中國藥品檢驗標準操作規(guī)程-預覽頁
【正文】 的流動相時，應選用耐酸的填充劑，如具有大體積側(cè)鏈能產(chǎn)生空間位阻保護作用的二異丙基或二異丁基取代十八烷基硅烷鍵合硅膠填充劑、有機 無機雜化填充劑等。l 不同的檢測器，對流動相的要求不同。應盡可能少用含有緩沖液的流動相，必須使用時，應盡可能選用含較低濃度緩沖液的流動相。30%且相對于總量的改變量不超過177。系統(tǒng)適用性試驗l 色譜系統(tǒng)的適用性試驗通常包括理論板數(shù)、分離度、重復性和拖尾因子等四個參數(shù)。 l 用于評價色譜柱的分離效能。可以通過測定待測物質(zhì)與已知雜質(zhì)的分離度，也可以通過測定待測組分與某一添加的指標性成分（內(nèi)標物質(zhì)或其他難分離物質(zhì)）的分離度，或?qū)⒐┰嚻坊驅(qū)φ掌酚眠m當?shù)姆椒ń到?，通過測定待測組分與某一降解產(chǎn)物的分離度，對色譜系統(tǒng)進行評價與控制。采用外標法時，通常取各品種項下的對照品溶液，連續(xù)進樣 5次，除另有規(guī)定外，其峰面積測量值的相對標準偏差應不大于 ％；采用內(nèi)標法時，通常配制相當于 80％、 100％和 120％的對照品溶液，加入規(guī)定量的內(nèi)標溶液，配成 3種不同濃度的溶液，分別至少進樣 2次，計算平均校正因子，其相對標準偏差也應不大于 ％。l 除另有規(guī)定外，峰高法定量時 T應在 ～ 。取一定量注入儀器，記錄色譜圖。 采用內(nèi)標法，可避免因樣品前處理及進樣體積誤差對測定結(jié)果的影響。在建立方法時，按各品種項下的規(guī)定，精密稱（量）取雜質(zhì)對照品和待測成分對照品各適量，配制測定雜質(zhì)校正因子的溶液，進樣，記錄色譜圖，按上述 因子。然后，取供試品溶液和對照品溶液適量，分別進樣，供試品溶液的記錄時間，除另有規(guī)定外，應為主成分色譜峰保留時間的 2倍，測量供試品溶液色譜圖上各雜質(zhì)的峰面積，分別乘以相應的校正因子后與對照溶液主成分的峰面積比較，依法計算各雜質(zhì)含量。色譜圖 Ⅰ 上雜質(zhì)峰的總面積（包括溶劑峰），減去色譜圖 Ⅱ 上的溶劑峰面積，即為總雜質(zhì)峰的校正面積。l 用于雜質(zhì)檢查時，由于峰面積歸一化法測定誤差大，因此，通常只用于粗略考察供試品中的雜質(zhì)含量。配制好的流動相應通過適宜的（或 )濾膜濾過，以除去雜質(zhì)微粒。貯存溶劑一定要蓋嚴，以防止溶劑揮發(fā)引起組成變化，也防止氧和二氧化碳溶入流動相引起 pH值變化，對分離或分析結(jié)果帶來誤差。供試品溶液在注入液相色譜儀前，一般應經(jīng)適宜的 （或 )濾膜濾過，以減少對色譜系統(tǒng)產(chǎn)生污染或影響色譜分離。除另有規(guī)定外，不宜反向使用，否則會導致色譜柱柱效明顯降低，無法恢復。溫度的突然變化或者機械震動都會影響柱內(nèi)定相的填充狀況；柱壓的突然升高或降低也會沖動柱內(nèi)填料，因此在調(diào)節(jié)流動相流速時應該緩慢進行。 流動相的調(diào)整l 為滿足色譜柱系統(tǒng)適用性要求，試驗中有時需要調(diào)整流動相組分的比例。10%為限。l 例 2 兩組分比例為 2:98 按上述原則，2%的最大相對改變量為 %，故該流動相比例調(diào)節(jié)的范圍是 : :。l 對于 5%的組分，其最大相對改變量為 %，該組分比例調(diào)節(jié)的范圍是 177。l 目前國內(nèi)色譜數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)大致有積分儀和色譜工作站兩種類型，對于傳統(tǒng)的積分儀，由于記錄儀的滿量程是固定的，因此檢測靈敏度的調(diào)節(jié)通常是調(diào)節(jié)檢測器的靈敏度使色譜峰高達到記錄儀滿量程的某個范圍；而對于色譜工作站，由于記錄標尺的滿刻度是可調(diào)的所以通常是調(diào)節(jié)滿刻度的設定值，使色譜峰的量程占滿刻度的某個范圍。要注意溶劑的互溶性，不相混溶的溶劑不能用作梯度洗脫的流動相。例如甲醇和水黏度都小，當二者以相近比例混合時黏度增大很多，此時的柱壓大約是甲醇或水為流動相時的
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