【正文】 百個(gè)基因，控制細(xì)菌的抗藥性 、 固氮 、 抗生素生成 等性狀 . 有切割位點(diǎn) 能復(fù)制并帶著插入的目的基因一起復(fù)制 有標(biāo)記基因的存在，將來可用含青霉素的培養(yǎng)基鑒別。 ? 第二步，核酸酶 H使 RNADNA雜交分子中的 RNA鏈降解，使之變成單鏈的 DNA。 “名師公益課堂 ” 《 主講標(biāo)題 XXXXXX》 高中 XXXX學(xué)科 ③ PCR擴(kuò)增技術(shù)與 DNA復(fù)制的比較 PCR技術(shù) DNA復(fù)制 相同點(diǎn) 原理 DNA復(fù)制 (堿基互補(bǔ)配對(duì) ) 原料 四種游離的脫氧核苷酸 條件 模板、 ATP、酶、原料、引物 不同點(diǎn) 解旋 方式 DNA在高溫下變性解旋 解旋酶催化 場(chǎng)所 體外復(fù)制 (PCR擴(kuò)增儀 ) 主要在細(xì)胞核內(nèi) 酶 熱穩(wěn)定的 DNA聚合酶 (Taq酶 ) 細(xì)胞內(nèi)含有的 DNA聚合酶 結(jié)果 在短時(shí)間內(nèi)形成大量的 DNA片段 形成整個(gè) DNA分子 “名師公益課堂 ” 《 主講標(biāo)題 XXXXXX》 高中 XXXX學(xué)科 (2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建 —— 最核心步驟 ①基因表達(dá)載體的組成 :啟動(dòng)子、目的基因、終止子以及標(biāo)記基因等。 ②基因表達(dá)載體的構(gòu)建方法 提醒 該過程把三種工具 (只有兩種工具酶 )全用 上了 ,是最核心、最關(guān)鍵的一步 ,在體外進(jìn)行。 (4)目的基因的檢測(cè)與鑒定 “名師公益課堂 ” 《 主講標(biāo)題 XXXXXX》 高中 XXXX學(xué)科 目的基因的檢測(cè)與鑒定 檢測(cè)步驟 目的 方法 原理 工具 現(xiàn)象 1 DNA分子雜交技術(shù) 堿基互補(bǔ)配對(duì) 放射性同位素作標(biāo)記的含目的基因的 DNA片段 雜交帶 2 檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA DNA分子雜交技術(shù) 堿基互補(bǔ)配對(duì) 放射性同位素作標(biāo)記的含目的基因的 DNA片段 雜交帶 3 檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì) 抗原 抗體雜交 抗體的專一性 特定抗體 雜交帶 (陽性反應(yīng) ) 檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物的染色體 DNA上是否插入了目的基因 “名師公益課堂 ” 《 主講標(biāo)題 XXXXXX》 高中 XXXX學(xué)科 例題： ,正確的是（ ） DNA技術(shù)所用的工具酶是限制酶、連接酶 和載體 序列 繁殖快 C “名師公益課堂 ” 《 主講標(biāo)題 XXXXXX》 高中 XXXX學(xué)科 ，可生產(chǎn)人類所 需要的產(chǎn)品。 ③ 植物組織培養(yǎng)中用到的有機(jī)碳源一般為蔗糖 ,用 葡萄糖也可以 ,但后者的成本高。 (3)在生物體內(nèi)細(xì)胞并沒有表現(xiàn)出全能性的原因 基因在特定的時(shí)間和空間條件下選擇性表達(dá) ,細(xì)胞 分化為不同的組織、器官。 利用植物分生組織 (如莖尖 、 根尖 )進(jìn)行 培養(yǎng) ,可以使新長(zhǎng)成的植株脫除病毒。 (2)突變體的利用：在植物組織培養(yǎng)過程中 ,由于 培養(yǎng)細(xì)胞一直處于不斷的分生狀態(tài) ,因此容易受到 培養(yǎng)條件和外界壓力 (如射線 、 化學(xué)物質(zhì)等 )的影 “名師公益課堂 ” 《 主講標(biāo)題 XXXXXX》 高中 XXXX學(xué)科 響而發(fā)生突變 。根據(jù)酶的專一性原理 ,用 纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁。 (2)雜種細(xì)胞的類型 有三種： AA、 BB、 AB,符合要求的只有 AB,需要進(jìn) 行篩選。 “名師公益課堂 ” 《 主講標(biāo)題 XXXXXX》 高中 XXXX學(xué)科 植物體細(xì)胞雜交的終點(diǎn)是培育成雜種植株 ,而不是 形成雜種細(xì)胞就結(jié)束 。 “名師公益課堂 ” 《 主講標(biāo)題 XXXXXX》 高中 XXXX學(xué)科 下列關(guān)于細(xì)胞工程的敘述 錯(cuò) 誤 的 是 ( ) A . 電 刺 激 可 誘 導(dǎo) 植 物 原 生 質(zhì) 體 融 合 或 動(dòng) 物 細(xì) 胞 融合 個(gè)細(xì)胞均需酶處理 B淋巴細(xì)胞 融合可制備單克隆抗體 種雜交后代的染色體數(shù)目相同 D “名師公益課堂 ” 《 主講標(biāo)題 XXXXXX》 高中 XXXX學(xué)科 專題 2 細(xì) 胞 工 程 動(dòng) 物 細(xì) 胞 工 程 “名師公益課堂 ” 《 主講標(biāo)題 XXXXXX》 高中 XXXX學(xué)科 一 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù) 二 動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體 三 動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)與克隆動(dòng)物 學(xué) 習(xí) 目 標(biāo) “名師公益課堂 ” 《 主講標(biāo)題 XXXXXX》 高中 XXXX學(xué)科 動(dòng)物細(xì)胞工程 知 識(shí) 網(wǎng) 絡(luò) 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù) 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的操作流程 培養(yǎng)條件 原理 單克隆抗體的操作流程 動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體 動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)與克隆動(dòng)物 動(dòng)物細(xì)胞融合操作流程 動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)操作流程 原理：動(dòng)物細(xì)胞核的全能性 卵母細(xì)胞選擇時(shí)期及原因 “名師公益課堂 ” 《 主講標(biāo)題 XXXXXX》 高中 XXXX學(xué)科 (1)培養(yǎng)條件 ①無菌、無毒的環(huán)境 —— 無菌處理、加抗生素殺 菌、定期更換培養(yǎng)液。 (5)胰蛋白酶在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中的作用包括將 組織分散成單個(gè)細(xì)胞 ,以及將貼壁細(xì)胞從瓶壁上分 離下來 ,這樣做的目的是避免動(dòng)物細(xì)胞的接觸抑制 現(xiàn)象。 (3)2次篩選的目的及方法 ① 在特定的選擇性培養(yǎng)基上 , 未 融 合 的 親 本 細(xì) 胞 ( 漿 細(xì) 胞 和 骨 髓 瘤 細(xì) 胞 ) 和 融 合 的 具 有 同 種 核 的 細(xì) 胞 (BB融合細(xì)胞 、 瘤瘤融合細(xì)胞 )都會(huì)死亡 ,只有融 合的雜種細(xì)胞 ( 雜 交 瘤 細(xì) 胞 ) 才 能 生 長(zhǎng) 。 ②體內(nèi)小鼠腹腔中培養(yǎng) —— 小鼠腹水中提取 (5)原理：細(xì)胞膜的流動(dòng)性和細(xì)胞增殖。 “名師公益課堂 ” 《 主講標(biāo)題 XXXXXX》 高中 XXXX學(xué)科 (3)選卵細(xì)胞做受體細(xì)胞原因 ①大 ,易于操作 。 (5)動(dòng)物體細(xì)胞不能經(jīng)培養(yǎng)直接發(fā)育成完整個(gè)體 , “名師公益課堂 ” 《 主講標(biāo)題 XXXXXX》 高中 XXXX學(xué)科 原因是動(dòng)物體細(xì)胞的全能性受到限制 。 所以 與植物組織培養(yǎng)不同 (只來自于一個(gè)親本 ),克隆動(dòng) 物遺傳物質(zhì)來自 2個(gè)