蛋白質分子凝聚從溶液中析出及現(xiàn)象稱為蛋白質沉淀-全文預覽
【正文】 變性后并不一定沉淀，變性蛋白質只在等電點附近才沉淀，沉淀的變性蛋白質也不一定凝固?！ ?五)加熱凝固 將接近于等電點附近的蛋白質溶液加熱，可使蛋白質發(fā)生凝固(coagulation)而沉淀。 臨床血液化學分析時常利用此原理除去血液中的蛋白質，此類沉淀反應也可用于檢驗尿中蛋白質。因為此時蛋白質分子有較多的負離子易與重金屬離子結合成鹽。各種蛋白質鹽析時所需的鹽濃度及pH不同，故可用于對混和蛋白質組分的分離。 如將蛋白質溶液pH調節(jié)到等電點，蛋白質分子呈等電狀態(tài)，雖然分子間同性電荷相互排斥作用消失了。蛋白質分子凝聚從溶液中析出的現(xiàn)象稱為蛋白質沉淀(precipitation)，變性蛋白質一般易于沉淀，但也可不變性而使蛋白質沉淀，在一定條件下，變性的蛋白質也可不發(fā)生沉淀。不過NH4SO4不能保證所有的蛋白都能 沉下來，活性也不能保證完全。親和柱和抗體吸附蛋白不是不可以，成本更是貴的嚇人，親和柱都在300 RMB一支以上。超濾是一種膜分離技術，它的特點是使用不對稱多孔膜，根據(jù)分子的大小來分離溶液中的大分子物質與小分子物質，是一種溫和的、非變性的物理分離方法，尤其適用于蛋白質等大分子溶液的濃縮，純化以及緩沖體系交換等。但若將強堿和強酸溶液的pH調節(jié)到等電點，則變性蛋白質凝集成絮狀沉淀物，若將此絮狀物加熱，則分子間相互盤纏而變成較為堅固的凝塊。如煮熟的雞蛋，蛋黃和蛋清都凝固。在常溫下，有機溶劑沉淀蛋白質往往引起變性?！ ∨R床上利用蛋白質能與重金屬鹽結合的這種性質，搶救誤服重金屬鹽中毒的病人，給病人口服大量蛋白質，然后用催吐劑將結合的重金屬鹽嘔吐出來解毒。調節(jié)蛋白質溶液的pH至等電點后，再用鹽析法則蛋白質沉淀的效果更好?！ ∫鸬鞍踪|沉淀的主要方法有下述幾種： (一)鹽析(Salting Out) 在蛋白質溶液中加入大量的中性鹽以破壞蛋白質的膠體穩(wěn)定性而使其析出，這種方法稱為鹽析。若無外加條件，不致互相凝集?！ 】梢钥闯觯鐚⒌鞍踪|溶液pH調節(jié)到等電點，蛋白質分子呈等電狀態(tài)，雖然分子間同性電荷相互排斥作用消失了。蛋白質分子凝聚從溶液中析出的現(xiàn)象稱為蛋白質沉淀（precipitation），變性蛋白質一般易于沉淀，但也可不變性而使蛋白質沉淀，在一定條件下，變性的蛋白質也可不發(fā)生沉淀。然而除掉這兩個穩(wěn)定因素（如調節(jié)溶液pH至等電點和加入脫水劑）蛋白質便容易凝集析出。蛋白質所形成的親水膠體顆粒具有兩種穩(wěn)定因素，即顆粒表面的水化層和電荷。但是還有水化膜起保護作用，一般不致于發(fā)生凝聚作用，如果這時再加入某種脫水劑，除去蛋白質分子的水化膜，則蛋白質分子就會互相凝聚而析出沉淀；反之，若先使蛋白質脫水，然后再調節(jié)pH到等電點，也同樣可使蛋白質沉淀析出。例如用半飽和的硫酸銨來沉淀出血清中的球蛋白，飽和硫酸銨可以使血清中的白蛋白、球蛋白都沉淀出來，鹽析沉淀的蛋白質，經(jīng)透析除鹽，仍保證蛋白質的活性。重金屬沉淀的蛋白質常是變性的，但若在低溫條件下，并控制重金屬離子濃度，也可用于分離制備不變性的蛋白質。 (四)有機溶劑沉淀蛋白質 可與水混合的有機溶劑，如酒精、甲醇、丙酮等，對水的親和力很大，能破壞蛋白質顆粒的水化膜，在等電點時使蛋白質沉淀。加熱首先是加熱使蛋白質變性，有規(guī)則的肽鏈結
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