《細胞工程final》ppt課件-全文預覽
【正文】 8年， Okada發(fā)現(xiàn)紫外滅活仙臺病毒可引起艾氏腹水瘤細胞彼此融合。 棄上清，加入預冷的凍存液，吹打均勻。不易發(fā)現(xiàn)，對青霉素有抗藥性。 —— ② 不死性，接觸抑制，不致癌 從原代培養(yǎng)向傳代培養(yǎng)的原因？ 細胞會因 密度過大 和代謝消耗引起 營養(yǎng) 枯竭，不能正常生長 動物原代細胞分離培養(yǎng)代 35 細胞培養(yǎng)過程中的污染不僅僅指微生物，而且還包括所有混入培養(yǎng)環(huán)境中的、對細胞生存有害或造成細胞不純的物質，包括生物和化學物質。 1951年， Gey建立了人體宮頸癌 Hela細胞系。 （不同種生物之間存在著生殖隔離，所以用傳統(tǒng)的有性雜交方法是不可能做到這一點的） 19 體細胞融合產生遠緣雜交 植物體細胞雜交 20 植物體細胞雜交過程 植物細胞 A 植物細胞 B 去掉細胞壁 去掉細胞壁 原生質體 A 原生質體 B 原生質體融合 雜合的原生質體 再生出細胞壁 雜種細胞 細胞分裂 分化發(fā)育 愈傷組織 雜種植株 21 植物體細胞雜交過程 原生質體制備 取材與除菌 ： 肥皂水 70%酒精 3%次氯酸鈉 —無菌水沖洗 —無菌濾紙吸干 酶解： 纖維素酶、果膠酶等 分離 ： 過濾、離心 洗滌 ： 去除酶等物質 鑒定 ： 22 植物體細胞雜交過程 原生質體制備 原生質體融合（人工誘導） 化學誘導融合 ： 聚乙二醇結合高鈣高 pH 缺點：具有細胞毒性 物理法誘導融合： 離心、振動、電刺激等 23 植物體細胞雜交過程 原生質體制備 原生質體融合（人工誘導） 雜種細胞的篩選和培養(yǎng)（形成愈傷組織） 雜合細胞再生出細胞壁后轉移到合適的培養(yǎng)劑，待長出愈傷組織再按常規(guī)方法誘導其長芽、生根、成苗。 ?固定化的細胞密集而緩慢的生長，利于分化。目前發(fā)現(xiàn)的植物天然代謝物已經(jīng)超過 2萬種。 8 9 植物組織培養(yǎng)的過程 離體的植物器官、組織或細胞 1. 選擇外植體，以幼嫩的組織或器官為宜 2. 除去病原菌及雜菌 自來水漂洗 —消毒 —無菌水沖洗 —吸干 3. 培養(yǎng)基制備 蔗糖和葡萄糖、氮、磷、鉀、鎂 微量元素，如鐵、錳、硼酸 微量有機物：吲哚乙酸、激動素、肌醇 10 植物組織培養(yǎng)的過程 離體的植物器官、組織或細胞 脫分化（誘導去分化） 細胞脫分化 （ dedifferentiation) 是指失去已分化細胞的典型特征，或消除了細胞分工，重新處于旺盛的有絲分裂狀態(tài) 。 原因： 是生物體的每一個細胞都含有該物種所特有的全套遺傳物質及發(fā)育為完整個體所必需的全部基因。 動物細胞工程 植物細胞工程 微生物細胞工程 2 基本操作技術 ? 無菌操作技術 ? 細胞培養(yǎng)技術 ? 細胞融合技術 細胞工程的基本操作技術 操作前將界面上的細菌和病毒等微生物殺滅； 操作過程中使界面與外界隔離 ,避免微生物的侵入 3 細胞工程的研究范疇 ? 植物細胞與組織培養(yǎng) ? 動物細胞與組織培養(yǎng) ? 細胞融合 ? 細胞核移植 ? 染色體工程 ? 胚胎工程 ? 干細胞與組織工程 ? 轉基因生物與生物反應器 4 第一節(jié) 植物細胞工程 植物細胞工程的理論基礎是： 植物細胞的全能性 植物細胞工程常用的技術是 植物組織培養(yǎng) 植物體細胞雜交 概念： 細胞的全能性是指生物體的細胞具有使后代細胞形成完整個體的潛能。 6 植物細胞工程的范疇 植物組織培養(yǎng) 植物細胞培養(yǎng)和次生代謝物的生產 植物細胞原生質體的制備與融合 單倍體植物的誘發(fā)與利用 人工種子 7 植物組織培養(yǎng)的概念 在離體條件下，將植物組織在無菌和人為控制外因（營養(yǎng)成分、光、溫度、濕度）的條件下，培養(yǎng)獲得大量的細胞群體， 最終形成完整的植株的一種技術。 13 植物組織培養(yǎng)的過程 離體的植物器官、組織或細胞 脫分化（誘導去分化
研究報告相關推薦
鄂ICP備17016276號-1