dna重組培訓(xùn)講義-全文預(yù)覽
【正文】 免疫球蛋白基因的重組 第三節(jié) Transposition ( 轉(zhuǎn)座作用） ? 基因組可通過獲得新序列而進(jìn)化，也可通過現(xiàn)存序列的重排實現(xiàn)這一目的。 二、細(xì)菌的特異位點重組 ? 鼠傷寒沙門氏桿菌（ Salmonella typhimurium）由鞭毛蛋白決定的 H抗原有兩種，分別為 H1鞭毛蛋白和H2鞭毛蛋白。 ? 切除需要 Xis蛋白，它抑制整合作用。 ? 當(dāng) INT和 IHF蛋白結(jié)合在 att P位點時形成的復(fù)合物稱為整合體（ intasome）。 ? 其中 O序列是 att B和 att P所共有的，所以稱為核心序列（ core sequence) ? 重組后形成兩個新att位點， att L (BOP’ ) 和 att R (POB’ ) ? 位點專一性重組反應(yīng)的定向特征取決于重組位點的識別。 λ噬菌體的整合發(fā)生在噬菌體和宿主染色體的特定位點，因此是一種特異位點重組。重組位點以相同方向存在于同一 DNA分子上，重組發(fā)生切除；在不同分子上，重組發(fā)生整合 一、 λ噬菌體 DNA的整合與切除 ? λ噬菌體 DNA進(jìn)入宿主大腸桿菌細(xì)胞后存在溶原和裂解兩條途徑，二者的最初過程是相同的，都要求早期基因的表達(dá)，為溶原和裂解途徑的歧化做好準(zhǔn)備。它們的作用包括某些基因表達(dá)的調(diào)節(jié)、發(fā)育過程中程序性 DNA重排，以及有些病毒和質(zhì)粒 DNA復(fù)制循環(huán)過程中發(fā)生的整合與切除等。 （ c） RuvA四聚體的電荷分布，藍(lán)色表示正電荷，紅色表示負(fù)電荷，注意正電荷位于四聚體的表面，有四個負(fù)電荷區(qū)域位于其中心。 （ a） RuvA四聚體的圖解。 Chi 位點GCTGGTGG CGACCACC sites Ruv A B C ? Ruv A 識別 Holliday結(jié)構(gòu)連接點。 Rec A催化的單鏈同化 ? RecA蛋白分子質(zhì)量為 38 000da，它與單鏈 DNA結(jié)合形成的螺旋纖絲每圈含 6個單體，螺旋直徑 10nm，堿基間距 。 RecA有兩個主要的功能：誘發(fā) SOS反應(yīng)和促進(jìn) DNA單鏈的同化（ assimilation）。 細(xì)菌的細(xì)胞融合 在有些細(xì)菌的種屬中可發(fā)生由細(xì)胞質(zhì)膜融合導(dǎo)致的基因轉(zhuǎn)移和重組。 遺傳轉(zhuǎn)化 ? 遺傳轉(zhuǎn)化 （ geic transformation）是指細(xì)菌品系由于吸收了外源 DNA（轉(zhuǎn)化因子）而發(fā)生遺傳性狀的改變現(xiàn)象。能夠促使染色體基因轉(zhuǎn)移的接合質(zhì)粒稱為致育因子（ fertility factor），簡稱性因子或 F因子。細(xì)菌的基因轉(zhuǎn)移主要有 4種機(jī)制：接合（ conjugation）、 ? 轉(zhuǎn)化（ transformation）、 ? 轉(zhuǎn)導(dǎo)（ transduction）、 ? 細(xì)胞融合（ cell fusion）。 ? 但無論哪種拆分方式都說明一個原則，即鏈交換后總會在兩條 DNA分子上留下一段異源雙鏈區(qū)，但側(cè)翼序列的重組未必與之同時發(fā)生。 ? 根據(jù)鏈裂斷切開的方式不同，得到的重組產(chǎn)物也不同。重組酶能以兩個 DNA分子中任何一對同源序列作底物進(jìn)行交換。 ? 真核生物非姐妹染色單體之間的交換，姐妹染色單體的交換，細(xì)菌及某些低等真核生物的轉(zhuǎn)化，細(xì)菌的轉(zhuǎn)導(dǎo)、接合、噬菌體的重組都屬于這一類型。第五章 DNA重組 同源重組 Homologous rebination 位點專一性重組 Sitespecific rebination 轉(zhuǎn)座重組 Transposition ? 生物進(jìn)化需要可遺傳的變異不斷產(chǎn)生 ,變化的根本原因是突變 ,但就每個個體而言發(fā)生突變的幾率畢竟很低。 第一節(jié) 同源重組 Homologous rebination ? 同源重組指由兩條同源區(qū)的 DNA分子，通過配對、鏈斷裂和再連接，而產(chǎn)生的片段間交換的過程。 ? 其特征是發(fā)生在同源 DNA序列之間。由于交聯(lián)在一起的兩條雙鏈 DNA分子實際上處在不斷地異構(gòu)化中，切口可能在兩對同源鏈中任意一對上發(fā)生。 ? 連接分子可以以兩種交替方式進(jìn)行拆分，兩側(cè)基因或是發(fā)生交互重組，或是無重組發(fā)生。 二、細(xì)菌的基因轉(zhuǎn)移與重組 ? 細(xì)菌可以通過多種途徑進(jìn)行細(xì)胞間基因轉(zhuǎn)移，并通過基因重組以適應(yīng)隨時改變的環(huán)境。通過接合而轉(zhuǎn)移 DNA的能力由接合質(zhì)粒提供，與接合功能有關(guān)的蛋白質(zhì)均由接合質(zhì)粒所編碼。F質(zhì)粒 DNA可以通過重組整合到受體的染色體
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