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第十一章生物素-親合素放大技術(shù)-預(yù)覽頁(yè)

 

【正文】 ?長(zhǎng)臂活化生物素 ( BCNHS): 生物素和 N羥基丁二酰亞胺之間添 加了兩個(gè) 6氨基已糖分子基團(tuán),形 成連結(jié)臂,生物素與大分子基團(tuán)的 距離 標(biāo)記蛋白質(zhì)醛基的活化生物素 生物素酰肼 (BHZ): 水合肼與生物素的合成物 主要用于標(biāo)記偏酸性糖蛋白 肼化生物胞素 (BCHZ) :生物素與賴(lài)氨酸連接 后,再與無(wú)水肼反應(yīng)而成。 ? 活化生物素通過(guò)側(cè)鏈與蛋白分子連接; ? 一個(gè)蛋白分子可被多個(gè)生物素標(biāo)記-多價(jià)性; ? 對(duì) BNHS多標(biāo)記抗體 , BHZ則多標(biāo)記微酸性抗原; 抗原、抗體標(biāo)記后活性不變; ? 可對(duì)標(biāo)記材料(如酶)標(biāo)記:堿性磷酸酶標(biāo)記后 活性將降低; 二、生物素標(biāo)記蛋白質(zhì) ? 選擇活化生物素: 依抗原或抗體分子所帶可標(biāo)記基團(tuán) 的種類(lèi)(氨基、醛基或巰基)以及分子的酸堿性; ? 控制生物素: 蛋白質(zhì)比例 生物素: IgG 用量比 (mg/mg)宜為 2:1, IgG應(yīng)用濃度 ~5μg/ml。 一、生物素 親合素系統(tǒng)基本類(lèi)型及原理 BAB法: Ag+BE AgAbB AE A BBABC 特點(diǎn) :將 BAB法中的 A先與 BE結(jié)合,制備成復(fù)合物ABC 二、生物素 親合素系統(tǒng)在酶免疫測(cè)定中的應(yīng)用 BAS在 ELISA中的應(yīng)用 生物素 親合素系統(tǒng)在均相酶免疫測(cè)定 三、生物素 親合素系統(tǒng)在熒光免疫技術(shù)中的應(yīng)用 BAS用于熒光抗體技術(shù),通常采用 BA法,即用熒光素直接標(biāo)記親合素(或鏈酶親合素);也可采用游離親合素(或鏈酶親合素)搭橋,兩端分別連接生物素化抗體和熒光素標(biāo)記的生物素( BAB法)或熒光標(biāo)記的抗親合素(或鏈酶親合素)抗體的夾心法。
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