分解尿素的細(xì)菌的分離-預(yù)覽頁
【正文】 復(fù)制的技術(shù)，此項(xiàng)技術(shù)要求使用耐高溫〔 930C〕的 DNA聚合酶。 第六頁，共三十五頁。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生長發(fā)育繁殖，而受到抑制，所以用此培養(yǎng)基就能夠選擇出分解尿素的微生物。 ⑵計(jì)算方法： 每克樣品中的菌落數(shù)＝ (C247。在對應(yīng)稀釋倍數(shù)106的培養(yǎng)基中，得到以下兩種統(tǒng)計(jì)結(jié)果。第一位同學(xué)需要設(shè)置重復(fù)實(shí)驗(yàn)組。 ②為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30—— 300的平板上進(jìn)行計(jì)數(shù)，計(jì)算出菌落 平均數(shù) ③統(tǒng)計(jì)的菌落往往比活菌的 實(shí)際數(shù)目低 。 設(shè)置對照的主要目的是排除實(shí)驗(yàn)組中 非測試因素對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度。 原因： ⑴ 土樣不同 ， ⑵ 培養(yǎng)基污染或操作失誤 (或者是混入了其他的含氮物質(zhì) ) 如何設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)證明呢？ 第十六頁，共三十五頁。 第十七頁，共三十五頁。 ㈡ .制備培養(yǎng)基： 制備以尿素為唯一氮源的 選擇培養(yǎng)基 。 ◆別離不同的微生物采用不同的稀釋度 稀釋倍數(shù) 目的 細(xì)菌 10 10 106 放線菌 10 10 105 真菌 10 10 104 原因：不同微生物在土壤中含量不同 保證獲得菌落數(shù)在30～ 300之間適于計(jì)數(shù)的平板 第二十頁，共三十五頁。 第二十一頁，共三十五頁。 第二十二頁，共三十五頁。 細(xì)菌： 30～ 37℃ 培養(yǎng) 1～ 2d 放線菌： 25～ 28℃ 培養(yǎng) 5～ 7d 霉菌： 25～ 28℃ 的溫度下培養(yǎng) 3～ 4d。 微生物的培養(yǎng)與觀察 第二十五頁，共三十五頁。 第二十六頁，共三十五頁。培養(yǎng)某種細(xì)菌后，如果 PH升高，指示劑將變 ，說明該細(xì)菌能夠分解尿素。 〔 〕 70－ 80度熱泉中別離到耐高溫的 TaqDNA聚合酶 5個(gè)平板的菌落數(shù)依次為 M MM M M5，以 M3作為該樣品菌落數(shù)的估計(jì)值 驗(yàn)結(jié)果的影響，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度 ，土壤中的微生物數(shù)量最大，種類最多。 合成培養(yǎng)基主要成分是氨基酸、維生素、碳水化合物、無機(jī)鹽和其它一些輔助物質(zhì)。 天然培養(yǎng)基有血清、血漿、和組織提取液〔如雞胚和牛胚浸液〕。 天然培養(yǎng)基： 第三十四頁，共三十五頁。結(jié)果預(yù)測：如果結(jié)果與A同學(xué)一致，那么證明 A無誤。霉菌： 25～ 28℃ 的溫度下培養(yǎng) 3～
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