正交設(shè)計(jì)優(yōu)化蛹蟲草液體菌種培養(yǎng)基的研究-預(yù)覽頁(yè)
【正文】 氏菌等革蘭氏陰性菌無(wú)作用。蛹蟲草所含蟲草活性成分非常豐富，如多糖。目前已查明蛹蟲草含有21種微量元素，其中硒、鐵、鋅、錳、鉬、鈣等有益元素含量豐富；所含維生素類物質(zhì)，如VA、VB1VE、VDVBVB6及VC等含量顯著超過天然冬蟲夏草。蛹蟲草的生態(tài)適應(yīng)幅度大，因而在北回歸線以南大多數(shù)地區(qū)均有分布，從真菌區(qū)系上看，蛹蟲草是一種世界性分布的廣布種，也是我國(guó)分布最廣的蟲草之一。正交設(shè)計(jì)優(yōu)化蛹蟲草液體菌種培養(yǎng)基的研究引言蛹蟲草[Cordyceps militaris (L.) Link]，別名北冬蟲夏草、北蟲草，屬麥角菌目、麥角菌科、蟲草屬(Cordyceps)，蛹蟲草是該屬的模式種[1]。到了夏季，自其尸體之上生出子座，形似草，夏至前后采集而得。蛹蟲草所含的蛋白質(zhì)由19種氨基酸組成，不僅含有人體必須的全部8種必需氨基酸，而且含量較高，%。近年來(lái)研究證明，蛹蟲草所含蟲草活性成分如蟲草酸、蟲草素、蟲草多糖、超歧氧化酶(SOD)、腺苷等含量明顯高于天然冬蟲夏草，因此具有十分重要的營(yíng)養(yǎng)、滋補(bǔ)及藥用價(jià)值，被譽(yù)為是蟲草屬真菌中的后起之秀。孟兆麗等通過研究蛹蟲草多糖對(duì)小鼠的特異性、非特異性免疫的影響，表明多糖對(duì)小鼠的特異性、非特異性免疫均有顯著增強(qiáng)作用，同時(shí)多糖還能通過免疫調(diào)節(jié)，達(dá)到治療或控制腫瘤的目的；且多糖有促進(jìn)SOD酶活力的作用，對(duì)延緩衰老有顯著意義。說(shuō)明蛹蟲草有與冬蟲夏草相同的鎮(zhèn)靜、催眠、抗缺氧、抗驚厥的藥理作用，另蛹蟲草有抗實(shí)驗(yàn)性心律失常作用[4]。而蛹蟲草是獲得蟲草素的主要來(lái)源。在蟲草屬中，蛹蟲草獨(dú)特的醫(yī)療保健，成為國(guó)內(nèi)外真菌界、醫(yī)療界、生物界、食品界等部門多年來(lái)研究開發(fā)的重點(diǎn)。用液體菌種栽培蛹蟲草和用試管母種、固體原種栽培相比， d。然而，不同濃度梯度的碳氮源培養(yǎng)的蛹蟲草液體菌種，在性狀上有何差異，使用效果如何，研究報(bào)道較少。1 材料和方法 材料 供試菌種蛹蟲草菌種 藥品與試劑 馬鈴薯，葡萄糖，蛋白胨，瓊脂，磷酸二氫鉀，硫酸鎂等。 主要儀器設(shè)備JA5002 電子天平 上海精密電子儀器有限公司 全自動(dòng)立式電熱壓力蒸汽滅菌鍋滅菌過程中， Mpa排兩次冷空氣，然后再121℃溫度下滅菌30 min。菌種同步的目的是為了保證接種時(shí)接種量和種子菌齡趨于一致，最大限度地減少實(shí)驗(yàn)誤差。每處理3個(gè)重復(fù)。本試驗(yàn)主要進(jìn)行不同蛋白胨濃度對(duì)菌絲生長(zhǎng)的研究。培養(yǎng)基配方見表2。 搖床培養(yǎng)接種后把報(bào)紙取下，只保留八層紗布，首先在26 ℃恒溫箱中靜置培養(yǎng)24小時(shí)，以利于菌種萌發(fā)。培養(yǎng)5 d后測(cè)菌絲體干重。然后用蒸餾水沖洗3遍，抽濾至不滴水即可，將菌絲體刮移至在已烘干和稱重的培養(yǎng)皿上。以菌絲生物量為檢測(cè)指標(biāo)，取平均值，篩選出蛹蟲草菌種液體培養(yǎng)基最適配方。綜合菌絲球的數(shù)量和菌絲球直徑，當(dāng)葡萄糖濃度為20 g/L（C5）時(shí)，培養(yǎng)獲得的液體菌種質(zhì)量最優(yōu)。而當(dāng)?shù)鞍纂藵舛葹?6 g/L（N9）時(shí)菌絲球數(shù)量反而減少。 不同碳氮源濃度對(duì)蛹蟲草菌絲球干重的影響 不同碳源濃度對(duì)蛹蟲草菌絲干重的影響眾所周知，生命的基本單元氨基酸、核苷酸是以碳元素做骨架變化而來(lái)的。不同碳源濃度對(duì)蛹蟲草菌絲干重的影響試驗(yàn)結(jié)果見圖3。 不同氮源濃度對(duì)蛹蟲草菌絲干重的影響氮源的基本作用是為微生物生長(zhǎng)所需的核酸和蛋白質(zhì)的合成提供原料。圖4 氮源濃度對(duì)菌絲體干重的影響從圖4可以看出培養(yǎng)基的蛋白胨含量從0~14 g/L之間，菌絲體干重呈遞進(jìn)關(guān)系，也就是說(shuō)在此范圍內(nèi)，菌絲生長(zhǎng)量是隨著含氮量的增加而增加的，而在蛋白胨含量為16 g/L時(shí)菌絲體干重基本與蛋白胨含量為14g/L時(shí)持平，故綜合考慮產(chǎn)量、成本，以蛋白胨濃度為14 g/L為蛹蟲草液體菌種培養(yǎng)基的最佳氮源濃度。比較不同組合之間蛹蟲草菌絲體的干重，培養(yǎng)蛹蟲草菌絲的最優(yōu)組合為A3B1C3D2，100 mL g，明顯高于其他組合。正交試驗(yàn)結(jié)果表明，培養(yǎng)基中不同營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)對(duì)蛹蟲草菌絲生長(zhǎng)的影響效果不同，碳源是最重要的影響因素，不同營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)對(duì)菌絲生長(zhǎng)影響作用從大到小依次為A因素B因素C因素=D因素，即碳源氮源無(wú)機(jī)鹽。盡我所知，除文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，不包含其他人或組織已經(jīng)發(fā)表或公布過的研究成果，也不包含我為獲得 及其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或?qū)W歷而使用過的材料。除了文中特別加以標(biāo)注引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫的成果作品。本人授權(quán) 大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編本學(xué)位論文。本次畢業(yè)設(shè)計(jì)大概持續(xù)了半年，現(xiàn)在終于到結(jié)尾了。沒有他們的幫助，我將無(wú)法順利完成這次設(shè)計(jì)。再次對(duì)周巍老師表示衷心的感謝。致 謝四年的大學(xué)生活就快走入尾聲，我們的校園生活就要?jiǎng)澤暇涮?hào)，心中是無(wú)盡的難舍與眷戀。學(xué)友情深，情同兄妹。是他們?cè)谖耶厴I(yè)的最后關(guān)頭給了我們巨大的幫助與鼓勵(lì)，給了我很多解決問題的思路，在此表示衷心的感激。14
環(huán)評(píng)公示相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1