研究生入學(xué)考試]酶學(xué)及酶工程課3章3節(jié)-免費(fèi)閱讀
【正文】 課外練習(xí)（記分） 簡(jiǎn)述蛋白質(zhì)溶液構(gòu)象的主要光譜測(cè)定方法的用途。 討論（續(xù)） I。可測(cè)定的變化階段明顯多于較小分子的核糖核酸酶，肌酸激酶等。在 412nm測(cè)定光吸收即可測(cè)知可作用 SH數(shù) ， 且可在作用過(guò)程中連續(xù)監(jiān)測(cè) 。鹽、有機(jī)溶劑、 pH、高溫等也作為變性方法應(yīng)用。 在大量較大蛋白中發(fā)現(xiàn)了折疊中間態(tài) ，如熔球態(tài) ， 有基本的三級(jí)結(jié)構(gòu) ， 但較松散 ，無(wú)活性 。否則 DNA就不可能攜帶了全部遺傳信息 。 1986年 Byler和 Susi用二階導(dǎo)數(shù)和去卷積法分析，給出了各構(gòu)象的特征酰胺 I帶位置，確定了各子峰的歸屬。 橢園度與波長(zhǎng)的關(guān)系稱園二色譜 ， 各種二級(jí)結(jié)構(gòu)有不同的園二色譜和特征峰位 ，因而園二色譜可用于測(cè)定二級(jí)結(jié)構(gòu) 。 互相垂直的平面偏振光 ， 振幅相等位相差π/2時(shí)合成為園偏振光 ， 右手螺旋旋轉(zhuǎn)的稱右偏振光 ， 左手螺旋旋轉(zhuǎn)的為左偏振光 。 熒光標(biāo)記蛋白質(zhì)后，測(cè)定其熒光偏振可以了解和輔基、底物、抗原等的結(jié)合程度。 B類蛋白質(zhì)含酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸，最大熒光發(fā)射在 320－ 350nm范圍，位置和量子產(chǎn)率都與環(huán)境有關(guān)，受構(gòu)象影響。 使用范圍：有產(chǎn)生熒光的基團(tuán)參與，一般是芳環(huán)，特別是稠芳環(huán)的基團(tuán)。酶學(xué)及酶工程 Enzymology and Enzyme Engineering 田維熙 教授 中國(guó)科學(xué)院研究生院 第三章 酶的結(jié)構(gòu)與功能 第二節(jié) 酶的溶液構(gòu)象測(cè)定（續(xù)） 2. 熒光光譜 熒光：某些帶熒光基團(tuán)的物質(zhì)吸收特定波長(zhǎng)激發(fā)光（ excitation）能量，由基態(tài)躍遷到激發(fā)態(tài)。 熒光強(qiáng)度公式 熒光強(qiáng)度 F＝ KφI 0（ 1－ e－ A） K：儀器常數(shù)， φ ：量子產(chǎn)率， I0：激發(fā)光強(qiáng)度， A：樣品吸光度 A較小時(shí)，可以近似為 F＝ KφI 0A。 蛋白質(zhì)構(gòu)象變化時(shí)表面酪氨酸和色氨酸發(fā)生變化，內(nèi)源熒光強(qiáng)度和峰位會(huì)變化，從而可探測(cè)蛋白質(zhì)的構(gòu)象變化。結(jié)合越緊熒光偏振越大。 右旋園偏振光的合成 左旋園偏振光的合成 振幅（強(qiáng)度）不同，頻率相同的左右偏振光合成橢圓偏振光，橢園度的正切為橢園短軸和長(zhǎng)軸之
教學(xué)課件相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1