【正文】 負(fù)載生物的數(shù)量多少和抗熱性如何。即便采用蒸汽濕熱滅菌工藝為過度殺滅法 （the overkill method） ，仍然需要對被滅菌產(chǎn)品的初始菌進(jìn)行周期監(jiān)測，并定期采用生物指示劑測試。一旦微生物負(fù)載的數(shù)量和耐熱能力得以明確，就可以設(shè)計出一個能達(dá)到 SAL 小于 106 的滅菌周期。對生物負(fù)載篩選次數(shù)的要求，取決于歷史資料的質(zhì)量和變化情況，被滅菌產(chǎn)品的種類、生產(chǎn)工藝和滅菌工藝的類型等等。不過，要注意繁殖會改變生物負(fù)載的抗性。在常規(guī)生產(chǎn)中，應(yīng)從每一種生產(chǎn)設(shè)備中抽取具有代表性的產(chǎn)品樣本，并設(shè)計生物負(fù)載監(jiān)測程序，對產(chǎn)品部件及生產(chǎn)中，包括環(huán)境和生產(chǎn)過程中，任何可明顯地影響生物負(fù)載地變化進(jìn)行評定。常用方法是建立能夠提供相同的最小滅菌保證水平的標(biāo)準(zhǔn)周期，再加上一定的安全系數(shù)，不管裝載物的內(nèi)容是什么。如果每次的真空度為 個大氣壓，那么每個脈沖將使滅菌器內(nèi)的空氣減少 90％或者 1 個對數(shù)單位。蒸汽進(jìn)入腔室的時候，空氣和冷凝液一起從腔室底部的蒸汽疏水閥排出。對于多孔/堅硬物品的滅菌，需要確定以下操作參數(shù)（但不僅限于此）：滅菌程序/階段 控制參數(shù) 對參數(shù)的說明外殼溫度/壓力 外殼溫度不能超過或者明顯低于滅菌器腔室的滅菌溫度。比如過濾器，膠塞，膠管，服裝，不銹鋼器皿，填充機械配件，清潔用品等等。如果產(chǎn)品不是水溶液（如一些油性產(chǎn)品） ，需要特別考慮是否適合采用蒸汽濕熱滅菌法。對于蒸汽－空氣混合物（SAM）程序，主要用風(fēng)扇使蒸汽－空氣混合物循環(huán)。再循環(huán)過熱水的方法有很多種，最常用的是通過泵來實現(xiàn)水從滅菌器底部（低于裝載物的區(qū)域）到裝載物區(qū)域上方的噴霧器噴口的不斷循環(huán)。12另外一種循環(huán)過熱水方法是將產(chǎn)品完全浸入水中。為了補償內(nèi)部容器壓力所需的空氣超壓，不同的產(chǎn)品類型（如玻璃瓶和塑料袋）壓力明顯不同。對于溶劑型產(chǎn)品的滅菌，需要確定以下操作參數(shù)（但不僅限于此）：滅菌程序/階段 控制參數(shù) 對參數(shù)的說明外殼溫度/壓力 在過熱水滅菌程序中，外殼溫度/壓力的控制不是決定性的因素?！?~177。但對排除纖維及空隙中的空氣尚不能肯定完全去除，因此主要推薦用于表面接觸式滅菌。下圖為滅菌器腔室溫度/壓力與時間的變化曲線：2 飽和蒸汽－預(yù)真空程序本滅菌工藝適用于多孔/堅硬物品的滅菌。正常情況下，需要利用循環(huán)方式保持均勻的滅菌環(huán)境；滅菌階段：通過飽和蒸汽在規(guī)定的時間內(nèi)維持滅菌器腔室內(nèi)的溫度；若需超壓，應(yīng)仍使用壓縮空氣；冷卻階段：為完成產(chǎn)品冷卻，可使用冷卻的壓縮空氣或進(jìn)行噴水。下圖為滅菌器腔室溫度/壓力與時間的變化曲線：20附錄二 水浴式滅菌器的驗證方案示例滅菌器是大容量注射劑生產(chǎn)中的關(guān)鍵設(shè)備。驗證的組織機構(gòu)（驗證小組）開始工作以后，首先要確定滅菌柜的方案起草、會簽人員，然后方案批準(zhǔn)后實施。性能確認(rèn)（產(chǎn)品滅菌工藝的確認(rèn)）具備以下內(nèi)容：見本文 。