基因工程菌生長代謝的特點(diǎn)-全文預(yù)覽
【正文】 強(qiáng)度相差不大。常用的碳源有：葡萄糖、甘油、乳糖、甘露糖、果糖等。 二、基因工程菌的培養(yǎng)工藝 基因工程菌的發(fā)酵與傳統(tǒng)的微生物發(fā)酵不同 ,基因工程菌帶外源基因 ,發(fā)酵的目的是使外源基因高效表達(dá)。 3 連續(xù)培養(yǎng) 將種子接入發(fā)酵反應(yīng)器中，攪拌培養(yǎng)至菌體濃度達(dá)一定程度后，開動(dòng)進(jìn)料和出料蠕動(dòng)泵，以一定稀釋率進(jìn)行不間斷培養(yǎng)。 DOStat方法： 調(diào)節(jié)攪拌轉(zhuǎn)速和通氣速率來控制溶氧在 20%，用固定或手動(dòng)調(diào)節(jié)補(bǔ)料的流加速率。 第八節(jié) 重組工程菌的培養(yǎng) 基因工程菌的培養(yǎng)過程包括 : ⑴ 通過搖瓶操作基因工程菌生長的基礎(chǔ)條件 ,如溫度、 pH、培養(yǎng)基各種組分、碳氮比，分析表達(dá)產(chǎn)物的合成、積累對(duì)受體細(xì)胞的影響 。大規(guī)模生產(chǎn)時(shí)不可取。低拷貝質(zhì)粒工程菌產(chǎn)生不含質(zhì)粒子代菌頻率高，增加工程菌質(zhì)?？截悢?shù)可提高穩(wěn)定性；高拷貝質(zhì)粒工程菌產(chǎn)生不含質(zhì)粒子代菌頻率低，但對(duì)穩(wěn)定性不利。 生長速率 /h 質(zhì)?？截悢?shù) 1 10 950 40 0 β半乳糖苷酶工程菌的連續(xù)培養(yǎng) 3 ： 質(zhì)粒自發(fā)缺失與質(zhì)粒中短的正向重復(fù)序列之間的同源重組有關(guān)，具有兩個(gè)串聯(lián)啟動(dòng)子的質(zhì)粒更容易發(fā)生缺失；在無同源性的兩個(gè)位點(diǎn)之間也會(huì)發(fā)生缺失，培養(yǎng)條件也會(huì)對(duì)質(zhì)粒結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定產(chǎn)生影響。 ⑵這兩種菌比生長速率差異的大小。 第五節(jié) 基因工程菌的不穩(wěn)定性 基因工程菌在傳代過程中常出現(xiàn)質(zhì)粒不穩(wěn)定的現(xiàn)象。 “嚴(yán)緊反應(yīng) ” 是當(dāng)氨酰 tRNA不足時(shí) ,核糖體在密碼子上停留 ,并合成被稱為魔點(diǎn)的 ppGpp的結(jié)果。 二、菌體生長與前體供應(yīng)的關(guān)系 前體：細(xì)胞從外界吸收的或在代謝途徑中形成的，可被進(jìn)一步轉(zhuǎn)變成終點(diǎn)產(chǎn)物的化合物 在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入氨基酸（小分子前體）能使菌體比生長率提高，蛋白合成增加 基因工程菌質(zhì)粒的表達(dá)需與宿主細(xì)胞競(jìng)爭(zhēng)共同的前體和催化結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致工程菌生長速率降低。 分批培養(yǎng)中選擇不同的碳源，連續(xù)培養(yǎng)中控制稀釋速率等都能一定范圍內(nèi)控制菌體的生長，從而控制乙酸的產(chǎn)生，減少它的抑制作用。 培養(yǎng)條件的改變，都會(huì)改變菌體的能量代謝和小分子前體的供應(yīng)，影響生物大分子的合成和菌體的生長。第五節(jié) 基因工程菌生長代謝的特點(diǎn) 菌體的生長通常用比生長速率來表示。 大腸桿菌的蛋白 /菌體量的比值是基本恒定的，因而菌體的生長速度反映了蛋白質(zhì)的合成速度。適當(dāng)提高 pH，可減少乙酸的抑制作用。 采用磷酸乙?；溉?
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