免疫共沉淀中文使用說明書(pierce26149)-全文預(yù)覽
【正文】 Lysis/Wash Buffer，移液器上下吹打混勻混合物，再向細(xì)胞懸液中加入剩余體積的IP Lysis/Wash Buffer；，孵育溶解產(chǎn)物，期間周期性搖蕩；13000g離心10min去除細(xì)胞殘?jiān)?。如果長期儲(chǔ)存，需添加sodium azide（疊氮化鈉）%。，室溫渦旋孵育90120min，確保漿體在孵育過程中處于懸浮狀態(tài)；，擰開并拿走螺帽，將離心柱置于收集管中離心，保存濾液以便驗(yàn)證抗體耦合；，添加200μl 1Coupling Buffer，離心棄濾液，重復(fù)此步驟1次；11. 向離心柱中添加200μl Quenching Buffer，離心棄濾液；12. 將離心柱放于紙巾上，輕巧離心柱底部，去除殘留液體，插上底塞。使用大口徑（或剪掉一段槍頭端），添加50μl樹脂懸液到Pierce提供的離心柱中，將離心柱放入微量離心管中，1000g離心1min，棄濾液； 1Coupling Buffer 清洗樹脂2次，離心棄濾液；，輕巧離心柱底部，去除剩余的液體，插上底塞；，調(diào)整體積至200μl，使用足夠的超純水和20Coupling Buffer來制備1Coupling Buffer。參考重要產(chǎn)品信息節(jié)表1中的建議抗體用量和樹脂體積用量。免疫共沉淀試劑盒通過將共價(jià)結(jié)合抗體固定在一個(gè)胺類活性反應(yīng)樹脂上解決了這一問題。免疫共沉淀試劑盒，可通過將鉚釘抗體固定在瓊脂糖支撐物上，從裂解液中或其他復(fù)雜混合物中，分離出天然蛋白復(fù)合物。 CoImmunoprecipitation (CoIP) Kit（26149）中文說明書介紹：Thermo 公司的Pierce174。Pierce174。根據(jù)實(shí)際使用比例參考這一協(xié)議步驟。 Plus
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