例如：－檢查并確認(rèn)該設(shè)備所用材質(zhì)、設(shè)計、制造符合 GMP 要求－檢查改設(shè)備的文件資料齊全且符合 GMP 要求－檢查并確認(rèn)設(shè)備的安裝符合要求，公用工程系統(tǒng)配套齊全且符合設(shè)計要求－確認(rèn)該設(shè)備的各種儀器、一般經(jīng)過校正且合格－確認(rèn)該設(shè)備的各種控制功率符合設(shè)計儀器－確認(rèn)該設(shè)備在穩(wěn)定的操作范圍內(nèi)能穩(wěn)定的運行且能達(dá)到設(shè)計標(biāo)準(zhǔn)－確認(rèn)該設(shè)備的滅菌能力達(dá)到工藝要求－為設(shè)備維修、改造和再驗證提供數(shù)據(jù)資料2, 安裝確認(rèn)： 文件的確認(rèn)文件名稱 存放地點 持有人操作手冊安裝計劃維修指南備件清單壓力容器檢驗操作 SOP培訓(xùn)記錄安裝圖輔助設(shè)施清單及性能報告 主要部件檢查（最好填寫詳細(xì)信息、型號等）部件名稱 設(shè)計指標(biāo) 是否有校驗證書及編號 結(jié)論腔體22水噴淋設(shè)施熱交換器循環(huán)泵空氣過濾器滅菌車監(jiān)控探頭記錄探頭其他 安全系統(tǒng)檢查（最好填寫詳細(xì)信息、型號等）部件名稱 設(shè)計指標(biāo) 是否有校驗證書及編號 結(jié)論腔體安全閥門封條門封壓力控制系統(tǒng)壓縮空氣連鎖腔室壓力開關(guān)報警系統(tǒng)溫度開關(guān)緊急制動開關(guān)水位控制開關(guān)其他 儀表的檢查與校驗（最好填寫詳細(xì)信息、型號等）部件名稱 生產(chǎn)廠家 是否有校驗證書及編號 結(jié)論溫度記錄儀監(jiān)控/記錄溫度或壓力探頭真空開關(guān)壓力表23溫度表其他 公用系統(tǒng)的連接檢查（最好填寫詳細(xì)信息、型號等）名稱 設(shè)計指標(biāo) 安裝情況 結(jié)論電源電壓壓縮空氣水（接觸產(chǎn)品）蒸汽冷卻水（不接觸產(chǎn)品）管道材料/連接蒸汽過濾器冷卻水過濾器真空系統(tǒng)其他 控制系統(tǒng)檢查（最好填寫詳細(xì)信息、型號等）部件名稱 型號或系列號 設(shè)計指標(biāo) 結(jié)論模擬輸入模擬輸出數(shù)字輸入/輸出PLC 模塊通信卡打印機軟件記錄紙其他3, 運行確認(rèn)（功能測試）包含真空度測試、腔室泄漏測試以及對規(guī)定的滅菌程序進(jìn)行測試，確認(rèn)符合規(guī)定。 計算 F0 值，結(jié)果分析與評價。 偏差分析偏差報告表測 試 中 出 現(xiàn) 偏 差 的 位 置 : 偏 差 號 .偏 差 描 述 :發(fā) 現(xiàn) 偏 差 人 /日 期 : 審 核 人 /日 期 :調(diào) 查 結(jié) 果 , 整 改 措 施 和 總 結(jié) :填 寫 人 /日 期 : 審 核 人 /日 期 :負(fù) 責(zé) 人 : 預(yù) 計 解 決 日 期 :總 結(jié) :編 寫 人 : 日 期 :25批 準(zhǔn) 人 /日 期 : 批 準(zhǔn) 人 /日 期 :工 程 部 質(zhì) 量 保 證 部注: 如果需要本頁可以復(fù)制 . 但應(yīng)注明頁碼及總頁數(shù) 測試記錄表測試項目清單 完成人/日期 檢查人/日期 是否符合 備注空載熱分布裝載熱分布（最小裝載）裝載熱分布（典型裝載）裝載熱分布（最大裝載）熱穿透試驗（最小裝載）熱穿透試驗（典型裝載）熱穿透試驗（最大裝載）生物指示劑試驗挑戰(zhàn)試驗 參加驗證人員清單姓名 職務(wù) 參加項目 簽字 備注26 報告附件清單文件名稱 頁數(shù) 備注人員資質(zhì)證書驗證依據(jù)原始記錄儀器校驗報告附錄三 歐盟醫(yī)藥產(chǎn)品管理法規(guī)第四卷 歐盟有關(guān)人用和獸用醫(yī)藥產(chǎn)品GMP 指南 附錄 1 無菌藥品生產(chǎn) 有關(guān)滅菌方面的條款摘錄? 原則? 為降低微生物、微粒和熱原污染的風(fēng)險，無菌藥品的生產(chǎn)應(yīng)有各種特殊要求。? 無菌藥品生產(chǎn)所需的潔凈區(qū)一般可分為 4 個級別：? A 級 高風(fēng)險操作區(qū)，如：灌裝區(qū)，放置膠塞桶、敞口安瓿瓶、敞口西林瓶的區(qū)域及無菌裝配/連接操作的區(qū)域。在密閉的隔離操作器或手套箱內(nèi)，可使用單向流或較低的風(fēng)速。