶技術(shù) ， 將正?；?定點整合 到靶細(xì)胞基因組內(nèi) ,以 原位替換 致病基因 。 ? 細(xì)胞色素 P450基因 viral vector （ HSV） thymidine kinase gene tumour cell ganciclovir phosphate Ganciclovir（ GCV） tk Targeted Killing Geic Prodrug Activation Therapy Ganciclovir phosphate inhibits DNA polymerase Cell death – Including bystander cells (2) 化療保護性基因治療 ? 指將編碼 抗細(xì)胞毒性藥物蛋白的基因 導(dǎo)入人體細(xì)胞 ， 以提高機體耐受腫瘤化療藥物的能力 。 2. 間接 體內(nèi)療法 （ ex vivo） ? 是指在體外將目的基因 導(dǎo)入靶細(xì)胞 ， 經(jīng)過 篩選和增殖 后將細(xì)胞 回輸 給患者 ， 使該基因在體內(nèi)有效地表達相應(yīng)產(chǎn)物 ， 以達到治療的目的 。 ? 由于 TGFα與表皮生長因子 EGF結(jié)構(gòu)類似 ， 也能與表皮生長因子受體 （ EGFR） 結(jié)合 ； ? 故該融合基因可 特異性進入并殺死 高度表達EGFR的膀胱癌 、 腎癌 、 肺癌 、 乳腺癌等腫瘤細(xì)胞 。 ? 自殺基因 ? 單純皰疹病毒胸苷激酶 （ HSVtk） 基因 ? 編碼胸苷激酶 （ TK） 催化丙氧鳥苷 （ ganciclovir, GCV） 磷酸化成為磷酸化的核苷酸類似物 ， 阻斷 DNA的合成 。 ? 廣義概念： 將某種遺傳物質(zhì) 轉(zhuǎn)移 至患者細(xì)胞
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