原核生物的基因重組-免費(fèi)閱讀
【正文】 接合作用（中斷雜交）作圖只能判斷相距較遠(yuǎn)的基因間的相對位置；轉(zhuǎn)導(dǎo)、轉(zhuǎn)化則可用于對相隔很近的基因進(jìn)行定位； 大腸桿菌 遺傳圖譜 目前對大腸桿菌的染色體已定位了1000多個(gè)基因 F′菌株 F′ 菌株 : Hfr菌株內(nèi)的 F因子因不正常切割而脫離染色體時(shí)，形成游離的但攜帶一小段染色體基因的 F因子，特稱為 F′因子。 接合中 DNA轉(zhuǎn)移過程有著穩(wěn)定的速度和嚴(yán)格的順序性 。 – 在細(xì)菌中， G－ 細(xì)菌尤為普遍，如 E. coli、 沙門氏菌屬、志賀氏菌屬、克雷伯氏菌屬、沙雷氏菌屬、弧菌屬、固氮菌屬和假單胞菌屬等； – 放線菌中，以鏈霉菌屬和諾卡氏菌屬最為常見，其中研究得最為詳細(xì)的是天藍(lán)色鏈霉菌（ Streptomyces coeilcolor ）。 媒介： 部分缺陷噬菌體 （丟失自身一部分基因，并被 同等長度的宿主基因所取代） 只能轉(zhuǎn)導(dǎo)個(gè)別特定基因 大腸桿菌中 λ噬菌體的正常裂解及半乳糖基因轉(zhuǎn)導(dǎo)噬菌體的形成過程 低頻轉(zhuǎn)導(dǎo)（ LFT） 的定義 : 誘導(dǎo)溶源性大腸桿菌而產(chǎn)生的細(xì)胞裂解產(chǎn)物中，除含有正常的噬菌體外，還有少數(shù)（ 106）轉(zhuǎn)導(dǎo)噬菌體顆粒，因此，用誘導(dǎo) λ溶源性菌株得來的噬菌體進(jìn)行轉(zhuǎn)導(dǎo)時(shí)的轉(zhuǎn)導(dǎo)頻率不過 106 ， 稱為低頻轉(zhuǎn)導(dǎo) 。 由轉(zhuǎn)導(dǎo)作用而獲得供體細(xì)胞部分遺傳性狀的重組受體 細(xì)胞稱為 轉(zhuǎn)導(dǎo)子 （ transductant） 攜帶供體部分遺傳物質(zhì)（ DNA片段）的噬菌體稱為 轉(zhuǎn)導(dǎo)噬菌體。 轉(zhuǎn)化的頻率通常為 ％ ～ 1％ ， 最高為 20％ 。 （ 該過程與細(xì)菌自身的遺傳控制無關(guān)！ ） 進(jìn)行自然轉(zhuǎn)化，需要二方面必要的條件： （ 1）建立了 感受態(tài)的受體細(xì)胞 （ 2）外源游離 DNA分子 感受態(tài)的機(jī)理研究： 局部原生質(zhì)體化假說： 處于感受態(tài)的細(xì)胞局部失去了細(xì)胞壁，使外源 DNA能順利經(jīng)膜進(jìn)入菌體。 重組 ： 遺傳物質(zhì)在 分子水平 上發(fā)生的交換； 雜交 ： 在 細(xì)胞水平 上遺傳物質(zhì)的交換 . 雜交必然包含著重組，但重組不僅限于雜交這一形式。一個(gè)細(xì)菌能否出現(xiàn)感受態(tài)是由其遺傳性決定的，但受環(huán)境條件的影響也很大，因而表現(xiàn)差別很大。 但不管何種情況 ， 最易與細(xì)胞表面結(jié)合的仍是 dsDNA。 不是由細(xì)菌自身的基因所控制； 用多種不同的技術(shù)處理受體細(xì)胞，使其人為地處于一 種可以攝取外源 DNA的 “ 人工感受態(tài) ”。 特點(diǎn)：在選擇培養(yǎng)基平板上形成微小菌落 外源 DNA被降解，轉(zhuǎn)導(dǎo)失敗。 溶源轉(zhuǎn)變與轉(zhuǎn)導(dǎo)的不同？ a） 噬菌體不攜帶任何供體菌的基因； b） 這種噬菌體是完整的，而不是缺陷的； 三、 接合 (conjugation) 通過細(xì)胞與細(xì)胞的直接接觸而產(chǎn)生的遺傳信息的轉(zhuǎn)移和重組過程 1946年， Joshua Lederberg 和 Edward 細(xì)菌的多重營養(yǎng)缺陷型雜交實(shí)驗(yàn) 中間平板上長出的原養(yǎng)型菌落 是兩菌株之間發(fā)生了遺傳交換 和重組所致！ 為了減少所培養(yǎng)的結(jié)果是回復(fù)突變的機(jī)會(huì)，采用了雙重或三重營養(yǎng)缺陷型。 圖中黃色區(qū)域表示轉(zhuǎn)座子，通過這些部位可以整合進(jìn)細(xì)菌染色體上形成各種 Hfr菌株。
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