微生物污染風(fēng)險比較高時，如容易長菌的產(chǎn)品、配制后要等相當(dāng)長時間方可滅菌的產(chǎn)品或因故主要不在密閉容器內(nèi)進(jìn)行配制操作的產(chǎn)品，配制必須在 C 級環(huán)境中進(jìn)行。80．應(yīng)監(jiān)控滅菌前產(chǎn)品的微生物污染水平并確立控制標(biāo)準(zhǔn)，此標(biāo)準(zhǔn)與所采用滅菌方法的效果相關(guān)。非燃性氣體應(yīng)通過除菌過濾器進(jìn)入潔凈區(qū)。應(yīng)特別注意那些在現(xiàn)行的歐洲藥典中沒有收載的滅菌方法或者被滅菌產(chǎn)品不是一種簡單的水溶液或油溶液時所采用滅菌方法。應(yīng)對工藝的有效性定期進(jìn)行再驗證（一年至少一次） 。86．應(yīng)通過驗證確立所有滅菌程序的裝載方式。88．應(yīng)當(dāng)有明確區(qū)分已滅菌產(chǎn)品和未滅菌產(chǎn)品的方法。應(yīng)把滅菌記錄作為該批產(chǎn)品放行與否的一個依據(jù)?？赡軛l件下，在驗證過程中，應(yīng)在同一部位安放另一支獨立的測溫探頭作對照。93. 在滅菌高溫階段后，應(yīng)有措施防止冷卻過程中已滅菌品遭受污染。如采用自控和監(jiān)測系統(tǒng)，該系統(tǒng)應(yīng)經(jīng)過驗證，以確保符合關(guān)鍵工藝的要求。如滅菌程序中包括抽真空操作，則應(yīng)經(jīng)常對腔室作檢漏試驗。蒸汽中含添加劑的量不應(yīng)給產(chǎn)品或設(shè)備造成污染。本文中將主要提到目前廣泛被應(yīng)用的兩種滅菌方法，即濕熱滅菌和干熱滅菌。1． 質(zhì)量控制和驗證驗證研究的目的是為了論證滅菌程序的效用。在蒸汽滅菌程序中，從滅菌腔體內(nèi)去除空氣是一個重要的環(huán)節(jié)。應(yīng)該評估滅菌器或滅菌車（運用于在線滅菌）內(nèi)熱量難以達(dá)到的潛在點。對于均勻性的研究，應(yīng)該通過校驗后的測量設(shè)備來完成。一般來說，生物指示劑應(yīng)該貼近溫度探頭放置，以便來評估生物熱致死率與基于熱輸入而預(yù)測得出的熱致死率之間的關(guān)系。對于滅菌過程，應(yīng)該評價 10－6 或更好的滅菌水平。變更控制應(yīng)該充分地落實到裝載形式改變或者滅菌器的變化上去。例如，我們推薦該程序應(yīng)該包括以下幾點：? 溫度和壓力監(jiān)測設(shè)備應(yīng)該在已適宜的周期內(nèi)檢定。生物指示劑應(yīng)該在適宜環(huán)境下存放。? 如果適用，也要校正測量蒸汽純凈度的儀器。在設(shè)備控制方面，應(yīng)該在那些控制點放置測量儀器，從而可以迅捷的偵測到不可預(yù)計變化的出現(xiàn)。30附錄五 PDA Validation of Moist Heat Sterilization Pr0cesses: Cycle Design, Development Qualification and Ongoing Control Technical Report No. 1 (2022 Revision) of PDA 摘要（濕熱滅菌選擇決策樹） 否 是產(chǎn)品或包裝材料是否耐熱？31采用過度殺滅法被滅菌物品的類型多孔/堅硬物品 密封的液體產(chǎn)品空氣去除挑戰(zhàn)試驗？ 需要空氣超壓？合適的預(yù)真空滅菌器？ 能否使用過熱水法？采用生物負(fù)載法 附錄六 采用殘存概率法時 D 值的測試及計算參閱 ISO 111381 Sterilization of health care products Biological indicators Part 1:General requirementsISO 111383 Sterilization of health care products Biological indicators Part 3: Biological indicator for moist heat sterilization processes使用預(yù)真空法使用重力置換法 使用過熱水法或蒸汽空氣混合物法使用蒸汽空氣混合物法使用任意濕熱法