【正文】 the means (177。MOMIPP對(duì)亞融合與融合的成纖維細(xì)胞的影響差異提供了一個(gè)可能的解釋，這意味著，以空泡為典型的內(nèi)體販運(yùn)的中斷可能在不分裂的細(xì)胞中比在正常增殖的細(xì)胞中具有相對(duì)較好的耐受性。在所有其他細(xì)胞測(cè)試實(shí)驗(yàn)中，到24小時(shí)10μMMOMIPP明顯誘導(dǎo)成纖維細(xì)胞空泡化〔圖5G〕。為了確定對(duì)腫瘤細(xì)胞造成最大限度毒性作用的濃度的MOMIPP是否也會(huì)對(duì)正常細(xì)胞產(chǎn)生毒性，我們用10μMMOMIPP處理人類乳腺上皮細(xì)胞〔HMEC〕。 SD from three separate cultures.Figure 3. Comparison of the abilities of MOMIPP and MIPP to induce the morphological hallmarks of methuosis. One day after plating, U251 GBM cells were treated with MOMIPP or MIPP at final concentrations of (A) or 10 μM (B). Controls received an equivalent volume of vehicle (DMSO). Cells were observed by phase contrast microscopy on three sequential days after addition of the pounds, without changing the medium or replenishing the pounds. Methuosis is characterized by extensive accumulation of phaselucent cytoplasmic vacuoles, with eventual cell rounding and detachment from the substratum as viability Figure 4. Comparison of the abilities of MOMIPP and MIPP to inhibit survival of U251 GBM cells in colonyforming assays. (A) Cells were plated for colonyforming assays as described in the Experimental Section. One day after plating the cells, MOMIPP (●) or MIPP (■) was added to the medium at the indicated concentrations, and cells were maintained in the presence of the pounds for 48 h. Thereafter, the pounds were removed, and colonies 50 cells were counted after 2 weeks. Each point represents the mean (177。當(dāng)細(xì)胞處理2天時(shí)，MOMIPP顯??然在減少細(xì)胞集落形成方面比MIPP有效〔圖4A〕。在用MOMIPP處理的組中細(xì)胞數(shù)量的減少以大規(guī)模早期細(xì)胞空泡的出現(xiàn)和底層非活性細(xì)胞的損傷的形式表現(xiàn)。分別添加每個(gè)化合物到指定的濃度，保持2天，并且在第一天后要補(bǔ)充原料。 (2) 5 N NaOH, 99%. Compound 26: 4acetylpyridine, piperidine, MeOH, reflux, 34%. Compound 27: 4acetylpyridine, piperidine, MeOH, reflux, 21%.化合物19〔MOMIPP〕與化合物2〔MIPP〕生物活性比擬上述研究確定化合物19是最有力誘導(dǎo)methuosis的化合物。C, 93%. Compound 23: methyl4(bromomethyl)benzoate, NaOH, TBAB, CH2Cl2, RT, 63%. Compound 24: (1) POCl3, DMF, 0 176。相關(guān)反響在溫和條件根底下〔碳酸氫鈉〕生產(chǎn)了酯24，而在5 N的氫氧化鈉條件下產(chǎn)生酸25。因此，一個(gè)新的路線即在引入吡啶基團(tuán)〔方案2〕前官能化吡啶就產(chǎn)生了。我們?cè)诓煌琾Ka值的多個(gè)基地進(jìn)行了篩選，從K2CO3到Cs2CO3，以及乙胺，tetramethylguanidine，1,8 二氮雜雙環(huán)[]螺7烯〔DBU〕，氫化鈉。