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il8生物活性的檢測-全文預(yù)覽

2025-01-13 21:48 上一頁面

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【正文】 甲醇, Gimsa染色液 紅細(xì)胞裂解液: 豚鼠中性粒細(xì)胞, Tris/ 液體石蠟, 將 90ml NH4Cl中,調(diào) 實驗程序 : 一豚鼠嗜中性粒細(xì)胞的制備 : 1)取成年豚鼠 1只,腹腔注射含 %糖原的生理鹽水, 13小時后,用 PBS緩沖液沖洗腹腔,收集腹腔液,1500rpm/min 10min,棄上清。m或 8181。濾膜將小室分隔成上下兩部分。 趨化因子誘導(dǎo)的細(xì)胞移動方式有兩類: 化學(xué)增活現(xiàn)象,指增強(qiáng)細(xì)胞的隨機(jī)運(yùn)動,瓊脂糖小滴化學(xué)動力實驗是 檢測這種活性的比較簡易,快速,重復(fù)性好的方法。 IL8的趨化作用沒有種屬特異性,因此,可以用豚鼠嗜中性粒細(xì) 胞代替人嗜中性粒細(xì)胞對其進(jìn)行活性檢測 。 微孔小室中的趨化實驗 : 微孔小室中的趨化實驗是根據(jù)靶細(xì)胞(單核巨噬細(xì)胞,中性粒細(xì)胞 或淋巴細(xì)胞等)能夠趨化性主動遷移,穿過一定孔徑的濾膜而設(shè)計 的。m孔徑的 PVPF聚碳酸膜,趨化時間為 90分鐘;粘附力弱的淋巴細(xì)胞則 用表面復(fù)以明膠或纖粘素的 5181。每次實驗都需設(shè)好對照,因為不同 來源或活力靶細(xì)胞的趨化能力差異很大 趨化因子活性的表達(dá)方式有三種 , 其中最常用的是用趨化指數(shù)表示,趨化指數(shù)( chemotactic index,CI) 是指細(xì)胞遷移到待測樣品液的數(shù)目和遷移到對照液的數(shù)目的比值 。 3)將純化后的嗜中性粒細(xì)胞溶在 serumfree RPMI 1640中,細(xì)胞計數(shù),調(diào)整細(xì)胞濃
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