《原生質(zhì)體融合》ppt課件-預(yù)覽頁
【正文】 種成為現(xiàn)實(shí) ◆打破了物種間的界限 原生質(zhì)體融合的意義 植物體細(xì)胞雜交的幾個重要進(jìn)展 1960年 Kocking用酶法制備高等植物原生質(zhì)體首次獲得成功； 1971年 Takebe首次從離體煙草原生質(zhì)體培養(yǎng)中獲得再生完整植株； 1972年 Carlson首次獲得粉藍(lán)煙草和郎氏煙草的細(xì)胞雜種，這是第一個植物體細(xì)胞雜種； 1974年 Kao將聚乙二醇（ PEG）誘導(dǎo)融合法應(yīng)用于植物細(xì)胞融合并建立了相應(yīng)的融合技術(shù)； 1978年 Melchers獲得第一個屬間體細(xì)胞雜種（番茄＋馬鈴薯）； 1981年 Zimmerman發(fā)明了電融合儀，并首次提出了電融合概念； 1987年 Schweiger建立了單對原生質(zhì)體電融合技術(shù)程序。這一過程稱為原生質(zhì)體融合或細(xì)胞雜交。 電融合儀 Fusion phases of oat（燕麥） protoplasts (Avena sativa) 微電極法： 指利用改變電場誘導(dǎo)原生質(zhì)體彼此相連成串，再施以瞬間強(qiáng)脈沖電壓促使質(zhì)膜發(fā)生可逆性電擊穿，達(dá)到原生質(zhì)體融合的方法。 當(dāng) PEG分子鏈足夠長時，它在相鄰原生質(zhì)體表面之間有分子橋、改變膜表面物理化學(xué)性質(zhì)和增加類脂膜流動性作用，引發(fā)原生質(zhì)體的粘連。 加入 。 誘導(dǎo)細(xì)胞融合的機(jī)理： 病毒被膜上的兩種糖蛋白可和細(xì)胞膜表面的糖蛋白發(fā)生相互作用，從而使兩個細(xì)胞可以互相接觸，在電鏡下觀察到在相接觸的相鄰細(xì)胞表面之間將產(chǎn)生一些微小的細(xì)胞質(zhì)橋。 根據(jù)融合時細(xì)胞的完整程度，原生質(zhì)體融合分為兩大類：對稱融合和非對稱融合 對稱融合： 兩個完整的細(xì)胞原生質(zhì)體的融合 非對稱融合： 利用物理或化學(xué)的方法使某一親本的核或細(xì)胞質(zhì)失活后再進(jìn)行融合。 利用或人為的造成細(xì)胞生長或分化能力上的差異進(jìn)行篩選。形態(tài)標(biāo)記簡單直觀，但是標(biāo)記少、多態(tài)性差、易受環(huán)境條件和其它修飾基因的影響，并且許多性狀為數(shù)量性狀，由幾個位點(diǎn)控制，表現(xiàn)為一個范圍，而不是簡單的性狀差異。分析操作簡便，所需材料較少 。最大優(yōu)點(diǎn)是可以顯示在體細(xì)胞雜種中哪條染色體來源于這個親本，哪條染色體來源于另一個親本，因而更準(zhǔn)確、直觀。 番茄 +馬鈴 薯 ? 1978年德國科學(xué)家梅歇爾斯等人把馬鈴薯 (potato)和番茄(tomato)的原生質(zhì)體融合獲得了體細(xì)胞雜種“泡馬豆”（ pomato)雜交株同時具有馬鈴薯和番茄的一些形態(tài)特征，但沒有產(chǎn)生可結(jié)實(shí)的花、果實(shí)和真正意義上的塊莖，不能產(chǎn)生經(jīng)濟(jì)效益。 細(xì)胞核的分離 ：勻漿法 核移植的方法 ：夾層離心法、 PEG法、脂質(zhì)體包裹融合移植法、顯微注射法 意義： 有助于更精確地研究細(xì)胞器遺傳學(xué)和種間細(xì)胞器互作
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