因此，我們做了一組在生理PH時(shí)增加極性的實(shí)驗(yàn)，用來(lái)探討改變過(guò)的吲哚5位基團(tuán)所帶來(lái)的影響。此外，甲基吲哚氮的化合物13與NaH/CH3I在二甲基甲酰胺〔DMF〕〔方案1D〕制造20時(shí)產(chǎn)生了一種化合物，它能誘發(fā)一些胞質(zhì)空泡化，但只有溫和影響細(xì)胞活力〔見表1〕。假設(shè)其失去活性那么證實(shí)吡啶氮〔見表1〕的必要性。如表1所示，盡管他們?cè)诙唐诘脑鲩L(zhǎng)/可行性實(shí)驗(yàn)中細(xì)胞毒性不一致。C, 90%。元和正射類似物10和11，以及苯乙酮類似物9，均在誘導(dǎo)methuosis方面與MIPP相比相對(duì)無(wú)效。 〔2〕48小時(shí)時(shí)結(jié)束用3 〔4,5 二甲基2 基〕2,5 二苯基溴化四唑〔MTT〕法對(duì)細(xì)胞存活率評(píng)估，并在第一個(gè)24小時(shí)。因此，一種類似物的初始構(gòu)成被合成，以用來(lái)研究調(diào)查吡啶氮的位置對(duì)生物活性的影響。我們首先從比擬MIPP和市售的幾個(gè)相關(guān)化合物〔圖1化合物38〕誘導(dǎo)methuosis的活性開始?；衔?被分配的縮寫是MIPP，即3 〔2 甲基1H吲哚3 基〕1 〔4 吡啶基〕2丙烯1。我們發(fā)現(xiàn)，化合物1幾個(gè)小時(shí)內(nèi)在膠質(zhì)瘤細(xì)胞引起廣泛空泡，48小時(shí)內(nèi)造成細(xì)胞活力的重大損失。查耳酮由一個(gè)1,3 二苯基2 丙烯1框架組成，這種框架是黃酮類天然產(chǎn)物的前體組成。結(jié)果SARs由于我們開始尋求可能引發(fā)methuosis的 druglike小分子，我們注意到Kirchhausen和同事〔11〕寫的一個(gè)報(bào)告，他們描述了被稱為vacuolin1的分子及一些其他三嗪類化合物，這些化合物能夠抑制Ca2+依賴溶酶體胞吐。Methuosis本質(zhì)特點(diǎn)在于GBM細(xì)胞，它是被激活的Ras和Rac GTP酶異位表達(dá)而觸發(fā)這種形式的細(xì)胞死亡的場(chǎng)所。在methuosis〔8，9〕，回收的減值和溶酶體導(dǎo)向販運(yùn)macropinocytotic囊泡的作用把他們鎖定在中間階段，在此他們?nèi)诤隙鸩叫纬奢^大的液泡。〔3，4〕此外，膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞通過(guò)提高他們修復(fù)DNA損傷的能力而獲得對(duì)烷化劑的抗藥性。介紹盡管在開展中國(guó)家針對(duì)特有的某些類型的癌癥細(xì)胞的調(diào)控途徑的治療藥物有了最新進(jìn)展，許多腫瘤術(shù)后輔助治療的重要支柱仍然是輻射和DNA烷化劑。在此，我們描述了直接相關(guān)化合物庫(kù)的合成及構(gòu)效關(guān)系，提供了深入了解兩個(gè)芳環(huán)系統(tǒng)的奉獻(xiàn)，并強(qiáng)調(diào)了一個(gè)強(qiáng)有力的衍生物，3 〔5 甲氧基2 甲基1H吲哚3 基〕1 〔4 吡啶基〕2丙烯1〔即，MOMIPP〕在微摩爾濃度這樣低的濃度下可誘導(dǎo)methuosis。最近，我們描述了1查耳酮化合物，3 〔2 甲基1H吲哚3 基〕1 〔4 吡啶基〕2丙烯1〔即，MIPP〕，它可以誘導(dǎo)methuosis在神經(jīng)母細(xì)胞瘤和其他類型的癌細(xì)胞發(fā)生。因此，它可能可以作為一種能夠在癌癥中通過(guò)methuosis形式來(lái)促進(jìn)細(xì)胞凋零的藥物原型，這種原理與傳統(tǒng)細(xì)胞死亡〔如細(xì)胞凋亡〕的機(jī)理不同。〔2〕由于GBM細(xì)胞通常在海港抑癌基因的突變〔例如，PTEN，P53，PRB〕，他們是相對(duì)不敏感的凋亡刺激。〔6〕后者當(dāng)膜皺褶〔偽足〕附上許多口袋狀細(xì)胞外液，并內(nèi)化時(shí)形成。methuosis也是caspase獨(dú)立的，因?yàn)樗荒鼙粡V譜蛋白酶抑制劑如ZVADFMK阻止。在此，我們報(bào)告了相關(guān)化合物庫(kù)合成及構(gòu)效關(guān)系〔SAR〕的研究從而導(dǎo)出〔1〕定義的主要特點(diǎn)，為誘導(dǎo)methuosis活動(dòng)，〔2〕確定改進(jìn)生物活性的衍生物以及開展一個(gè)可能適合在未來(lái)目標(biāo)識(shí)別工作中用作光親探測(cè)器的疊狀類似物做準(zhǔn)備。這種化合物的結(jié)構(gòu)被描繪在圖1〔化合物1〕。〔1214 〕這促使我們疑心化合物1可能代表了一種新型的查耳酮，它可以通過(guò)誘導(dǎo)methuosis殺死癌細(xì)胞。它引起的空泡比化合物1引起的更大、更多?！?10〕Figure 1. Structures of pounds 1 and 2, initially found to be active ind