核酸的結(jié)構(gòu)與功能(3)-預(yù)覽頁
【正文】 bosome RNA, rRNA） 轉(zhuǎn)運 RNA（ transfer RNA, tRNA） 脫氧核糖核酸 deoxyribonucleic acid DNA DNA 主要存在于細(xì)胞核，是染色質(zhì)的主要成分；原核生物 DNA主要存在于類核（ nucleoid）中；在核外也存在有少量 DNA，如線粒體 DNA、葉綠體 DNA以及細(xì)菌的質(zhì)粒（ plasmid）。常見的為甲基化修飾以? m? （ methy）表示，修飾基團(tuán)在 堿基上 的寫在堿基符號的左方 ，修飾基團(tuán)在 戊糖上 的寫在堿基符號的 右方 ，修飾基團(tuán) 個數(shù) 寫在其 右下角 ， 修飾位置 寫在 右上角 。 E. coli DNA 4?106bp， ?106nm； 人 DNA ?109bp ?108nm DNA分子中鏈骨架是固定不變的，脫氧核糖核苷酸的排列順序?qū)嵸|(zhì)上是堿基的排列順序。 線條式 ：以豎線和斜線分別表示糖基和磷酸酯鍵 。以 5‘ 和 3’ 表示鏈的末端及方向，分別置于簡寫式的左右二端。 它可在分子水平上闡述遺傳的基本特征。 ③用電位滴定法證明 DNA的磷酸基可以滴定，而嘌呤和嘧啶的 NH、 CO則不能滴定，因此它們之間形成氫鍵。同一平面的堿基在二條主鏈間形成堿基對。 ⑶ 雙螺旋結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定因素 DNA結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的最主要因素是 堿基堆積力 。 在多核苷酸鏈中，戊糖能折疊成多種構(gòu)象，同時，分子還可繞 CN糖苷鍵以及 3’,5 ’ 磷酸二酯鍵旋轉(zhuǎn)一定角度，使得具有同樣堿基配對的 DNA雙螺旋可以采取不同的構(gòu)象，這種構(gòu)象上的差異稱為多態(tài)性。 33 176。 但這些 DNA都是右手雙螺旋；這些螺旋中都有兩個螺旋溝 ， 分為大溝與小溝 ， 只是它們的寬窄和深淺程度有所不同 。 60176。 在三鏈 DNA中，位于大溝中的多聚嘧啶鏈與雙鏈 DNA中的多聚嘌呤鏈成平行走向，堿基按照 Hoogsteen方式 配對形成TAT， CGC三聯(lián)體。 ② 超螺旋結(jié)構(gòu)的形成 DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)中，一般每轉(zhuǎn)一圈有 10個核苷酸對，平時，雙螺旋總處于能量最低狀態(tài)。在自然條件下共價封閉環(huán)狀 DNA呈負(fù)超螺旋結(jié)構(gòu)。 人的染色體 在細(xì)胞中 DNA與蛋白質(zhì)結(jié)合以螺旋管形態(tài)存在。 染色體上的蛋白質(zhì)包括組蛋白和非組蛋白。使巨大的 DNA鏈包裝成染色體。 從螺線管纖維環(huán)到包裝形成染色體是 DNA壓縮程度最高的階段 ， 估計在 200~240倍 。 由螺線管纖維纏繞形成 染色質(zhì)纖維環(huán) 。 ⑶ tRNA的二級結(jié)構(gòu) 不同的 tRNA具有相似的高級結(jié)構(gòu) ， tRNA分子單股鏈通過自身折疊形成四個螺旋區(qū)和四個環(huán)的基本結(jié)構(gòu)，類似一個三葉草，稱為三葉草結(jié)構(gòu)。 占總 RNA的 75%～ 80%。 5srRNA也有類似三葉草形的結(jié)構(gòu)，其他 rRNA以螺旋或突環(huán)相間排列組成。分子大小差異很大。 ② 核酸是兩性電解質(zhì)，但酸性強，與金屬離子結(jié)合成鹽，也可與堿性蛋白結(jié)合；介質(zhì) pH大于 4時，呈陰離子，電泳時向陽極移動； DNA在 pH4～ 11間最穩(wěn)定，超出此范圍易變性。 純 DNA： OD260/OD280 = 純 RNA： OD260/OD280 = 樣品中如含有蛋白質(zhì)及苯酚等雜質(zhì)，此比值明顯降低。 核酸變性后，粘度降低， 紫外吸收值增高 (增色效應(yīng) )，生物功能消失。 高溫 ： DNA稀鹽溶液加熱到 80~100℃ ，幾分鐘內(nèi)雙螺旋鍵即解開，形成無規(guī)則的線團(tuán)。 疏水作用 ：甲醇可增加堿基的溶解度，三氟醋酸鈉可降低 DNA分子的疏水作用，破壞雙螺旋結(jié)構(gòu)引起變性。 DNA的 Tm值一般在70~85℃ 之間。 待測樣品 DNA的組成是否均一：如樣品中只含有一種 DNA，其 Tm值范圍較窄 ， 若混雜有其它來源的 DNA， 則 Tm值范圍較寬 。 GC堿基對有 3對氫鍵 ， AT堿基對有 2對氫鍵 ， DNA中 (G+C)含量高能增強結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性 ， 破壞 GC間氫鍵需比 AT氫鍵付出更多的能量 ， 故 (G+C)含量高的DNA， 其變性 Tm也高 。復(fù)性后的 DNA其理化性質(zhì)和生物功能都得到部分恢復(fù)。 DNA的復(fù)性不僅受溫度影響，還受 DNA自身特性等其它因素的影響。 Tm 增色效應(yīng) 減色效應(yīng)
教學(xué)課件相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號-1